液相色谱法同时测定水产品中孔雀石绿和结晶紫残留

用液相色谱-可见法同时测定水产品中孔雀石绿(MG)、结晶紫(CV)及其代谢物隐色孔雀石绿(LMG)和隐色结晶紫(LCV)的残留量,并用液相色谱-串联质谱法进行确证和定量。样品用乙腈提取,二氯甲烷液液分配,MCX阳离子固相萃取小柱净化,浓缩定容。以乙酸铵缓冲溶液和乙腈为流动相,经C18柱分离后,PbO2柱后衍生;用二极管阵列检测器在618nm测定孔雀石绿和隐色孔雀石绿,在588nm测定结晶紫和隐色结晶紫;并用串联质谱在电喷雾-多反应监测离子的模式下,进行质谱确证和定量;外标法定量,内标亮绿和氘代隐色孔雀石绿校正回收率。液相色谱-可见法的检出限为MG0.22,LMG0.28,CV0.22,LCV0.25μg/kg;液相色谱-串联质谱法的检出限为MG0.014,LMG0.018,CV0.014,LCV0.0084μg/kg。在2~20μg/kg范围内,回收率为75%~95%。     

水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢产物残留量的检测

孔雀石绿（MG）和结晶紫（CV）具有高毒素、高残留和致癌、致畸、致突变等特点,当其进人生物体内,就会产生具有更强危害的隐性孔雀石绿（LMG）和隐性结晶紫（LCV）。鉴于孔雀石绿和结晶紫的危害性,包括我国在内的许多国家都将它们列为水产养殖中的禁用药物。     

QuEChERS/UPLC-MS/MS法测定水产品中孔雀石绿和结晶紫及其代谢物

建立了水产品中孔雀石绿(MG)和结晶紫(CV)及其代谢物隐色孔雀石绿(LMG)和隐色结晶紫(LCV)残留的QuEChERS/UPLC-MS/MS分析方法。样品采用乙腈提取,改进的QuEChERS(EMR-Lipid)分散固相萃取净化,经Agilent Eclipse Plus C_(18)(1.8μm,3.0 mm×100 mm)色谱柱分离,电喷雾串联四极杆质谱多反应监测正离子方式测定。4种分析物在0.2~10.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.997。鱼肉中4种分析物在0.5,1.0,5.0μg/kg加标浓度水平下,回收率为77.1%~106.6%,相对标准偏差(RSD)为1.3%~4.3%。该方法简单、稳定、可靠,能有效去除样品中的蛋白质、脂肪等大分子杂质,可满足水产品中孔雀石绿、结晶紫以及隐色代谢物残留检测与确证的需要。     

高效液相色谱-串联质谱联用测定鳗鱼中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量

应用高效液相色谱与串联质谱联用技术测定了鳗鱼中孔雀石绿(MG)、结晶紫(CV)及其代谢物(LMG,LCV)的残留量.样品用乙腈提取后,经脱脂、浓缩及净化处理,所得残渣用流动相混合液溶解后,通过Acquity UPLCTM BEH C18色谱柱分离,流出液供串联质谱测定,用氘代孔雀石绿及氘代无色孔雀石绿作内标参比定量.结果表明:对MG、LMG、CV、LCV四种化合物在0.1～10.0 μg·L-1范围内均呈线性关系,在0.5 μg·kg-1及2 μg·kg-1的标准加入水平下进行了回收试验,所得回收率在86.5%～91.8%之间,方法的检出限为0.1 μg·L-1(对MG及LMG)和0.5 μg·L-1(对CV及LCV),测定结果的相对标准偏差(n=7)≤7%.     

