高效液相色谱法测定水产品中四环素类抗生素残留

建立了一种高效液相色谱法测定水产品中土霉素、四环素、去甲基金霉素、金霉素、脱氧土霉素的分析方法。样品用5.0%高氯酸溶液提取,上清液用OasisHLB固相萃取柱净化,用紫外检测器于355nm测定。土霉素、四环素、去甲基金霉素检测限为0.01mg/kg,金霉素、脱氧土霉素检出限为0.02mg/kg。5种药物的回收率在74.8%~89.3%之间,相对标准偏差为3.95%~9.95%。方法适用于水产品中四环素类抗生素残留的检测。     

气相色谱-质谱法测定肝脏组织中盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺

建立了同时测定动物肝组织中盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺残留量的固相萃取-气相色谱-质谱分析方法。动物肝组织样品在碱化的条件下用乙酸乙酯和异丙醇混合溶剂提取,提取液浓缩后用乙酸乙酯溶解,然后再用稀盐酸反萃取去除脂肪,调pH值后经SCX固相萃取(SPE)柱净化,洗脱液经氮气吹干后经双三甲基硅基三氟乙酰氨(BSTFA)衍生,采用选择离子模式(盐酸克伦特罗:86、212、262、277,盐酸莱克多巴胺:163、192、234、250)进行测定,外标法定量。盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺的检出限分别为0.30和1.00μg/kg。盐酸克伦特罗添加浓度在1.0~5.0μg/kg范围内,添加回收率为77.4%~88.3%;相对标准偏差(RSD)为3.1%~5.1%;盐酸莱克多巴胺添加浓度在4.0~20.0μg/kg,添加回收率为69.8%~82.1%;相对标准偏差(RSD)为3.5%~4.9%;衍生物的峰面积与被测物浓度分别在0.003~1.00 mg/L和0.012~4.00 mg/L范围内呈良好的线性关系,线性回归系数均大于0.999。     

高效液相色谱法测定动物组织中四环素类抗生素残留量的研究

建立了动物组织中四环素、金霉素、土霉素、强力霉素、去甲基金霉素、甲烯土霉素和二甲胺四环素等7种四环素类抗生素残留量的液相色谱同时测定方法。方法采用Inertsil C8-3(5μm,250 mm×4.0 mm i.d)反相色谱柱,以pH 4.0的EDTA-Mcllvaine缓冲溶液为提取溶液,以HLB固相萃取柱为净化柱,流动相为甲醇+乙腈+0.01mol/L三氟乙酸(梯度洗脱),流速1.5 mL/min,检测波长350 nm,进样量100μL。方法的检出限为1.5~5.0μg/kg,测定低限为50μg/kg,线性范围为50~1200μg/kg,加标回收率为73.8%~103%,相对标准偏差为0.5%~8.5%。方法适用于动物肌肉、肝脏和肾脏组织中7种四环素类抗生素残留量的同时检测。     

GC–MS法测定猪肉样品中盐酸克伦特罗残留

建立了乙酸乙酯提取、SCX小柱净化、GC–MS分析、外标法定量的猪肉样品中盐酸克伦特罗残留的检测方法。盐酸克伦特罗在10.24~512.0 ng/mL的范围内线性关系良好,相关系数r=0.999 7。在1.92,5.12,12.80μg/kg添加水平下的回收率为73.0%~84.8%,测定结果的相对标准偏差为4.3%~8.2%(n=6)。2日间3浓度点的日间平均回收率在77.1%~81.2%之间,相对偏差在1.3%~5.3%之间。该方法简便、快速,精密度和准确度较好,能满足日常大批量猪肉样品中盐酸克伦特罗残留的检测要求。     

高效液相色谱串联质谱法测定牛奶中四环素类抗生素及其代谢产物

建立了牛奶中四环素、金霉素、土霉素、强力霉素、去甲基金霉素、甲烯土霉素和二甲胺四环素等7种四环素类抗生素及差向四环素、差向金霉素、差向土霉素等3种代谢产物多残留的液相色谱串联质谱同时测定方法。方法采用Inertsil C8-3(5μm,150 mm×2.1 mm i.d)反相色谱柱,以pH 4.0的EDTA-M c llvaine缓冲溶液为提取溶液,以HLB固相萃取柱为净化柱,流动相为甲醇 0.01 mol/L三氟乙酸(梯度洗脱),流速0.3mL/m in,以正离子多反应监测模式测定,进样量30μL。方法的检出限为0.5~10μg/kg;测出限为50μg/kg;线性范围为50~1200μg/L,加标回收率为74.4%~101%,相对标准偏差为1.8%~8.3%。本方法具有灵敏、准确、简便、快速等优点,适用于牛奶中四环素类抗生素及其代谢产物多残留的同时确证检测。     

