固相萃取-高效液相色谱/串联质谱同时检测动物源性食品中76种兽药残留

建立了固相萃取-高效液相色谱/串联质谱(SPE-HPLC/MS)同时测定动物源性食品中76种兽药残留的检测方法。样品采用乙腈和含Mg2+的柠檬酸缓冲液进行提取,去除有机相后以缓冲液重溶,聚合物和阳离子交换固相萃取柱串联净化,用甲醇和甲醇-氨水(95∶5,V/V)分步洗脱,液相色谱-串联质谱进行测定,基质曲线外标法定量。方法的定量下限为0.5μg/kg(β-受体激动剂类和三苯甲烷类)、1.0μg/kg(苯二氮卓类和硝基咪唑类)、5.0μg/kg(苯并咪唑类)和20μg/kg(磺胺类)。76种兽药在虾、猪肉、猪肝、鸡蛋和牛奶中的基质溶液标准曲线线性相关系数(r)大于0.907,回收率在59.4%～115.3%之间,相对标准偏差在2.6%～27.3%之间。采用本方法对市场中样品进行筛选,发现2例阳性样品中含有莱克多巴胺和地西泮残留,测定值分别为0.92和6.5μg/kg。     

通过式净化-高效液相色谱-串联质谱法测定动物源性食品中42种兽药残留

建立了猪牛肉、虾、鱼等动物源性食品中磺胺类、磺胺增效剂及喹诺酮类共42种兽药残留的通过式净化-高效液相色谱-串联质谱分析方法。样品经0.1%甲酸-乙腈溶液匀浆提取,过PRiME HLB小柱净化,浓缩后流动相溶解。以Waters Atlantis T3色谱柱(150 mm×4.6 mm,3μm)分离,用乙腈和0.1%甲酸为流动相进行梯度洗脱,电喷雾电离正离子源(ESI~+)、多反应监测模式保留时间窗口检测,基质匹配标准工作曲线定量。结果表明,42种兽药在1～100μg/kg范围内呈良好线性关系,相关系数(r)均大于0.998,42种兽药的检出限(S/N3)为1.0μg/kg、定量限为(S/N10)为2.0μg/kg,三个添加水平的回收率在81.1%～115.9%之间,批内、批间的相对标准偏差(RSD)为6.8%～22.1%。本方法具有简便、快捷、灵敏度高、定性准确等特点。     

分散固相萃取-超高效液相色谱-质谱/质谱法测定干果果肉中56种农药残留

针对干果果肉基质含水量低、含糖量较高等特点,建立了改进的分散固相萃取结合超高效液相色谱-质谱/质谱法(UPLC-MS/MS)测定干果果肉培育过程中可能使用的56种农药残留量。样品经水浸润,以0.1%甲酸-乙腈提取,改进的分散固相萃取法(PSA)净化,液相色谱-质谱/质谱法检测,基质匹配标准曲线外标法定量。56种农药在10~500μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.990,在5,10和50μg/kg添加水平下56种农药回收率范围为60.4%~127.9%;相对标准偏差在1.1%~20%(n=6)之间;检出限和定量限分别为0.1~1.0μg/kg和0.3~3.1μg/kg。方法适合于干果果肉中56种农残检测。     

GC-MS/NCI稳定同位素稀释技术检测动物源性食品中氯霉素的残留量

建立了一种用于各种动物源性食品中氯霉素残留量的气相色谱-负化学离子源质谱(GC-MS/NCI)检测方法。以氘代氯霉素(D5-CAP)为内标物,用乙酸乙酯对各类样品中的氯霉素进行提取,用正己烷和40 g/L NaCl溶液液液分配除脂肪,基质复杂的样品再用Oasi HLB固相萃取柱净化,经硅烷化衍生后由GC-MS/NCI在选择离子监测模式下进行测定。多数样品在0.2,0.5,1.0μg/kg3个添加水平下氯霉素的回收率处于87.8%和107.0%之间,相对标准偏差(RSD)不大于8.5%。方法在2.0~80.0μg/L范围内有良好的线性关系,基质复杂样品中氯霉素残留的检出限达到0.1μg/kg,基质简单样品的检测限可达0.05μg/kg。方法适合各种动物源性食品中氯霉素残留量的确证分析。     