超高效液相色谱串联质谱法测定水体与底泥中孔雀石绿及隐色孔雀石绿残留

建立了水体和底泥沉积物中孔雀石绿(MG)及其代谢物隐色孔雀石绿(LMG)的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。水样直接利用MCX固相萃取柱富集和净化,底泥采用乙腈和二氯甲烷混合提取液超声提取。采用BEH C18(1.7μm,50 mm×2.1 mm)色谱柱对待测物进行分离,以0.1%甲酸/乙腈-5 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,电喷雾-多反应正离子监测模式检测,内标法定量。方法的线性范围为0.2～100μg/L,r2≥0.995。空白水体在1.0、10.0、100 ng/L 3个加标水平下的平均回收率为77%～90%,相对标准偏差(RSD)为7.2%～11.4%,检出限(LOD)和定量下限(LOQ)分别为0.2ng/L和0.4 ng/L。空白底泥样品在0.20、2.00、20.0μg/kg 3个加标水平下,平均回收率为82%～91%,RSD为6.3%～11.6%,检出限(LOD)和定量下限(LOQ)分别为0.02μg/kg和0.04μg/kg。该方法灵敏度高、选择性好,适用于实际水产养殖环境水体和底泥中MG和LMG的残留测定。     

改进的QuEChERS方法用于鱼肉中孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫和隐色结晶紫的快速检测(英文)

孔雀石绿（MG）和结晶紫（CV）具有抗菌等活性,常被违法用于水产养殖业。但MG、CV及其代谢产物隐色孔雀石绿（LMG）、隐色结晶紫（LCV）具有致癌性。所以水产品中染料的残留检测是食品安全分析的重要问题。由于水产品基质复杂,样品前处理尤为重要。本文发展了一种基于QuEChERS技术与高效液相色谱联用的方法,用于鱼肉中4种染料的同时检测。对QuEChERS方法中提取剂体积、提取次数以及分散固相萃取材料进行了优化。结果表明反相/强阴离子交换材料（C18SAX）能有效提高回收率。在最优条件下,4种染料在0.5~100 mg/L范围内线性良好,相关系数均大于0.998。该方法在鱼肉中的回收率为73%~91%,RSD为0.66%~5.41%。结果表明该方法简单、高效,适合于鱼肉中染料的快速检测。     

某些碱性三苯甲烷染料共振瑞利散射法测苯唑西林

在NaOH 溶液中,苯唑西林（OXA）能与某些碱性三苯甲烷染料如甲基紫（MV）、乙基紫（EV）和孔雀石绿（MG）结合,使体系的共振瑞利散射（RRS）急剧增强并产生新的RRS光谱,最大共振光散射峰分别位于333 nm(MV体系)、342 nm(EV体系)和343 nm（MG体系）,苯唑西林的质量浓度在0.080～0.60 mg/L(MV体系)、0.040～0.40 mg/L(EV体系和MG体系)时与散射强度呈良好的线性关系,检出限（3σ）分别为0.064 mg/L(MV体系)、0.024 mg/L(EV体系)和0.013 mg/L(MG体系),其中以孔雀石绿体系最灵敏,以其为例考察了共存物质的影响。 结果表明,方法具有较高的选择性,用于人血清、人尿及市售药物中苯唑西林的测定,结果满意。     

碱性三苯甲烷染料褪色分光光度法测定藻酸钠

在弱酸性的HAc-NaAc缓冲溶液中,藻酸钠与乙基紫、结晶紫和甲基紫等三苯甲烷碱性染料发生反应,形成结合产物使染料发生褪色,且对于不同的染料,最大褪色波长分别为594 nm(乙基紫体系)、584 nm(结晶紫、甲基紫体系)、616 nm(孔雀石绿体系)。藻酸钠浓度分别在0~5.0 mg/L(乙基紫、甲基紫体系)0、~3.0 mg/L(结晶紫体系)0、~2.0 mg/L(孔雀石绿体系)范围内符合比耳定律;摩尔吸光系数根据染料的不同在3.6×105~4.8×106L.mol-1.cm-1之间,其中以乙基紫体系最灵敏,对藻酸钠的检出限为29 ng/mL。以乙基紫体系为例研究了共存物质的影响。此法灵敏度高,选择性好,用于含藻酸钠的可立凝样品的分析测定,结果满意。     

