全自动在线固相萃取-二维高效液相色谱与质谱联用测定辣椒油中苏丹红

建立了全自动在线固相萃取-二维高效液相色谱与质谱联用快速测定辣椒油中的苏丹红Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ的方法。样品经乙腈和二氯甲烷萃取后,在一维色谱柱(Acclaim PAⅡ,150 mm×3.0 mm×3μm)上分离出苏丹红,通过阀的分段切换,依次富集在SPE柱(Acclaim 120 C18,10 mm×4.6 mm×5μm)上,在线完成净化和萃取富集;再通过阀切换将它们转移至二维色谱流路,在Acclaim 120 C18色谱柱(100 mm×2.1 mm×2.2μm)上分离检测。一维色谱以水-乙腈-甲醇/四氢呋喃(1∶1,V/V)为流动相,进样体积20μL,0.6 mL/min流速梯度洗脱和紫外-可见检测器(λ=254 nm)监测分离状况;二维色谱以水-乙腈-甲酸/乙腈(1∶1000,V/V)为流动相,0.3 mL/min流速梯度洗脱,采用单四极质谱仪,选择离子方式检测。整个分析流程27 min即可完成。4种苏丹红的保留时间的相对标准偏差均小于0.1%,色谱峰面积的相对标准偏差均小于2%(n=7);在0.6～60μg/L范围内峰面积与进样质量浓度的线性相关系数均大于0.9958;加标回收率为50%～97%;方法检出限均小于0.2μg/L(S/N=3)。测定结果令人满意。     

在线固相萃取法结合电雾式检测器测定黄芪及其复方中黄芪甲苷的含量

采用在线固相萃取高效液相色谱法,结合电雾式检测器,建立了快速测定黄芪及其复方中黄芪甲苷的方法。采用Acclaim Polar AdvantageⅡC18(50 mm×4.6 mm,3μm)为在线净化柱,以双三元液相色谱的右泵作为上样净化泵,甲醇-水为流动相,梯度洗脱,进行富集和净化;采用Acclaim C18(150 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,以双三元液相色谱的左泵作为分析泵,乙腈-水作为流动相,等度洗脱,流速为1.0 mL/min,采用中心切割的方式将目标物从在线净化柱转移至分析柱中。电雾式检测器( CAD)的雾化器温度为30℃;氮气压力为241.3 kPa。黄芪甲苷在药材及复方基质中获得较好分离,黄芪甲苷在4.0~80 mg/L范围内,相关系数r=0.9998,平均回收率为97.6％。实验表明,本方法快速、简便,专属性、重现性较好,测定结果可靠,可应用于黄芪及其复方中黄芪甲苷含量的检测。     

二维液相色谱法在线富集测定银杏叶提取物中银杏酸含量

通过2台高压恒流泵、1台紫外检测器、1个手动进样阀、1个高压切换阀和2根色谱柱组建了二维液相色谱系统,建立了在线富集测定银杏叶提取物(EGB)及其制剂中微量银杏酸的方法。第一维色谱柱为富集柱,采用ZORBAX Eclipse Plus-C18(2.1 mm×12.5 mm,5μm),流动相为甲醇-水-三氟乙酸混合液(体积比80∶20∶0.01),流速为0.25 m L/min,可实现300μL样品的富集,有效降低了基体干扰。第二维色谱柱为分析柱,采用ZORBAX Eclipse Plus-C18(2.1 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水-三氟乙酸混合液(体积比90∶10∶0.01),流速为0.25 m L/min,可有效分离银杏酸。使用紫外检测器在310 nm处检测,可实现对银杏酸的准确定量。研究了试样的溶剂对富集效果的影响,当试样溶剂与第一维流动相一致时可获得较好的富集效果。该方法对试样中5种银杏酸在0.200~100.0 mg/kg范围内具有良好的线性关系,相关系数均大于0.998,检出限达0.02~0.06 mg/kg。对实际样品测定结果的相对标准偏差均不大于5.0%,在5、10 mg/kg加标水平下,加标回收率为94.0%~101.3%。     

高效液相色谱法测定食品中的姜黄素

食品中的姜黄素经甲醇提取、净化后,以液相色谱-紫外检测器外标法定量检测.色谱条件:反相C<,18>色谱柱(250 mm x4.6 mm,5μm),以乙腈-0.05%乙酸氨水溶液为流动相等度洗脱,流速为1.0 mL/min.姜黄素质量浓度在0.5-50.0μg/mL范围内与峰面积呈线性关系,回归方程y=7440x-295...     