通过式固相萃取结合亲水作用色谱-串联质谱法检测动物源性食品中15种抗病毒药物残留

建立了动物源性食品中15种抗病毒类药物残留的通过式净化-亲水作用色谱-串联质谱分析方法。样品经1%酸化乙腈溶液超声提取,冷冻离心后,经PRi ME HLB小柱净化,直接进样分析。以资生堂PC HILIC色谱柱进行分离,以10 mmol/L乙酸铵(含0.2%甲酸)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子(ESI+)模式电离、多反应监测(MRM)模式进行检测,基质匹配标准工作曲线定量。结果表明,15种抗病毒药物在0.2～80μg/kg范围内呈良好线性关系,相关系数(r~2)均大于0.999,15种抗病毒药物的检出限为0.1～1.0μg/kg之间,0.3,5.0,20μg/kg 3水平的加标回收率在65.9%～115%之间,RSDs为1.7%～9.2%。     

液相色谱–串联质谱法测定甘蓝中4-羟基百菌清的残留量

建立液相色谱–串联质谱法测定甘蓝中4-羟基百菌清残留的方法。以乙腈提取样品中的4-羟基百菌清,采用电喷雾负离子源(ESI–)和多重反应监测(MRM)模式测定,基质匹配标准工作曲线法定量。结果表明,甘蓝中4-羟基百菌清的质量浓度与其色谱峰面积呈良好的线性关系(r=0.999),线性范围为1.0~100μg/L,方法检出限为0.31μg/kg,定量限为1.0μg/kg。在5,10,50μg/kg 3个添加水平下,方法的回收率为88.0%~91.4%,测定结果的相对标准偏差为4.6%~7.2%(n=6)。该法简单、准确、快速、灵敏,符合法规残留限量监测要求。     

QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定动物源食品中4类29种禁限用兽药残留

采用改进的QuEChERS方法提取和净化鸡肉、鸡肝、猪肉、猪肝样品,建立了4类29种禁限用兽药残留的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。样品采用McIlvaine缓冲液-乙腈提取,提取液酸化、盐析后取乙腈相,用十八烷基硅烷(C18)和氨基(NH₂)吸附剂分散固相萃取净化,最后用电喷雾串联质谱仪在正离子多反应监测扫描(MRM)模式下进行测定,基质外标法定量。解决了四环素类兽药难与其他类兽药同时检测的难题。29种兽药在各自的浓度范围内,浓度与峰面积线性关系良好,相关系数不小于0.993。在29种兽药的定量限(LOQ)水平、20 μg/kg和50 μg/kg 3个添加水平下进行加标回收率试验,29种兽药的平均回收率在71.5%和93.2%之间,相对标准偏差在0.8%和7.7%之间。29种兽药的检出限为0.3~3.0 μg/kg,金刚烷胺的定量限为1.0 μg/kg,四环素类兽药的定量限为10.0 μg/kg,其他兽药的定量限均为5.0 μg/kg。该方法操作简便,净化效果好,灵敏度、准确度和精密度均符合多残留检测技术的要求,可为食品检验机构对动物组织中禁限用兽药残留的日常监控提供更方便、快捷的检测方法支持。     

HPLC-MS/MS法同时测定动物源性食品中9种吡咯里西啶类生物碱的含量

建立了高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)检测动物源性食品中9种吡咯里西啶类生物碱残留的分析方法。蜂蜜、乳制品及动物肝脏样品分别用0.05 mol/L盐酸、1%三氯乙酸、5%乙酸乙腈溶解,强阳离子固相萃取柱(Waters Oasis MCX)进行富集和净化后,用Phenomenex Kinetex C_(18)(4.6 mm×100 mm,2.6μm)色谱柱进行分离,以甲醇-0.1%甲酸-5 mmol/L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾正离子多反应监测模式下进行检测。9种吡咯里西啶类生物碱在0～100 ng/mL质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99。在10、20和50μg/kg加标水平下,5种不同基质中9种吡咯里西啶类生物碱的平均回收率为71.0%～103%,相对标准偏差(RSD)为3.0%～9.8%,方法的检出限为3μg/kg,定量下限为10μg/kg。该方法简单、快速、准确,适用于动物源性食品中吡咯里西啶类生物碱的同时测定。     