养殖水体中孔雀石绿的三维荧光斜投影分析方法研究

基于三维荧光光谱仪以及斜投影算法,建立了养殖水体中孔雀石绿含量的快速分析模型。首先向样品中加入足量硼氢化钾粉末,将水溶性的孔雀石绿(MG)完全转化为不溶于水的隐性孔雀石绿(LMG),然后加入等体积的乙腈溶解LMG,通过三维荧光检测LMG的含量进而转化得到养殖水体中MG的含量,可提高检测灵敏度。结果表明:基于斜投影算法进行化学计量学分析,可以减少样品的假阴性率和假阳性率,测定结果与高效液相色谱法测定结果一致,与平行因子算法相比较,斜投影算法的相对误差较小,LMG标准品在0.02～0.60μg·mL~(-1)浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.9984,检出限为1.28×10~(-2)μg·mL~(-1),加标回收率在83.33%～100.00%之间,精密度RSD≤0.55%。三维荧光光谱仪检测灵敏度高,样品采集快速,结果准确可靠,可用于多组分混合物的检测分析。     

柱前电化学衍生-高效液相色谱法测定鱼肉中结晶紫和隐性结晶紫

建立了柱前电化学氧化还原衍生-高效液相色谱测定鱼肉中结晶紫(CV)及隐性结晶紫(LCV)残留量的方法。试样用体积分数0.5%乙酸乙腈溶液提取,酸性氧化铝吸附剂净化,乙腈和乙酸铵缓冲液(78∶22,V/V)等度洗脱,柱前库仑检测器500 m V电压下LCV衍生为CV,588 nm波长检测。CV,LCV含量在0.010~0.50 mg/L范围内线性良好(γ0.998),检出限为2.0μg/kg,定量限为5.0μg/kg。加标回收率为86.0%~91.0%。方法精密度、正确度和检出限等性能指标均达到兽残分析的要求,可用于水产品中CV,LCV测定。     

高效液相色谱-串联质谱法测定沉积物中孔雀石绿及其代谢物

建立了沉积物中孔雀石绿及其代谢物(隐性孔雀石绿)的高效液相色谱-串联质谱检测方法.称取2 g沉积物样品,以乙腈和CH2Cl2超声萃取,旋转蒸发浓缩后,以30%甲醇定溶,经0.45μm滤膜过滤后,应用高效液相色谱-串联质谱测定沉积物中孔雀石绿及其代谢物残留量.本方法MG和LMG线性范围为0.5-100μg/L,相关系数为0.9982和0.9976,仪器检出限为0.2×10-9,定量限为0.5×10-9,MG回收率为44.5%～66.7%,LMG回收率31.4%～53.3%,方法检出限为2.0 ng/g.该方法适用于沉积物中痕量孔雀石绿及其代谢物的检测.     

超高效液相色谱-串联质谱快速检测水产品中孔雀石绿及无色孔雀石绿

采用超高效液相色谱(UHPLC)与串联质谱(MS/MS)联用对水产品中残留量的孔雀石绿(MG)及无色孔雀石绿(LMG)进行了快速检测。经均匀化处理的试样用乙腈在pH 4.5的乙酸盐缓冲介质中萃取使MG及LMG萃入有机相,所得萃取液用液-液分配,先后用酸性氧化铝及氯化钠和酸性氧化铝及无水硫酸钠进行分离及净化。上层清液经0.2μm滤膜过滤后供UHPLC-MS/MS分析,采用电喷雾离子化(ESI )及多反应监测模式进行测定,用D5-MG及D6-LMG内标法进行定量。在优化的试验条件下,使质谱分析中的基体效应得到合理降低。方法的测定下限(S/N=10),MG为0.19μg.kg-1,LMG为0.10μg.kg-1,在0.5~5.0μg.kg-1浓度范围内作标准加入法,方法的回收率在89.4%~110%范围内。相对标准偏差(n=6)值在5.9%~9.8%。     

加速溶剂萃取/超高效液相色谱-串联质谱法测定沉积物中三苯甲烷类杀菌剂

采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS),结合加速溶剂萃取(ASE)前处理技术,建立了同时测定沉积物中3种三苯甲烷类残留(孔雀石绿、结晶紫、亮绿)的方法。干燥研磨后的底泥样品用中性氧化铝混合分散,以乙腈-Mc Ilvaine缓冲溶液(体积比10∶2)为萃取液,经ASE萃取富集后进入液相色谱-串联质谱分析,内标法定量。结果表明:3种三苯甲烷类化合物的峰形对称并完全分离,在0.5~50.0μg/L范围内线性良好(r0.998);在1 500 psi压力及60℃萃取温度下,目标物的回收率为65.8%~112%,相对标准偏差(n=6)为5.1%~14.4%,方法检出限为0.006~0.007μg/kg,定量下限为0.024~0.028μg/kg。该方法已用于滆湖沉积物中3种目标化合物的检测,为我国环境监管提供了技术支撑和数据支持。     