HPLC法测定注射用双黄连(冻干)中5-羟甲基糠醛含量

建立了HPLC测定注射用双黄连(冻干)中5-羟甲基糠醛的含量,采用Agilent TC-C_18色谱柱(250×4.6 mm,5μm),以甲醇―水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长284 nm,柱温35℃。结果表明,5-羟甲基糠醛能得到很好的分离,线性关系良好,平均回收率在97.06%~103.41%之间。该方法准确、简便、重现性好,可以实现注射用双黄连(冻干)多成分质量控制。     

反相高效液相色谱法同时测定丁酸氯维地平中10种相关杂质

建立反相高效液相色谱辅-光电二极管阵列检测器(RP-HPLC)法同时测定丁酸氯维地平原料药中的10种杂质。色谱柱为Symmetry C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.05 mol/L Na H2PO4溶液(pH 2.5)-乙腈/甲醇(3∶2,V/V),梯度洗脱,柱温35℃,流速为1.5 m L/min,检测波长220 nm。丁酸氯维地平及其10个已知杂质能够达到良好的分离,且各组分在各自测定浓度范围内与峰面积的线性关系良好(r≥0.9970);丁酸氯维地平及杂质1~10的检出限(S/N=3)在0.15~0.90 mg/L之间。本方法快速、简便、有效,可用于丁酸氯维地平原料药的质量控制管理。     

高效液相色谱法测定磷酸三甲苯酯中游离甲酚的含量

采用高效液相色谱法测定磷酸三甲苯酯中游离甲酚的含量.利用高效液相色谱外标法对试样进行分离、检测,获得最佳色谱条件.结果表明,最佳色谱条件:C18色谱柱(250 mm×4.6 mm×5μm),流动相为甲醇∶水(体积比为8∶2),流速1.0 mL/min,紫外检测器,检测波长280 nm,柱温35℃,等度洗脱,进样量10μL.方法的加标回收率为95.9%~98.9%,相对标准偏差为1.02%~2.55%,具有操作简便、快捷、准确度高的特点.     

高效液相色谱法测定双氯芬酸钠凝胶的有关物质

建立了双氯芬酸钠凝胶中有关物质的高效液相色谱分离分析方法。采用梯度洗脱的方法对双氯芬酸钠凝胶的有关物质进行分离,流动相A为pH 2.0三氟乙酸溶液-甲醇(80:20),流动相B为乙腈-甲醇(80:20)。采用Waters XBridge色谱柱(5μm,150mm×4.6mm)进行分离,流速为1.0mL/min,进样体积为5μL,二极管阵列检测器,检测波长为254nm,柱温为30℃。在上述色谱条件下,双氯芬酸钠凝胶及特定杂质均在1.0～40.0mg/L质量浓度范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.99;方法对特定杂质的回收率为97%～104%,相对标准偏差(RSD)不大于3.8%。该法简便、快速、准确、选择性好、灵敏度高,可用于含醇类辅料的双氯芬酸钠凝胶中有关物质的检测。     

在线二维柱切换-超高效液相色谱法同时测定明目地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚的含量

建立了二维柱切换-超高效液相色谱法同时测定明目地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚含量的方法.一维色谱柱为Thermo Accucore XL C18(250mm×2.1 mm,4μm),二维色谱柱为DIONEX Acclaimphenyl-1(150mm ×4.6mm,3μm),一维分析流动相为乙腈-水,梯度洗脱,二维分析流动相为乙腈-水,等度洗脱,14.5 min进行阀切换;检测波长:0～14.5 min为240 nm,14.5～ 30 min为275 nm,流速:0.5 mL/min,柱温:30℃.30 min即可完成明目地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚的含量测定,并有效地将莫诺苷同分异构体分离.莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚的线性范围分别为7.6 ～ 377 mg/L,9.2～ 459 mg/L,8.4～419 mg,/L和8.2 ～ 409 mg/L,相关系数为0.9999,加样回收率为98.3％～ 100.2％.本方法快捷高效,可对控制明目地黄丸质量提供参考.     