复合式净化体系结合实时直接分析-串联质谱测定畜禽肉中41种兽药残留北大核心CSCD

在食品安全问题屡禁不止的市场环境下,兽药残留带来的食品安全问题以及耐药性传递带来的生物安全问题备受关注。该研究建立了复合式净化体系结合实时直接分析-串联质谱(DART-MS/MS)测定畜禽肉中41种兽药残留的方法。首先采用单标溶液进样的方式优化筛选出最佳定性离子对和定量离子对,再按照欧盟2002/657准则要求对溶剂混合标准溶液和基质混合标准溶液中各兽药化合物的丰度比进行计算,确保DART-MS/MS对41种兽药化合物的准确定性,最后将QuEChERS技术的净化原料丙基乙二胺(PSA)、十八烷基键合硅胶(C18)与多壁碳纳米管相结合,形成复合式净化前处理体系,实现了对畜禽肉样品中物理化学性质差异较大的41种兽药化合物的一步净化。实验以41种兽药化合物的定量离子峰面积为判定指标,考察了DART离子源中关键性参数对其检测的影响。针对41种兽药化合物解离常数(pK_(a))的差异及各样品基质的特点,以回收率为判定指标分别对提取溶剂、基质分散溶剂、净化方式等进行了优化。确认了以1.0%甲酸乙腈溶液为提取溶剂,含50 mg PSA、50 mg C18的多壁碳纳米管为净化小柱的样品预处理方式。喹诺酮类、磺胺类、硝基咪唑类38种兽药在2~200μg/L内线性关系良好,相关系数为0.9979~0.9999,检出限为0.5μg/kg,定量限为2.0μg/kg;3种氯霉素类兽药在0.5~20μg/L内线性关系良好,相关系数为0.9995~0.9997,检出限为0.1μg/kg,定量限为0.5μg/kg。鸡肉、猪肉、牛肉、羊肉等不同基质样品中的41种兽药在低、中、高3个加标水平下的加标回收率为80.0%~109.6%,日内精密度为0.3%~6.8%,日间精密度为0.4%~7.0%。通过采用国家标准方法和该研究所建立的方法同时对100批次畜禽肉样品(猪肉、鸡肉、牛肉、羊肉各25批次)以及部分已知阳性样品进行测定,结果表明,3批次猪肉样品中检出磺胺嘧啶(89.2、78.1、105.3μg/kg),2批次鸡肉样品中检出沙拉沙星(56.3、102.0μg/kg),其余样品未检出;两种方法对已知阳性样品的检测结果一致。该方法具有操作快速、简单、灵敏、绿色等优点,适用于畜禽肉中多种兽药残留的同时筛查检测。     

气相色谱-三重四极杆串联质谱结合QuEChERS测定三七中有机磷农药残留

建立了改良的QuEChERS样品前处理法,结合气相色谱-三重四极杆串联质谱(GC-MS/MS)同时测定三七中18种有机磷农药残留的方法。样品经1%乙酸-乙腈提取,改良QuEChERS技术净化,利用GC-MS/MS采取多反应离子监测模式测定,基质匹配校准曲线外标法定量。18种有机磷农药残留在2.5~120.0μg/kg范围内线性良好,相关系数(R2)大于0.99;检出限为0.4~1.5μg/kg,定量限为0.8~2.5μg/kg。在3个加标水平(2.5,8.0,60.0μg/kg)下平均回收率为70.5%~118.9%,相对标准偏差为1.0%~9.8%。     

动物源性食品中吡喹酮残留量的LC-MS/MS测定

应用固相萃取液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)技术建立了动物源性食品中吡喹酮药物残留的检测方法。用乙酸乙酯提取样品中的吡喹酮残留,提取液经碱性氧化铝小柱净化,LC-MS/MS测定,在10~40μg/kg范围内添加回收率为91%~111%,定量下限(LOQ)为10μg/kg。本文还讨论了吡喹酮残留物的提取条件、流动相对吡喹酮ESI离子化的影响,并借助准MS/MS/MS技术探讨了吡喹酮主要质谱碎片的产生机理。     

脂质去除分散固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定动物源性食品中5种α_2-受体激动剂

采用增强型脂质去除吸附剂(Enhanced Matrix Removal-lipid, EMR-Lipid)对样品进行净化,结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测,建立快速测定动物源性食品中5种α_2-受体激动剂(安普乐定、溴莫尼定、替扎尼定、可乐定、赛拉嗪)的方法。对样品前处理方式、质谱及色谱条件进行了优化,样品经2.0%氨水溶液充分分散,5种α_2-受体激动剂经乙腈提取,所得提取液经萃取盐包(内含4.0 g无水硫酸镁、1.0 g氯化钠)盐析除水后取乙腈相,采用EMR-Lipid专利脂质去除分散固相萃取净化,净化液再经除脂萃取剂(EMR-Lipid Bond Elut Polish, EMR-Polish)盐析反萃后氮吹浓缩,采用Eclipse Plus C_(18)柱(50 mm×2.1 mm, 1.8μm)进行分离,以体积分数为0.10%甲酸水溶液和甲醇作为流动相进行梯度洗脱。采用电喷雾电离源、正离子模式下以多反应监测(MRM)进行定性和定量分析。结果表明,5种α_2-受体激动剂在0.20～20μg/L范围内线性关系良好(r~20.999),方法检出限为0.20～0.70μg/kg,方法定量限为0.60～2.0μg/kg。在2.0、4.0和20μg/kg共3个添加水平下的加标回收率为76.1%～103%,相对标准偏差(RSD)为1.3%～12%(n=6)。基质效应研究表明,5种α_2-受体激动剂均为弱基质效应。该方法简便高效,且准确性好、灵敏度高,适用于动物源性食品中5种α_2-受体激动剂残留测定。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中8类38种兽药残留

