人γ晶体蛋白的一级结构测定 1.γ晶体蛋白的分离提纯及其顺序测定方法(GC/MS法)的研究

成功地从人眼晶体中分离出单纯组分的γ晶体蛋白,对γ晶体蛋白的纯度、相对分子质量、氨基酸组成、N末端氨基酸组成等进行了测定,利用酸水解法和酶解法对γ晶体蛋白进行了水解和酶解条件的摸索、找出了使γ晶体蛋白断裂成适合于GC/MS联用仪进行结构测定的肽段的裂解条件。对进行氨基酸顺序测定的GC/MS法化学衍生化条件作了一系列的摸索,找出了化学衍生化的合适条件。对衍生化过程中的一些影响因素也进行了探讨。     

烤烟中γ-氨基丁酸的测定

γ-氨基丁酸(Υ-aminobutyric acid,简称γ-ABA)是一种独特的非蛋白质氨基酸,其分子式为H2N(CH2)3COOH[1].它是哺乳动物、甲壳类动物、昆虫和某些寄生蠕虫神经系统中重要的抑制性神经递质,具有降血压、治疗癫痫、增强动物的采食能力等生物活性[2];它在高等植物中也广泛分布,并与植物在逆境条件下的应激反应有关.     

免疫电化学方法测定γ干扰素

利用溴化氰把马抗人γ干扰素抗体交联在醋酸纤维微孔膜上，３７℃下经与γ干扰素样品液温育反应１ｈ后，在免疫电极上测量了抗体膜膜电位，观察到膜电位与γ干扰素浓度对数呈正比，研究了膜电位与温育反应时间关系。     

氨基酸自动分析仪测定保健食品中γ-氨基丁酸

依据γ-氨基丁酸(GABA)与茚三酮反应生成蓝紫色化合物,采用氨基酸自动分析仪测定,建立了保健食品中GABA的测定方法。经过对前处理条件的选择和优化,确定保健食品用0.02 mol/L HCl超声提取,用Na OH溶液调节p H至5.5,以柠檬酸盐缓冲溶液为流动相,茚三酮溶液显色,测定波长为570 nm,外标法定量,在0.5~50 mg/L范围内线性关系良好(r=0.9999),方法检出限为0.2 mg/L,定量限为0.5 mg/L。分别在5,10和30 mg/L 3个水平进行加标和精密度实验(n=6),回收率分别为99.2%,93.9%,94.7%,相对标准偏差分别为在5.5%,9.6%,2.2%。方法适合于保健食品中γ-氨基丁酸的定量分析。     

毛细管电泳测定γ-四氢吡咯基苯丙醇的光学纯度

1　引　　言最简单的光学纯度测定方法是旋光度测定法 ,但它的可靠性较低且无法测定没有标准品的新化合物。ＮＭＲ、ＨＰＬＣ和ＧＣ也是常用的方法。近年来 ,毛细管电泳在手性分离领域中取得了很大的成功 ,它也能用于光学纯度的测定。本文研究了用毛细管电泳法测定新合成的手性化合物γ 四氢吡咯基苯丙醇的光学纯度。2　实验部分2 1　仪器与试剂　ＳｐｅｃｔｒａＰＨＯＲＥＳＩＳ10 0 0 ＴＭ 毛细管电泳仪 (美国ＴＳＰ公司 ) ,5 0 μｍＩＤ弹性石英毛细管 (河北永年锐沣色谱器件有限公司 )。β 环糊精聚合物由北京理工大学化工与材料学院合…     

高效液相色谱法测定生物体液中γ-氨基丁酸

研究了邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱法测定血浆和脑脊液中γ-氨基丁酸的含量。色谱条件:色谱柱为Nova-pak C18柱,流动相为50 mmol.L-1的乙酸钠(pH 6.8)、甲醇和四氢呋喃(A:82∶17∶1;B:22∶77∶1,V/V),梯度洗脱。方法的线性范围为0.5~100μmol.L-1,检出限为0.04μmol.L-1。日间和日内测定的精密度分别为1.9%~6.8%和1.6%~5.7%;标准加入回收率在92.7%与96.8%之间。采用上述方法测定正常人和癫痫病患者血浆和脑脊液中γ-氨基丁酸含量,结果令人满意。     

多道γ能谱仪应用于测定磷矿石中226Ra

应用GBT 2480多道γ能谱仪测定了磷矿石中226Ra的含量,对测定的工作奈件进行了试验并予以优化.用该仪器配备的谱测量软件MCA获得数据和谱分析软件Win Nal处理数据.试验结果表明,所获得的精密度和准确度数据符合国家标准规定的要求.     