HgCl2-头孢噻肟螯合阴离子与碱性三苯甲烷类染料相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用

在pH为5.3～6.8的Britton-Robinson(BR) 缓冲溶液中, 头孢噻肟钠(CFTM)与HgCl2形成摩尔比为1∶1的螯合阴离子, 它能进一步与结晶紫、甲基紫、乙基紫、亮绿、碘绿、甲基绿和孔雀石绿等碱性三苯甲烷类染料反应形成三元离子缔合物, 导致共振瑞利散射(RRS)的显著增强. 最大RRS峰分别位于367, 367, 340, 367, 340, 340和340 nm附近, 在一定的CFFM质量浓度范围内散射强度与头孢噻肟钠的浓度均呈良好的线性关系. 用结晶紫、甲基紫、乙基紫、亮绿、碘绿、甲基绿和孔雀石绿体系测定头孢噻肟钠的线性范围和检出限(3σ) 分别为0.0090～3.5 μg/mL和2.7 ng/mL, 0.0092～3.5 μg/mL和2.8 ng/mL, 0.013～3.5 μg/mL和4.0 ng/mL, 0.010～3.5 μg/mL和3.1 ng/mL, 0.011～3.5 μg/mL和3.4 ng/mL, 0.012～4.0 μg/mL和3.5 ng/mL以及0.016～3.5 μg/mL和4.7 ng/mL, 其中以结晶紫体系灵敏度最高. 研究了适宜的反应条件和影响因素, 对离子缔合物的组成和离子缔合反应机理进行了探讨, 考察了共存物质的影响, 表明方法有良好的选择性, 据此发展了用HgCl2和碱性三苯甲烷类染料的灵敏、简便、快速测定痕量头孢噻肟钠的新方法.     

呋塞米-Pd(Ⅱ)-碱性三苯甲烷染料反应体系的吸收光谱及分析应用

在pH为5.0~7.6的Britton-Robinson(BR)缓冲溶液中,呋塞米(FUR)与Pd(Ⅱ)形成摩尔比1∶1的配合物,进一步与乙基紫(EV)、结晶紫(CV)、甲基紫(MV)、亮绿(BG)、甲基绿(MeG)等碱性三苯甲烷染料(BTPMD)作用形成1∶1的离子缔合物时,染料发生褪色反应,褪色波长分别位于595 nm(EV、CV体系)、580 nm(MV体系)、615 nm(BG体系)和630 nm(MeG体系),FUR浓度在2.0×10-7~4.0×10-6 g/mL(EV体系)、3.0×10-7~8.0×10-6 g/mL(CV体系)、4.0×10-7~4.0×10-6 g/mL(MV体系)、4.0×10-7~7.0×10-6 g/mL(BG体系)、1.2×10-6~8.0×10-6 g/mL(MeG体系)范围内与褪色波长处的吸光度变化值呈良好的线性关系,摩尔吸光系数(ε)根据染料的不同在0.57×104~3.40×104 L/(mol·cm)之间,灵敏度最高的EV体系的检出限(3σ)为6.0×10-8 g/mL,据此建立一种测定呋塞米的新分光光度法。 研究了适宜的反应条件、分析化学性质和共存物质的影响,用于尿样中呋塞米的含量测定,回收率在96.0%~106.8%之间。     

酶联免疫吸附分析法测定水产品及水中孔雀石绿和无色孔雀石绿

本文报道一种同时测定水产品及水样中孔雀石绿(MG)和无色孔雀石绿(LMG)的间接竞争酶联免疫吸附分析法。对无色孔雀石绿分子进行修饰,使其与载体蛋白交联,得到免疫原和包被抗原,经过多次免疫动物制得抗无色孔雀石绿的多克隆抗体。在优化的实验条件下,IC50值(标准曲线中吸光度抑制至最大吸光度值的50%时所对应的待测物浓度)为0.9~2.6μg/L,检出限为0.02~0.10μg/L,无色孔雀石绿在水样及水产品中的回收率为76.2~95.0%,与孔雀石绿的交叉反应率为95.25%。真实样品测定中,两种食用鱼养殖水样及一个鱼样中未检出孔雀石绿和无色孔雀石绿,但在观赏鱼养殖水样及另一鱼样中检出孔雀石绿和无色孔雀石,浓度分别为1.84μg/L和1.38μg/L。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定养殖水和沉积物中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留