建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)同时测定水产品中喹诺酮类、大环内酯类、磺胺类、磺胺增效剂、林可胺类、硝基咪唑类、喹啉类和多肽类8类共38种限用兽药残留的检测方法。试样用1%乙酸乙腈溶液提取,经冷冻离心分离和正己烷净化后,HPLC-MS/MS进行测定,基质曲线外标法定量。在电喷雾正离子模式下,以多反应监测(MRM)方式采集数据进行定性与定量分析。38种兽药在水产品中的基质溶液标准曲线线性系数(r)均大于0.99;在4个不同浓度加标水平下,平均回收率为43%～123%;日内相对标准偏差(RSD)为1.0%～26.4%,日间RSD为1.6%～28.9%;定量下限(LOQ,S/N≥10)为5～20μg/kg。方法简单、快速、可靠,可用于水产品中兽药多残留的快速筛查。     

基于气-液微萃取结合气相色谱-质谱法快速检测植物源性食品中28种农药残留

利用气-液微萃取(Gas-Liquid Microextraction, GLME)技术,结合气相色谱-质谱法建立快速检测植物源性食品中农药残留的分析方法。准确称取3 g匀浆样品,加入3 mL二氯甲烷∶乙酸乙酯(1∶1,V/V)超声提取15 min,取上清液100μL,通过GLME技术进行萃取净化,结合内标法,联用气相色谱-质谱法(Gas Chromatography-Mass Spectrometry, GC-MS),建立植物源性食品中农药残留的快速检测。28种残留农药在0.001～1.0 mg/kg范围内线性关系良好,相关系数为0.9991～0.9999,仪器定量限为0.0010～0.0370 mg/kg,样品平均加标回收率为65.6%～114.1%,相对标准偏差范围为3.2%～19.9%。该方法简便、快速、准确度高、重现性好,能够有效净化色素、脂类等干扰物质,适用于复杂基质的植物源性食品中农药残留检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定动物源食品中30种兽药残留

建立了超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定动物源食品中包括19种喹诺酮和11种青霉素在内的30种兽药残留的方法。样品用三氯乙酸乙腈溶液提取,提取液经饱和NaCl溶液和C_(18)分散固相萃取净化后浓缩,正己烷脱脂后测定,以0.2%甲酸水-乙腈作为流动相进行梯度洗脱,在Agilent Eclipseplus C_(18)RRHD(1.8μm,2.1x100 mm)色谱柱上分离,柱温35℃,流速0.3 m L/min,进样量10μL,在电喷雾正离子模式下以动态多反应监测(Dynamic MRM)采集数据,外标法定量。结果表明,30种兽药在相应浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.999,不同阴性样品基质中(猪肉、鸡蛋、猪肝)在3个浓度水平加标试验回收率在71.3%~96.5%之间,RSD为2.1%~9.2%,方法检测限(LOD,S/N≥3)为0.5~2.0μg/kg,定量限为2.0~5.0μg/kg。经方法学验证,方法适用于动物源食品中30种兽药残留的快速筛查和定量测定。     

同位素稀释结合固相萃取快速测定动物组织中β2-兴奋剂

本文采用同位素稀释结合固相萃取技术,测定动物组织中特布他林、克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺4种β2-兴奋剂。动物组织加同位素内标D3-沙丁胺醇和D9-克伦特罗,经甲醇提取后,正己烷脱脂,过SLS离子交换固相萃取柱净化,用BSTFA 1%(φ)TMCS衍生,采用GC/MS进行测定,内标法定量。实验表明,动物组织中添加2.0~10.0μg/kg浓度水平的β2-兴奋剂,方法回收率在72.5%~97.9%,相对标准偏差1.0%~11.4%,线性范围为12.5~500μg/L,样品中特布他林、克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺最低检出限分别为0.5μg/kg、1.0μg/kg、0.5μg/kg和1.0μg/kg。     