全自动氨基酸分析仪法快速测定乌龙茶中γ-氨基丁酸

不同的发酵工艺会造成茶样中γ-氨基丁酸含量的不同.建立了全自动氨基酸分析仪快速测定乌龙茶样品中γ-氨基丁酸含量的方法,并测定不同发酵工艺的乌龙茶样品中γ-氨基丁酸的含量.茶样经浸泡后,过膜,使用全自动氨基酸分析仪进行测定.实验结果显示,方法检出限达到0.01 g/100 g,回收率为94.4%~109.4%,符合检测要求.方法前处理简单、快速,检测时间短,节省溶剂,测定结果准确、可靠,能够满足茶样中γ-氨基丁酸的日常检测工作,适用于大量样品的定性定量分析,对优化生产高含量γ-氨基丁酸的发酵工艺具有重要意义.     

MPFC-QuEChERS结合GC-MS/MS测定血液中γ-羟基丁酸

建立了一种快速多滤过型净化柱(MPFC)-QuEChERS结合气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)检测血液中γ-羟基丁酸(GHB)的新方法.通过考察样品前处理条件与仪器条件对检测结果的影响,确定了最优实验条件:0.1 mL血液样品中加入GHB-D6作为内标,以乙酸乙酯为萃取剂,上清液过MPFC-QuEChERS净化柱...     

荧光光度法测定山竹黄酮混合物中γ-山竹黄酮

研究了α-和γ-山竹黄酮的光谱性质,建立了测定山竹黄酮混合物中γ-山竹黄酮的荧光光度法。配制一系列浓度的α-山竹黄酮、γ-山竹黄酮及其混合物溶液,分别测定其紫外吸收光谱及荧光光谱。结果表明:α-和γ-山竹黄酮的紫外光谱较为相近,其最大吸收波长分别为317 nm和308 nm。而其荧光光谱有明显的差别,α-山竹黄酮无荧光性质,γ-山竹黄酮在436 nm处有较强荧光。γ-山竹黄酮的荧光强度与其浓度在1.0×10-6~6.0×10-5mol/L范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9975,方法的检出限为4.7×10-7mol/L。将荧光法的测定结果与高效液相色谱法(HPLC)进行了比较,二者有良好的一致性。     

螺旋藻中亚油酸和γ-亚麻酸含量的气相色谱法同时测定

应用气相色谱法同时测定螺旋藻中有效成分亚油酸和γ－亚麻酸的含量。选择以石油醚为溶剂,用索氏法提取样品,以十七酸为内标物,在提取物的正己烷溶液中加入Ｈ２ＳＯ４－ＣＨ３ＯＨ（体积比１：９）甲酯化试剂适量,在７０℃恒温水浴中甲酯化反应１０ｍｉｎ,用气相色谱测定含量。亚油酸甲酯线性方程为Ｙ＝２．６ｘ－０．０１１９,ｒ＝０．９９９９,加标回收率为１０８．４％;γ－亚麻酸甲酯线性方程为Ｙ＝２．４１６ｘ－０．０     

拉曼镊子分析单个苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白

应用拉曼镊子研究了来自同一亚种的两个苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株的单个伴孢晶体蛋白的拉曼光谱。一束30mW、785nm的近红外激光导入倒置显微镜,形成光镊,俘获水溶液中的单个伴孢晶体蛋白,同时收集被俘伴孢晶体蛋白的拉曼信号。结果表明,单个晶体的拉曼光谱反映了晶体蛋白的分子结构和蛋白组成,得到的拉曼光谱信号更清晰、更灵敏。平均光谱和主成分分析均显示,同一亚种的H7、D4菌株的晶体蛋白的拉曼光谱比较接近。但在同一菌株内有两类不同的伴孢晶体存在,得到了群体分析方法难以得到的信息。本方法不需要复杂的纯化伴孢晶体过程,直接俘获单个伴孢晶体并收集其拉曼光谱,既可以得到群体伴孢晶体的信息,更可以得到群体内每个晶体蛋白之间的信息。     

高效液相色谱法测定人脑脊液中γ-氨基丁酸和谷氨酸

研究了丹酰氯柱前衍生反相高效液相色谱法测定人脑脊液中γ－氨基丁酸（Ｇａｂａ）和谷氨酸（Ｇｌｕ）的方法。检测波长为ＵＶ２５４ｎｍ;流动相Ａ：甲醇;流动相Ｂ：四氢呋喃－甲醇－０．０５ｍｏｌ／Ｌ醋酸钠（ｐＨ６．２）（５７５４２０,Ｖ／Ｖ）;流速为１ｍＬ／ｍｉｎ;梯度洗脱。讨论了有关测试条件。方法的线性范围分别为５～１０００μｍｏｌ／Ｌ（Ｇｌｕ）和１～６００μｍｏｌ／Ｌ（Ｇａｂａ）;最低检出限（μｍｏｌ／Ｌ）分别为０．００２（Ｇｌｕ）和０．００１（Ｇａｂａ）。     

