一种测定MDR肿瘤细胞内外阿霉素浓度的方法

研究提出K562／A细胞内外阿霉素浓度的反相高效液相色谱-荧光测定法．细胞内阿霉素浓度测定采用Lichrospher C18色谱柱，甲醇-0．01％醋酸(50：50，V／V)流动相,流速1．0mL／min，柱温35℃；细胞外阿霉素浓度测定采用Lichrospher C18色谱柱，甲醇-0．01％醋酸(55：45，V/V)流动相，流速0．8mL／min，柱温35℃．荧光检测器波长λex=495nm，λem=560nm，均以盐酸柔红霉素为内标．研究结果表明，该方法简单、准确、线性范围宽、检测限低，精确度和回收率良好，可用于多药耐药肿瘤细胞内外阿霉素浓度的动态变化规律研究．     

反相离子对色谱-蒸发光闪射法测定α-复方酮酸片中的5种有效成分

建立了反相离子对色谱结合蒸发光散射检测器同时测定α-复方酮酸片中消旋羟蛋氨酸钙(HMACa),酮缬氨酸钙(KVCa),消旋酮异亮氨酸钙(KILCa),酮亮氨酸钙(KLCa)和酮苯丙氨酸钙(KPACa)含量的方法。液相色谱条件:以乙腈-20 mmol/L乙酸铵缓冲溶液(含30 mmol/L正戊胺,pH 7.0)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.6 mL/min,柱温为35℃。蒸发光散射检测器(ELSD)漂移管温度为50℃,载气流速为1.0 mL/min。方法的线性范围为20~150 mg/L,5种物质的相关系数(r)均大于0.999,检出限分别为7.05,16.66,8.00,8.00和14.28 mg/L,样品加标回收率在87.5%~109.8%之间,相对标准偏差(RSD)均小于3.2%(n=5)。方法适用于α-复方酮酸片中5种有效成分的同时测定。     

顶空-气相色谱-质谱法测定皂、粉、液类洗涤用品中的二噁烷

提出了测定皂、粉、液类洗涤用品中二噁烷含量的顶空-气相色谱-质谱法。以5mL水为顶空溶剂,将样品在80℃顶空平衡50min后,经HP-5MS色谱柱分离,质谱检测器检测,外标法定量。3种基质中二噁烷的线性范围为0.1~50.0mg·kg-1,测定下限均在0.2mg·kg-1以下。以空白样品为基体进行加标回收实验,测得平均回收率在85.2%~97.8%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在2.6%~6.1%之间。     

填充柱气相色谱法快速测定发酵废水提取物中丙/乙酸含量

建立了一种快速测定发酵废水及其提取物中丙/乙酸含量的气相色谱方法.采用GC9790气相色谱仪,不锈钢填充柱,FID检测器,外标法定量,色谱条件为:载气(氮气) 55 mL/min,氢气30 mL/min,空气300 mL/min,柱箱温度140 ℃,汽化室温度170 ℃,检测器温度200 ℃,进样量1 μL.丙酸保留时间4.86 min,标准曲线ρ=6.487×10-6A-8.718×10-2,线性相关系数r=0.9990,精密度RSD=2.5%,回收率92.7%～107.2%,检测限4.4×10-3 g/L.乙酸保留时间3.49 min,标准曲线ρ=1.118×10-5A+4.042×10-2,线性相关系数r=0.9997,RSD=2.1%,回收率95.3%～106.3%,检出限7.6×10-3 g/L.此方法为从发酵废水中提取丙/乙酸和发酵控制研究提供了检测手段.     

同位素稀释-顶空气相色谱-质谱联用法测定化妆品中的二噁烷残留量

建立了化妆品中二噁烷的同位素稀释-顶空气相色谱-质谱联用测定方法。称取2 g化妆品样品于顶空样品瓶中,加入1 g氯化钠及20 mg/L氘代二噁烷内标溶液1 mL,再加入9 mL水。密封后摇匀,置于顶空进样器中,在70℃平衡40 min。气液平衡后的上部气体经HP-5 MS石英毛细管气相色谱柱(30 m×0.25 mm×0.25μm)分离后,采用选择离子扫描模式进行质谱定性及定量分析。二噁烷的方法定量限为2.5 mg/kg;在2.5~50 mg/kg的3个添加水平范围内的平均回收率为90.5%~104.0%,相对标准偏差为1.26%~3.98%。本方法准确、简便、快速,能够满足化妆品样品中二噁烷残留量的检测要求。     