知母药材高效液相指纹图谱研究

用高效液相色谱法建立了知母药材的指纹图谱分析方法。采用ZorbaxEclipseXDB C18色谱柱(5μm,4.6×250mm,Agilent),流动相为乙腈和25mmol/LKH2PO4缓冲液,梯度洗脱;流速:1.0mL/min;柱温为25℃;检测波长257nm。确定了8批不同产地知母药材甲醇提取部分6个共有峰,各产地药材指纹图谱与对照指纹图谱相似度良好(>0.9),可以用来作定性研究。方法准确可靠,为提高知母药材质量控制标准提供参考。     

高效液相色谱法测定固体废物中2,4-二硝基氯苯和对硝基氯苯的含量

利用高效液相色谱测定固体废物中2,4-二硝基氯苯和对硝基氯苯的含量。色谱条件为:色谱柱,InertSustain C18反相色谱柱25 cm×4.6 mm(5μm);流动相,采用水和乙腈梯度洗脱;柱温,40℃;流速,1.0 mL/min;进样体积,10μL;二极管阵列检测器波长,250 nm、273 nm。2,4-二硝基氯苯和对硝基氯苯的回收率分别为92.0%～108.4%、88.8%～102.1%,相对标准偏差RSD分别为0.76%(n=6)和1.36%(n=6),检出限均为0.002 mg/kg。该方法快速、简便、准确、稳定、灵敏度高,适合用于固体废物中2,4-二硝基氯苯与对硝基氯苯的含量测定。     

高效液相色谱法同时测定化妆品中多种美白祛斑剂

建立了化妆品中8种美白祛斑剂高效液相色谱分析方法。采用Zorbax Eclipse XDB C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm)为固定相,0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(pH 6.95)和甲醇溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,二极管阵列检测器,检测波长为270 nm,外标法定量。结果显示:8种美白祛斑剂线性关系良好,线性范围分别为:曲酸3.0~60 mg/L,维生素C磷酸酯镁、烟酰胺、苯酚为5.0~100 mg/L,熊果苷、氢醌、树莓苷、甘草酸二钾为10.0~200 mg/L。相对标准偏差(n=6)为0.22%~2.6%,平均回收率为95%~105%。     

高效液相色谱法测定培美曲塞二钠原料药中有关物质

建立了高效液相色谱法测定培美曲塞二钠原料药有关物质的方法。采用Zorbax SB-C8(4.6 mm i.d.×150 mm,3.5μm)色谱柱,以0.025 mol/L乙酸钠溶液(用冰乙酸调p H至5.5)为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速为1.0 m L/min;柱温35℃;检测波长250 nm;进样体积20μL。在该条件下主成分与有关物质的分离度良好,在测定的范围内具有良好的线性关系(相关系数r0.999)、精密度和稳定性。方法能够对培美曲塞二钠原料药的主要杂质进行有效的分离和检测,可用于该产品的质量控制。     

高效液相色谱法测定化妆品中苯并芘残留

建立了化妆品中苯并芘的高效液相色谱测定方法。该方法经石油醚提取,以C18(5um,4.6mm×250mm i.d)反相色谱柱分离,流动相为甲醇+水(87∶13),流速1.0mL/min,激发波长360 nm,发射波长410 nm,柱温30℃,进样量50μL。方法的最低定量限5.0μg/kg,加标回收率92.1%~103.2%,相对标准偏差为3.5%。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中的头孢替安浓度

为评价盐酸头孢替安酯片在健康人体内的药代动力学特征,应用蛋白沉淀-液相色谱-串联质谱技术建立了灵敏度高、特异性强、快速的健康受试者血浆中头孢替安的分析方法。选用 Waters Symmtry C18色谱柱(50 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇和1 mmol/ L 乙酸铵水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL/ min。在多反应监测模式(MRM)下,采用电喷雾离子化源,正离子扫描模式下进行定量分析。标准曲线在5.0~5000 ng/ mL 范围内线性关系良好(r>0.99),定量下限为5.0 ng/ mL,方法学验证部分结果均符合生物样本定量测定的要求。本方法快速、灵敏、重现性好,并成功应用于健康受试者盐酸头孢替安酯片药动学研究,同时也为同类药物在人体生物基质中的定量检测提供参考。     