超高效液相色谱/质谱法测定血液中γ-氨基丁酸

研究了超高效液相色谱-质谱检测器(UPLC-QDa)对γ-氨基丁酸的分析检测,建立了UPLC测定血液中γ-氨基丁酸的含量的分析方法。采用乙腈萃取血液样品,经BEH C18色谱柱(2.1×50 mm,1.7μm)分离,以0.1%甲酸水溶液(含0.5%乙酸胺):乙腈(95:5,V/V)为流动相,流速0.2 m L/min,质谱检测器(QDa)检测,正离子SIR模式,m/z=104进行定量,进样量1μL。对照品在0.5~10μg/m L浓度范围内与峰面积线性关系良好。3个添加试验的平均回收率分别为78.9%,87.6%,79.5%,RSD分别为1.2%,1.1%,2.1%。     

人胃粘膜中γ-氨基丁酸和谷氨酸含量的高效液相色谱法测定

建立了胃粘膜组织中γ-氨基丁酸和谷氨酸含量的高效液相色谱测定法。用异硫氰酸苯酯(PITC)作衍生剂,色谱柱为Pico·Tag氨基酸专用柱,梯度洗脱,紫外检测波长254 nm。γ-氨基丁酸和谷氨酸分别在0.125~6.25 μmol/L,0.025～2.5 mmol/L时线性关系良好;γ-氨基丁酸和谷氨酸的平均加样回收率分别为95.4%和93.5%,批内误差分别为3.56%和1.12%,批间误差分别为7.47%和5.98%。该方法稳定、灵敏。用该方法测定了30例胃粘膜标本,结果胃癌组织的γ-氨基丁酸和谷氨     

未衍生高效液相色谱法测定螺旋藻粉中γ-亚麻酸含量

建立了未衍生高效液相色谱法测定螺旋藻粉中γ－亚麻酸（ＧＬＡ）的方法。采用Ｃ８反相柱,以乙腈：四氢呋喃：水（含０．４％乙酸）＝６２：３：３５（Ｖ／Ｖ／Ｖ）为流动相,示差折光检测器检测,测定了同一批螺旋藻粉中ＧＬＡ含量为１．３９％,标准偏差０．０４３２,变异系数３．１１％,回收率为９３．９０％￣９８．９３％,本方法快速,重现性及准确度均令人满意。     

α-乙酰-γ-丁内酯显色测定铁含量方法的研究

在pH4.8的邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲溶液中,Fe3 与α-乙酰-γ-丁内酯形成稳定的络合物,最大吸收波长为480 nm,络合物的表观摩尔吸光系数(ε)为3.6 X 103L/(mol·cm),Fe3 的质量浓度在0～40μg/(10mL)范围内符合比耳定律.该方法测定铝合金和多维元素片(21)中微量的铁,回收率为99.3%～114.3%,相时标准偏差为1.87%(n=8).     

辐照高聚物的热释光——Ⅰ.γ-辐照聚乙烯的释光峯及其活化能的测定

本文研究了剂量、辐照气氛、升温速率对γ-辐照聚乙烯的热释光曲线的影响。当剂量在9×10~5拉特以下时,在77到273°K 之间出现三个主峯;当增高剂量(2×10~6拉特以上)时则仅呈现二个主峯。低剂量时,氧对释光曲线有显著影响,但对峯Ⅰ(低温峯)则观察不到明显的影响。 在辐照聚乙烯的差热分析中,我们观察到一个由辐照引起的吸热峯。虽然该差热峯的温度位置与释光峯峯Ⅰ相近,但与释光峯在反复辐照时仍可出现的情况相反,在反复测试差热或反复辐照时该吸热峯却不再出现。这表明产生这两种峯的因素不是同一的,而决定这两种峯的温度位置的因素却可能是相同的。 用分峯法将热释光曲线的主峯分开,由此求得峯Ⅰ和峯末的活化能分别为0.22及1.2电子伏;与由变更升温速率法所求得的活化能相比较,对峯末由两种方法所得的结果相近,对峯Ⅰ则相差较大。通过与理论计算曲线相比较,表明分峯法所得的结果较为合理。