同位素稀释结合固相萃取快速测定动物组织中β2-兴奋剂

本文采用同位素稀释结合固相萃取技术,测定动物组织中特布他林、克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺4种β2-兴奋剂。动物组织加同位素内标D3-沙丁胺醇和D9-克伦特罗,经甲醇提取后,正己烷脱脂,过SLS离子交换固相萃取柱净化,用BSTFA 1%(φ)TMCS衍生,采用GC/MS进行测定,内标法定量。实验表明,动物组织中添加2.0~10.0μg/kg浓度水平的β2-兴奋剂,方法回收率在72.5%~97.9%,相对标准偏差1.0%~11.4%,线性范围为12.5~500μg/L,样品中特布他林、克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺最低检出限分别为0.5μg/kg、1.0μg/kg、0.5μg/kg和1.0μg/kg。     

改进QuChERS–气相色谱法测定水产品中硫丹残留量

建立了水产品中硫丹残留量的改进样品快速处理技术(QuChERS)–气相色谱法检测方法。水产品样品以乙腈为提取剂,应用改进的QuChERS方法进行净化,并利用气相色谱法进行检测,以基质匹配标准溶液外标法定量。在2~10μg/kg添加水平范围内,α-硫丹和β-硫丹的平均回收率分别为97.8%~107.7%,98.5%~102.9%;测定结果的相对标准偏差分别为1.77%~10.4%,2.55%~5.84%;方法检出限分别为1.8,2.0μg/kg;定量限分别为5.4,6.0μg/kg。该法满足水产品中硫丹残留量的测定要求。     

分子印迹固相微萃取-高效液相色谱法测定水和牛奶中三种四环素类药物

以土霉素为模板分子制备了分子印迹固相微萃取涂层,建立了选择性萃取、高效液相色谱法同时测定牛奶和水样中四环素、盐酸土霉素和金霉素三种四环素类抗生素的分析方法。将0.1mmol盐酸土霉素在功能单体和交联剂的作用下制备分子印迹预聚合液,将经多巴胺处理后的不锈钢丝前端1~2cm置入其中,制备分子印迹固相微萃取涂层。3mL牛奶和水样经涂层萃取50min、解析5min,乙腈-10mmol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH=3)作为流动相,二极管阵列检测器(DAD)定量分析。实验结果表明,分子印迹涂层对四环素类目标物的特异性选择明显优于非印迹涂层。三种目标抗生素在100~1 000μg/L(牛奶)和10~1 000μg/L(水样)浓度范围内线性关系良好,相关系数在0.9959以上,四环素、盐酸土霉素和金霉素的检出限(S/N=3)为40~80μg/L(牛奶)和5~10μg/L(水样);加标水平为500μg/L时,回收率范围97.8%~109.0%,相对标准偏差(n=7)分别为5.3%~8.2%(牛奶),3.7%~6.4%(水样)。该方法前处理简单、绿色环保、选择性好、精密度好、回收率高,可用于牛奶和水样中上述三种四环素的实际检测。     

HPLC-MS/MS同时测定水产品中喹烯酮、喹乙醇和5种大环内酯类抗生素残留

建立了水产品中喹烯酮、喹乙醇和5种大环内酯类抗生素同时测定的高效液相色谱串联质谱法。向样品中加入无水硫酸钠,以乙酸乙酯-乙腈的混合溶液为提取剂,用正己烷净化。以乙腈-10 mmol/L甲酸铵溶液为流动相,流速为0.3 mL/min,以Hypersil GOLD为色谱分离柱,用配有电喷雾离子源的三重四极杆质谱进行定性定量分析。在1～1000 ng/mL范围内,7种药物呈良好线性关系。在鲫鱼、南美白对虾和甲鱼空白肌肉中添加水平为2～10μg/kg时,该方法的回收率为67.52%～108.89%,相对标准偏差为4.2%～14%,方法检测限为1μg/kg,定量限为2μg/kg。方法适用于同时测定水产品中喹烯酮、喹乙醇和5种大环内酯类药物的残留量。     

动物尿液中盐酸克伦特罗的分子印迹固相萃取-气相色谱-质谱法研究

采用分子印迹聚合物(MIP)固相萃取小柱提取、净化并富集猪尿液中的盐酸克伦特罗分子,用N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺(BSTFA)衍生化,毛细管气相色谱-质谱联用(选择离子模式,选择离子为277、262、243和86)对衍生物分析。优化了MIP固相萃取柱的淋洗条件,考察了MIP固相萃取柱的净化效果和消除基体干扰能力,建立了对动物尿液中盐酸克伦特罗的定性、定量分析的方法。在优化条件下,本法检出限(LOD)为0.51μg/L,定量限(LOQ)为1.00μg/L;不同盐酸克伦特罗加入量的回收率为71.0%~89.3%;相对标准偏差为3.2%~9.7%。将该方法与农业行业标准方法比较,结果吻合较好。但该方法灵敏度和精密度高,操作更为简单、快捷。     