高效液相色谱法测定固体废物中2,4-二硝基氯苯和对硝基氯苯的含量

利用高效液相色谱测定固体废物中2,4-二硝基氯苯和对硝基氯苯的含量。色谱条件为:色谱柱,InertSustain C18反相色谱柱25 cm×4.6 mm(5μm);流动相,采用水和乙腈梯度洗脱;柱温,40℃;流速,1.0 mL/min;进样体积,10μL;二极管阵列检测器波长,250 nm、273 nm。2,4-二硝基氯苯和对硝基氯苯的回收率分别为92.0%～108.4%、88.8%～102.1%,相对标准偏差RSD分别为0.76%(n=6)和1.36%(n=6),检出限均为0.002 mg/kg。该方法快速、简便、准确、稳定、灵敏度高,适合用于固体废物中2,4-二硝基氯苯与对硝基氯苯的含量测定。     

1,2-萘醌-4-磺酸钠体系分光光度法测定磺胺甲噁唑

采用1,2-萘醌-4-磺酸钠体系分光光度法测定磺胺甲噁唑(SMZ)。磺胺甲噁唑与1,2-萘醌-4-磺酸钠在pH=10.0的缓冲溶液中发生亲核取代反应生成橙红色的产物,组成比为1:1,最大吸收波长λ=476 nm;表观摩尔吸光系数ε=6.44×103L/(mol.cm);SMZ浓度在0.2~60 mg/L范围内呈良好的线性关系;线性回归方程为A=0.02452 0.02301C(mg/L),线性相关系数r=0.9991;检出限为0.08 mg/L;RSD为0.25%(20 mg/L,n=11);平均回收率为98.7%以上。优化了对磺胺甲噁唑的测定条件。初步探讨了反应机理,应用拟定的方法测定磺胺甲噁唑的含量,与药典法相比,结果满意。     

荧光试剂柱前衍生高效液相色谱-荧光检测生物检材中的氟乙酸钠

建立了以4-溴甲基-7-甲氧基香豆素(BrMMC)为柱前荧光衍生试剂,反相高效液相色谱荧光检测(HPLC-FLD)生物检材中氟乙酸钠的分析方法。采用Hewlett Packard RP-18色谱柱,以甲醇-水(60/40,V/V)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温26℃,荧光检测:eλx=319 nm,eλm=390 nm,进样量2μL。结果表明:该法在氟乙酸钠含量为0.1~20μg/mL范围内与其峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数为0.9996,检出限(S/N=3)为5×10-10mol/mL,相对标准偏差(RSD)小于4%。本法用于中毒死亡者的血液样品及其它检材的测定,效果良好。     

气相色谱-电子捕获检测法测定食品包装材料中2,4-二氨基甲苯

建立了食品包装复合材料中2,4-二氨基甲苯的气相色谱-电子捕获检测(GCECD)方法。分析条件为:HP-5毛细管气相色谱柱(30m×0.32mm×0.25μm);载气流速0.8mL/min;进样口温度为260℃,分流比为5∶1;ECD检测器温度:300℃;柱温:170℃;进样量:1μL。2,4-二氨基甲苯浓度在0.02~1mg/L范围内与色谱峰面积线性良好,相关系数为0.9991,方法检出限(S/N=3)为0.001mg/L。     

高效液相色谱法同时测定防晒类化妆品中二苯酮-2等3种防晒剂组分的含量

建立一种高效液相色谱法同时测定防晒类化妆品中3种防晒剂组分(二苯酮-2、二乙氨羟苯甲酰基苯甲酸己酯和二乙基己基丁酰胺基三嗪酮)的含量。色谱柱为Inertsil C_(18)(4.6×250 mm,5μm),流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长二苯酮-2为335 nm、二乙氨羟苯甲酰基苯甲酸己酯为356 nm、二乙基己基丁酰胺基三嗪酮为307 nm。3种新型防晒剂组分在40 min内完全分离,线性范围0.96~66.5 mg/L(r=0.999 8~0.999 9),检测限为0.01~0.04 mg/L,定量限为0.03~0.11 mg/L,回收率为98%~107%。该方法简便、快速、准确、可靠,适合防晒类化妆品中防晒剂组分的含量测定。     

高效液相色谱法测定染发剂中的22种染料成分

建立了染发剂中22种染料成分的高效液相色谱测定方法。使用Discovery RP-Amide C16柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.025 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.0,含0.1%的庚烷磺酸钠离子对试剂)为流动相,流速为1.0 mL/min;使用二极管阵列检测器(DAD),检测波长为260 nm和280 nm,柱温为25 ℃。该方法除了对低浓度的甲苯-2,5-二胺硫酸盐、2-甲基雷锁辛和N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺HCl外,对其他各组分的含量测定值的相对标准偏差(RSD)均小于10%,加标回收率为77.6%～122.8%。该方法简便、准确、快速,适于氧化型染发剂中染料成分的检测。     

