离子对反相高效液相色谱法同时测定尿液中复方α-酮酸片的5种有效成分

建立了同时测定尿液中复方α-酮酸片5种有效成分(消旋羟蛋氨酸钙(HMACa)、酮缬氨酸钙(KVCa)、消旋酮异亮氨酸钙(KILCa)、酮亮氨酸钙(KLCa)和酮苯丙氨酸钙(KPACa))的离子对反相高效液相色谱法。分别考察了离子对试剂浓度、缓冲盐浓度和流动相pH值等参数对分离情况的影响。最终采用Waters Symmetry C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈和含15 mmol/L四丁基氢氧化铵的20 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;柱温为35℃;检测波长为210 nm。在上述条件下,5种有效成分得到很好的分离,并且不受尿液中内源性基质的干扰,在20~200 mg/L范围内线性关系良好(r≥0.999 0);HMACa、KVCa、KILCa、KLCa和KPACa的检出限(S/N=3)分别为3.0、5.0、3.6、5.7和2.5 mg/L;定量限(S/N=10)分别为9.6、16.7、12.0、19.0和8.3 mg/L;日间、日内精密度均小于7%;平均回收率在86.79%~112.00%之间,RSD小于9%(n=5)。该方法准确,灵敏度高,重现性好,适用于尿液中这5种有效成分的检测。     

反相离子对色谱-蒸发光闪射法测定α-复方酮酸片中的5种有效成分

建立了反相离子对色谱结合蒸发光散射检测器同时测定α-复方酮酸片中消旋羟蛋氨酸钙(HMACa),酮缬氨酸钙(KVCa),消旋酮异亮氨酸钙(KILCa),酮亮氨酸钙(KLCa)和酮苯丙氨酸钙(KPACa)含量的方法。液相色谱条件:以乙腈-20 mmol/L乙酸铵缓冲溶液(含30 mmol/L正戊胺,pH 7.0)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.6 mL/min,柱温为35℃。蒸发光散射检测器(ELSD)漂移管温度为50℃,载气流速为1.0 mL/min。方法的线性范围为20~150 mg/L,5种物质的相关系数(r)均大于0.999,检出限分别为7.05,16.66,8.00,8.00和14.28 mg/L,样品加标回收率在87.5%~109.8%之间,相对标准偏差(RSD)均小于3.2%(n=5)。方法适用于α-复方酮酸片中5种有效成分的同时测定。