低延迟体积模式液相色谱-串联质谱法检测猪肉中盐酸克伦特罗残留量

应用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),在液相部分采用低延迟体积模式,以盐酸克伦特罗-D9为内标,建立了快速测定猪肉中盐酸克伦特罗残留的检测方法。样品经过提取纯化后,采用C18色谱小柱进行梯度洗脱分离,电喷雾正离子MRM质谱检测。低延迟体积模式可实现洗脱液的快速梯度变换,仪器检测时间为2.0min;盐酸克伦特罗的保留时间为0.82min,其保留时间重现性好,所建立的标准曲线线性较好(R2=0.9993)。该方法的定量限(LOQ)为0.5μg/kg;当加标量为0.5、5、10μg/kg时,其回收率为81.2%～114.2%,相对标准偏差为6.4%～11.1%(n=6)。该方法检测速度快、灵敏度高、结果准确,可以满足实验室对猪肉中盐酸克伦特罗残留的高通量测试。     

限进印迹柱在线净化/液相色谱-串联质谱法检测动物源食品中克伦特罗与莱克多巴胺残留量

利用针对β-受体激动剂的限进型分子印迹整体柱,通过切换阀的组合和在线净化条件的优化,建立了检测动物源食品中克伦特罗和莱克多巴胺残留的在线净化/液相色谱-串联质谱法。样品经酶解和乙酸铵缓冲液提取后,由在线分子印迹柱净化,CAPCELL PAK C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,5μm)分离,多反应监测模式测定,内标法定量。克伦特罗和莱克多巴胺的定量下限分别为0.02μg/kg和0.09μg/kg。在猪肉、牛肉、香肠和奶粉中添加0.05~0.20μg/kg克伦特罗和0.5~2.0μg/kg莱克多巴胺,回收率为84.0%~103.8%,相对标准偏差小于12%。     

气相色谱法和液相色谱-串联质谱法测定水产品中敌敌畏残留量

建立了水产品中敌敌畏残留量检测的两种不同方法,比较了气相色谱(GC)与液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法的适用性。GC法检出限为3.0μg/kg,定量限为10.0μg/kg;LC-MS/MS法检出限为0.3μg/kg,定量限为1.0μg/kg。当敌敌畏添加水平在5.0~15.0μg/kg时,GC法方法回收率为75.0%~90.9%,相对标准偏差为2.8%~9.6%;LC-MS/MS法方法回收率为89.7%~98.1%,相对标准偏差为1.0%~5.0%。结果表明,应用GC与LC-M S/M S检测方法均能满足水产品中敌敌畏残留分析要求,但在不考虑实验成本的前提下,LC-MS/MS法更具有优势。     

气相色谱-质谱法测定猪肉中盐酸克伦特罗残留量

按NY/T 468-2006所述方法在碱性条件下,用乙酸乙酯提取和用盐酸溶液反萃取制得含有盐酸克伦特罗的试样溶液,调节溶液的酸度至pH 4.5后,经SCX固相萃取柱净化。在经净化后的试液中加入1.6mg·L-1美托洛尔溶液40μL作为内标。将溶液置于60℃水浴中吹氮蒸干,加入甲苯200μL和BSTFA衍生试剂100μL,于80℃烘箱中衍生1h。冷却后再加甲苯200μL,经DB-5MS毛细管柱分离,在SIM模式下进行MS测定,选择监测离子为m/z86(定量离子)和m/z262,243,187(定性离子)。内标法定量。盐酸克伦特罗的线性范围为16~512μg·L-1,其检出限(3S/N)为1.0μg·kg-1。以空白样品为基体进行加标回收试验,测得回收率在79.7%~86.6%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在4.8%~6.7%之间。     

固相萃取-高效液相色谱/串联质谱法测定水产品中硫酸新霉素残留量

建立了一种分析水产品中硫酸新霉素残留量的固相萃取-高效液相色谱/串联质谱法。样品经三氯乙酸水溶液提取,固相萃取小柱净化。用带加热电喷雾离子源的高效液相色谱/串联质谱以选择反应离子监测(SRM)正离子模式检测,基质标准曲线定量。结果显示,在草鱼、斑点叉尾鮰、鳗鲡、南美白对虾和甲鱼空白肌肉中添加硫酸新霉素水平为25~1 000μg/kg时,其加标回收率为91.04%~114.57%,相对标准偏差为1.91%~9.62%。硫酸新霉素的检测限为10μg/kg,定量限为25μg/kg。方法适用于水产品中硫酸新霉素残留量的测定,也适用于硫酸新霉素在水产动物体内组织分布和消除研究。     