建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定养殖水和沉积物中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物(隐性孔雀石绿和隐色结晶紫)的多残留分析方法。沉积物样品真空冷冻干燥,乙腈和二氯甲烷提取,MCX固相萃取小柱净化;养殖水试样真空冷冻干燥,50%乙腈-水溶液(含0.1%甲酸)溶解残渣,离心过膜,上机检测。经BEH C18色谱柱分离,梯度洗脱,多反应监测正离子模式下进行定量和定性分析。采用内标法定量,药物含量在0.50~50μg/L范围内线性关系良好,相关系数大于0.99;以3倍和10倍信噪比计算出养殖水的检测限和定量限为10~25 ng/L和25~50 ng/L,沉积物的检测限和定量限为0.020~0.025μg/kg和0.04~0.05μg/kg;平均回收率为85.2%~105.6%,相对标准偏差小于12%。方法已用于实际养殖水和沉积物样品中违禁药物的测定。     

碱性三苯甲烷染料共振瑞利散射法测定藻酸钠

在HAc-NaAc缓冲溶液中,藻酸钠(SA)能与某些碱性三苯甲烷染料如乙基紫(EV)、结晶紫(CV)和甲基紫(MV)结合而使共振瑞利散射(RRS)急剧增强并产生新的RRS光谱。当藻酸钠浓度为0.018~4.0 mg/L(EV-SA体系)、0.12~2.0 mg/L(CV-SA体系)、0.17~2.5 mg/L(MV-SA体系)时与散射强度呈直线关系,方法具有较高的灵敏度,对于不同体系,其检出限(3σ)在5.2~48.0μg/L之间。以最灵敏的乙基紫体系为例研究了共存物质的影响,表明方法选择性好。方法用于海带提取液中藻酸钠的测定,结果满意。     

碱性三苯甲烷染料褪色分光光度法测定肝素

研究了肝素对某些碱性三苯甲烷染料发生缔合反应的条件、分光光度特征和分析化学性质。结果表明 :在近中性的Britton Robinson缓冲溶液中 ,肝素钠与这些碱性三苯甲烷染料形成离子缔合物时 ,染料发生明显的褪色。体系吸光度的降低与肝素钠浓度成正比。肝素钠浓度在 0～ 2 .4mg/L(乙基紫、结晶紫体系 )、0～2 .8mg/L(甲基紫体系 )、0～ 4 .0mg/L(甲基绿、孔雀石绿、亮绿体系 )范围内符合比耳定律 ;摩尔吸光系数根据染料的不同在 3.99× 10 5～ 3.93× 10 6L·mol-1·cm-1之间 ,其中以乙基紫体系最为灵敏。以乙基紫体系为例研究了表面活性剂和共存物质的影响 ,表明方法选择性好。用于肝素钠注射液效价的测定 ,结果满意     

超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪同时检测水中9种亚硝胺

采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪(UPLC-MS/MS)优化了9种亚硝胺的质谱运行参数,并通过对比不同流动相、固相萃取柱和定容溶剂对水中9种亚硝胺检测强度的影响,确定以甲醇-10 mmol/L碳酸氢铵溶液为流动相,使用椰壳活性炭萃取柱对样品进行预处理,超纯水作为定容溶剂。在最优实验条件下,9种亚硝胺的线性范围为5~150 ng/L,相关系数(r2)为0.997~0.999,检出限和定量下限分别为1.3~2.8 ng/L和4.0~8.5 ng/L;日内(n=5)和日间(n=6)相对标准偏差分别为3.5%~8.4%和2.8%~7.5%。3种不同实际水样在25 ng/L和100 ng/L加标浓度水平下,回收率达80.4%~109.6%。使用该方法对6个不同给水处理厂和污水处理厂出水中的亚硝胺浓度进行检测,其中N-亚硝基二甲胺(NDMA)的检测浓度最高,分别为10.2 ng/L和45.6 ng/L。