高效液相色谱-柱后衍生法测定东盟水果中氨基甲酸酯类农药残留

建立了高效液相色谱-柱后衍生法测定东盟水果中氨基甲酸酯类农药残留。样品用乙腈提取,提取液经浓缩、氨基固相萃取小柱净化,甲醇-二氯甲烷(5∶95,V/V)洗脱。采用Agilent Eclipse XDB-C8柱(250×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速1.0mL/min,柱温35.0℃。用荧光检测器对涕灭威亚砜、涕灭威砜、灭多威、三羟基克百威、涕灭威、克百威和甲萘威进行测定,外标法定量。结果表明,氨基甲酸酯类农药在0.05~5.00mg/L质量浓度范围内线性良好,相关系数在0.9991~0.9994之间,回收率为80.6%~107.7%,变异系数在0.5%~8.8%之间,方法的检出限为0.001~0.003mg/kg。     

HPLC法快速筛查抗风湿类中成药或保健食品中21种非法添加化学成分

基于亚3μm核壳填料色谱柱技术建立了高效液相色谱法快速筛查21种抗风湿类化合物。供试品以1%乙酸-甲醇为提取溶剂,经ACCHROM C18100A(4.6 mm×100 mm,2.8μm)分离,以磷酸水溶液(pH3.0)-甲醇-乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为230 nm,流速1.0 m L/min,柱温35℃。该方法在20 min内可分离21种成分,各化合物的线性范围为5~100μg/m L(萘普生为1.5~30μg/m L),回收率为91.0%~109.1%。萘普生的检出限(S/N=3)为0.8 mg/kg,其余化合物的检出限为2.0 mg/kg。按上述方法对抽检样品进行检测,发现18批阳性样品,并采用液相色谱-质谱联用法进一步确证。该方法快速、准确,适用于抗风湿类中成药或保健食品中非法添加化学成分的快速筛查,具有广阔的应用前景。     

HPLC法同时测定油橄榄叶中的5种多酚类化合物含量

建立了HPLC法同时测定油橄榄叶抗糖尿病有效部位中的5种多酚类化合物含量。优选的色谱条件为:色谱柱:Sinochrom ODS-BP柱(250×4.6 mm,5μm);DAD检测器;检测波长:230 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL;流动相:水(A)+甲醇(B),梯度洗脱:0~5 min,30%B;5~20 min,30%B~52%B;20~25 min,52%B~50%B。在优选的色谱条件下,5种多酚类化合物能够得到较好的分离。日内RSD为1.4%~2.6%,日间RSD为0.8%~2.8%,回收率为97.1%~113.2%。方法可用于测定油橄榄叶及其抗糖尿病有效部位中的5种多酚类化合物的含量。     

OPA-FMOC在线柱前衍生化HPLC法测定甘露聚糖肽中氨基酸组成及含量

建立了OPA-FMOC在线柱前衍生化高效液相色谱法测定甘露聚糖肽中氨基酸组成及含量的方法,采用色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为40 mmol/L Na_2HPO_4缓冲溶液(pH 7.8);流动相B为甲醇:乙腈:水(45∶45∶10,V/V/V);梯度洗脱;流速:1.5 m L/min;柱温:40℃;检测波长:338,262 nm。20种氨基酸在53 min内得到较好地分离,各氨基酸在5~500μg/m L范围内线性关系良好,相关系数在0.9941~0.9999之间;平均加标回收率在85.6%~102.6%之间;检出限在0.56~8.33 ng(进样量1μL)范围内。甘露聚糖肽样品中含有16种氨基酸,氨基酸总量平均为3.56%(n=3)。     

糖类食品和肉制品中胭脂虫红色素的高效液相色谱法测定

研究了食品中胭脂虫红色素的高效液相色谱测定方法.含胭脂虫红色素的样品用液-液萃取后通过高效液相色谱进行分析,并通过比较测定的光谱与胭脂虫红的紫外-可见谱图库来进一步确证.采用Welch Materials XB-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)柱,流动相为0.02 mol/L乙酸铵溶液(A)和甲醇(B),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为280 nm,外标法测定胭脂虫红的含量.结果表明,胭脂虫红在1.0 ～50.0 mg/L范围内线性关系良好,回收率为88% ～99%,检出限为0.041 mg/L,色谱峰分离效果好,具有良好的稳定性和重复性.