离子排斥色谱法同时测定葡萄糖醛酸和内酯及葡萄糖醛酸稳定性

建立了同时检测葡萄糖醛酸和葡萄糖醛酸内酯的离子排斥色谱法。 采用Boston HC-B75 H+色谱柱进行分离,以5 mmol/L H2SO4水溶液为流动相,流速0.6 mL/min,柱温25 ℃,紫外检测波长220 nm;根据外标法定量,葡萄糖醛酸和内酯分别在10～1200 mg/L和5～600 mg/L范围内线性良好（r＞0.9999）;葡萄糖醛酸、葡萄糖醛酸内酯的最低检测限及定量限均分别为0.1和0.3 mg/L,精密度实验RSD分别为1.00%和0.35%,平均回收率分别为99.69%和98.21%。 该检测方法简便、快速、灵敏,可用于葡萄糖醛酸和葡萄糖醛酸内酯的同时测定。 温度、pH值和溶剂对葡萄糖醛酸稳定性有影响,可为葡萄糖醛酸的分析与制备研究提供参考依据。     

柱后衍生-高效液相色谱法测定玉米中伏马菌素B1和B2

建立了邻苯二甲醛(OPA)柱后衍生-高效液相色谱测定玉米中伏马菌素B1和B2(FB1和FB2)的方法。采用ZORBAX SB-C18色谱柱,以0.1 mol/L磷酸二氢钠溶液(pH 3.3)-甲醇为流动相,梯度洗脱。流动相流速为0.8 mL/min,柱温40 ℃;衍生剂的流速为0.4 mL/min,衍生温度为室温。实验对衍生剂缓冲液的pH、衍生剂的浓度和流速、激发和发射波长等重要条件进行了优化。结果表明,衍生剂的pH在10.5、OPA的质量浓度为2 g/L、流速为0.4 mL/min、激发波长335 nm、发射波长440 nm时测定效果良好,FB1、FB2在0.2～20 mg/L范围内线性关系良好,相关系数大于0.999; FB1和FB2的检出限均为0.02 mg/kg;在0.1～ 4.0 mg/kg范围内,3个添加水平的平均回收率为82.5%～89.8%。该方法精确、简单、快速,适合玉米中FB1和FB2的测定。     

RP-HPLC内标法测定土壤中甲磺隆和氯磺隆的残留量

采用反相高效液相色谱-内标法测定了土壤中甲磺隆和氯磺隆的含量．以苯甲醇为内标物,C18反相柱（250mm×4．6mm i．d．,5μm）为分析柱,甲醇／1％醋酸钠水溶液（Ф=50／50）为流动相,流速1．0mL/min;检测波长254nm,柱温30℃．在甲磺隆浓度3．92-39．2mg／L,氯磺隆浓度2．02～20．2mg／L范围内,各对照品与苯甲醇的色谱峰面积比呈良好的线性关系．该方法准确、快速、灵敏度高、重现性好．     

离子色谱法测定复方卡托普利片中卡托普利和氢氯噻嗪的含量

建立离子色谱法测定复方卡托普利片中卡托普利和氢氯噻嗪含量的方法。在色谱柱为IonPacSCS1(4mm×250mm),保护柱为IonPacSCG1(4mm×50mm),淋洗液为甲烷磺酸(4mmol/L)+乙腈(26%),流速1.0mL/min,柱温35℃,进样量7μL,紫外检测波长215nm的条件下,测定结果表明,卡托普利和氢氯噻嗪在0.5～25μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r分别为0.9997、0.9999,回收率分别为98.11%、94.24%。方法操作简单,灵敏度高、准确、重现性好,可用于复方卡托普利片的质量控制。     

高效液相色谱法测定柑橘汁中的柠檬苦素和柚皮苷

柑橘汁的苦味主要是由于柚皮苷和柠檬苦素的存在所致,其含量的测定可用于控制柑橘类果汁的质量。采用高效液相色谱法在KR100-5C18(4.6 mm i.d.×250 mm,5 μm)上,分别以乙腈-四氢呋喃-水(体积比为17.5∶17.5∶65)和甲醇-冰醋酸-水(体积比为40∶1∶59)为流动相（流速均为1 mL/min）,在207 nm和283 nm检测波长下分别测定了柠檬苦素和柚皮苷。实验结果表明,柠檬苦素在1.00～50.00 mg/L时线性关系良好(r=0.9992),检出限为0.07 μg,平均加标回收率为98.69%,相对标准偏差（RSD）为2.5%;柚皮苷在20.00～160.00 mg/L时线性关系良好(r=0.9988),检出限为0.14 μg,平均加标回收率为100.13%,RSD为1.5%。用该法检测柑橘汁样品中的柠檬苦素与柚皮苷,方法简便、快速、准确。     