快速基质分散净化-超快速液相色谱-串联质谱法同时测定玉米中22种三嗪类除草剂残留

建立了玉米中扑灭津、莠去津、敌草净、特丁通等22种三嗪类除草剂多残留的分析方法。样品以乙腈为提取剂,经高速匀浆方法提取并浓缩后,以增强型脂质去除净化剂(EMR-Lipid)净化,除去了样品中的脂质,有效地降低了样品中的复杂基质所带来的背景干扰,净化液再经增强型脂质去除萃取剂(EMR-Polish)盐析萃取,以 Kinetex XB-C18柱为分离柱,用乙腈和0.1%甲酸溶液进行梯度洗脱,电喷雾正离子(ESI+)多反应模式监测,超快度液相色谱-串联质谱(UFLC-MS/ MS)测定,基质匹配标准曲线法定量。加标水平为5,10和20μg/ kg 时,22种农药的回收率为72%~105%,相对标准偏差小于15%。22种农药的检出限为0.16~1.8μg/ kg,在1.0~50μg/ L 范围内线性关系良好(r>0.993)。本方法具有快速、准确、灵敏度高等优点,能够准确测定玉米中22种三嗪类除草剂的残留量。     

QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱法测定动物源食品中阿奇霉素残留

建立了QuEChERS前处理,液相色谱-串联质谱测定动物源食品中阿奇霉素残留的快速分析方法。样品以乙腈提取,N-丙基乙二胺(PSA)净化,采用Zorbax Eclipse Plus C18柱(3.0 mm×100 mm,1.8μm)分离,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱。阿奇霉素采用电喷雾正离子源(ESI+)、多重反应监测(MRM)模式检测,以保留时间和特征离子对(母离子和2个碎片离子)信息比较进行定性分析和定量分析。阿奇霉素在1.0~50.0 ng/m L范围内线性相关系数均大于0.995;在6种基质(鸡肉、牛肉、猪肉、猪肝、鲤鱼、牛奶)中方法的检出限(S/N=3)均为0.3μg/kg,定量限(S/N=10)均为1.0μg/kg;3个加标水平(1,2,10μg/kg)下,回收率为81.4%~103.8%,相对标准偏差为3.6%~8.9%。     

增强化学发光酶免疫法对猪肉中盐酸克伦特罗的检测

建立了猪肉中克伦特罗(CLB)的直接竞争化学发光酶免疫检测(dc-CLEIA)方法。通过优化离子强度、pH值确立了化学发光酶免疫法的标准曲线,优化后dc-CLEIA的检出限可达0.02μg/L。猪肉中的盐酸克伦特罗用高氯酸提取、SPE净化后绘制基质曲线,基质曲线与标准曲线吻合,说明基质影响基本消除。测定0.10、1.0、5.0μg/kg 3个水平的添加回收率,平均回收率为83%~98%,批内与批间的相对标准偏差均小于15%。进一步研究了dc-CLEIA与HPLC两种方法测定猪肉样品的相关性,结果显示两者测定结果相关性良好,r=0.964 7,说明所建立的直接化学发光酶免疫方法可用于实际样品的检测,结果准确可靠。     

液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱快速筛查和确证畜禽肉及水产品中160种兽药残留

应用液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱(LC-Q-Orbitrap/MS)建立了畜禽肉及水产品中磺胺类、喹诺酮类、四环素类等14类160种兽药残留快速筛查方法。均浆后的样品(猪、鸡、鱼)中加入80%(V/V)乙腈-水溶液(含0.2%(V/V)甲酸)振荡提取,Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化,在全扫描/数据依赖二级质谱扫描(Full MS/dd-MS2)模式下采集,基质匹配外标法定量。结果表明,160种兽药在0.25～100μg/L范围内线性关系良好,线性相关系数(R²)≥0.99,方法筛查限(SDL)和定量限(LOQ)均为0.5～20μg/kg。除敌敌畏、卡巴氧和二嗪磷回收率低于60%外,其余兽药在猪肉、鸡肉和鱼肉中1倍、 2倍和10倍定量限3个加标水平下的总体回收率为65.0%～119.6%,相对标准偏差(RSD)为0.73%～20%。方法应用于75批市售畜禽肉及水产品检测,共筛查出6类8种兽药。本方法可同时筛查畜禽肉及水产品中多种兽药残留。