高效液相色谱双波长法同时测定水产品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿

通过紫外可见分光光度计扫描,发现孔雀石绿和隐性孔雀石绿的最大吸收波长分别为620 nm和260 nm。在相应的最大吸收波长处,采用高效液相色谱-双波长紫外可见检测器对水产品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿同时测定。结果表明,水产品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿回收率分别为83%~89%和87%~93%,相对标准偏差分别为2.12%~2.53%和2.16%~2.65%,检出限分别为1μg/kg和2μg/kg。     

CdTe量子点荧光探针测定盐酸四环素含量的研究

研究了CdTe量子点(QDs)荧光猝灭法测定盐酸四环素含量的分析方法。以3-巯基丙酸(3-MPA)修饰的CdTe QDs为荧光探针,考察了缓冲液体系及pH值、反应时间等不同条件下盐酸四环素对CdTe QDs的荧光猝灭作用。结果表明在pH 7.5的0.10mol·L-1磷酸盐缓冲溶液(PBS)中,反应时间5min时,盐酸四环素浓度在20~180μg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9978),检测限(S/N=3)为1.3μg·mL-1,对盐酸四环素胶囊中盐酸四环素含量进行定量测定,相对标准偏差(RSD)在1.2%~2.7%之间,加标回收率在96.5%~101.1%之间。该方法快速、简便、灵敏、准确,可用于实际样品中盐酸四环素含量的测定。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的残留量

建立了水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素药物残留量同时测定的高效液相色谱-串联质谱方法。以氘代氯霉素做内标,选择乙酸乙酯提取,HLB固相萃取柱净化,洗脱液氮气吹干,采用LC-MS/MS选择反应监测(SRM)负离子模式进行定性、定量分析。结果表明:氯霉素的检出限(LOD)为0.01μg/kg,甲砜霉素和氟甲砜霉素检出限(LOD)为0.03μg/kg,检测结果的相对标准偏差为3.3%～9.7%(n=6),加标回收率达到78.6%～110.5%。该方法在水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素药物的残留测定中具有很好的应用前景。     

增强化学发光酶免疫法对猪肉中盐酸克伦特罗的检测

建立了猪肉中克伦特罗(CLB)的直接竞争化学发光酶免疫检测(dc-CLEIA)方法。通过优化离子强度、pH值确立了化学发光酶免疫法的标准曲线,优化后dc-CLEIA的检出限可达0.02μg/L。猪肉中的盐酸克伦特罗用高氯酸提取、SPE净化后绘制基质曲线,基质曲线与标准曲线吻合,说明基质影响基本消除。测定0.10、1.0、5.0μg/kg 3个水平的添加回收率,平均回收率为83%~98%,批内与批间的相对标准偏差均小于15%。进一步研究了dc-CLEIA与HPLC两种方法测定猪肉样品的相关性,结果显示两者测定结果相关性良好,r=0.964 7,说明所建立的直接化学发光酶免疫方法可用于实际样品的检测,结果准确可靠。     

气相色谱-质谱法测定水产品中19种氯代酚及其钠盐

建立了用气相色谱-质谱(GC-MS)联用法测定水产品中19种氯代酚及其钠盐的分析方法。试样用H_2SO_4消解后,用环己烷-乙酸乙酯提取酸解液中的氯代酚,利用酚类易溶于稀碱溶液的性质,将氯代酚提取到稀碱液中,调稀碱液pH至微酸性,用二氯甲烷-正己烷溶液萃取,无水Na_2SO_4脱水,浓缩定容并硅烷化衍生后,用GC-MS仪EI源选择离子模式检测,氘代4-氯-3-甲基酚(PCMC-d_2)和氘代2,4,6-三溴苯酚(2,4,6-TBP-d_2)为内标,内标法定量。氯代酚在2.0~70.0μg/L范围内,其浓度和峰面积呈良好的线性相关(r≥0.999);水产品中添加量为1.00μg/kg、2.00μg/kg、3.00μg/kg和7.00μg/kg时,回收率一氯酚(MCP)为55.2%~88.8%,二氯酚(DCP)为63.0%~114%,三氯酚(TCP)为76.0%~116%、四氯酚(TeCP)为78%~125%,五氯酚(PCP)为83.2%~104%;方法检出限在0.2~0.4μg/kg之间。