HPLC法同时测定白花蛇舌草中对香豆酸和熊果酸的含量

建立高效液相色谱法同时测定白花蛇舌草药材中对香豆酸和熊果酸含量的方法。采用Eclipse SB–C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇–0.05%甲酸梯度洗脱,流量1 m L/min,对香豆酸和熊果酸的检测波长分别为310 nm和210 nm,柱温30℃。对香豆酸和熊果酸含量分别在0.001 79~0.028 64 mg/m L和0.021 3~0.340 8 mg/m L范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数r分别为0.999 8,0.999 6。对香豆酸和熊果酸的平均加标回收率分别为98.59%,98.23%,测定结果的相对标准偏差分别为0.81%,0.94%(n=6)。样品溶液在24 h内稳定。该方法适用于白花蛇舌草药材中对香豆酸和熊果酸的含量测定。     

pH/溶剂双梯度反相高效液相色谱法同时测定氨酚曲麻片中的5种有效成分

建立了一种pH/溶剂双梯度反相高效液相色谱(HPLC)同时测定氨酚曲麻片中对乙酰氨基酚、咖啡因、水杨酰胺、盐酸伪麻黄碱、盐酸曲普利啶5种有效成分的方法。通过对溶剂梯度和pH/溶剂双梯度体系的优化,得到分离5种成分的最佳色谱体系。采用Diamonsiol C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm),以甲醇、0.05 mol/L醋酸铵水溶液和0.08 mol/L醋酸水溶液组成三元流动相体系,pH/溶剂双梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;柱温为30 ℃。采用分段变波长检测: 0～6 min, 280 nm; 6～7 min, 257 nm; 7～14 min, 280 nm; 14 min, 233 nm。片剂中的5种成分在25.5 min内能达到基线分离,对乙酰氨基酚、盐酸伪麻黄碱、咖啡因、水杨酰胺、盐酸曲普利啶5种成分的线性范围分别为0.055～0.998 g/L、0.053～0.946 g/L、0.007～0.129 g/L、0.035～0.622 g/L和0.002～0.039 g/L,相关系数r均大于0.9990;检出限(以信噪比为3(S/N=3)计)分别为0.09、6、0.02、0.128和0.02 mg/L,回收率为97.9%～102.8%。该方法能在短时间内同时分离酸性、中性和碱性化合物,能提高被测物的柱效,减少半峰宽和拖尾,可应用于氨酚曲麻片中5种成分的含量分析。     

HPLC法分析复方异丙托溴铵溶液雾化气溶胶成分

建立HPLC法同时测定吸入用复方异丙托溴铵溶液雾化气溶胶中硫酸沙丁胺醇和异丙托溴铵两组分的含量。采用C₁₈(4.6mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为1.2 g/L的1-庚烷磺酸钠溶液(磷酸调节pH 3.2左右)(A)-乙腈(B),等度洗脱,流速为1.0 mL/min,进样量为50μL,分析时间15 min,柱温40℃,检测波长为210 nm。结果表明,硫酸沙丁胺醇和异丙托溴铵分别在0.1~2.0 mg/L和0.075~2.4 mg/L浓度范围线性良好(r值均大于0.999)。复方异丙托溴铵溶液雾化气溶胶中硫酸沙丁胺醇和异丙托溴铵加样回收率分别为97.8%和102.3%。雾化气溶胶中硫酸沙丁胺醇和异丙托溴铵提取方法的回收率分别为96.1%和97.1%。在吸入暴露装置中经雾化5 min和35 min后,气溶胶中硫酸沙丁胺醇含量分别为22.39和3.21 mg/m³,异丙托溴铵含量分别为22.34和3.23 mg/m³,回收率均不低于99.5%,RSD不大于1.9%,表明雾化5 min即达到稳定。本方法适用于吸入用复方异丙托溴铵溶液雾化气溶胶的药物含量测定,也可为吸入制剂雾化气溶胶供试品分析提供参考。     

高效液相色谱法同时测定诺诺感冒片中扑尔敏、扑热息痛、盐酸伪麻黄碱的含量

 采用反相高效液相色谱法 ,在C18柱上以V(甲醇 )∶V(水 ) =2 5∶75的溶液为流动相 (内含 0 .0 5mol/L磷酸二氢钠 ) ,检测波长为 2 0 5nm ,同时分离测定诺诺感冒片中扑尔敏、扑热息痛、盐酸伪麻黄碱的含量。扑尔敏、扑热息痛和盐酸伪麻黄碱的检出限分别为 1.16mg/L ,0 .15mg/L和 1.82mg/L ,其相应的回收率分别为 98.35 % (n =5 ,RSD =1.6 0 % ) ,10 1.16 % (n =5 ,RSD =1.5 0 % )和 98.5 0 % (n =5 ,RSD =1.5 9% )。方法简便、快速 ,重现性好 ,适用于诺诺感冒片的质量检验分析。