高效液相色谱法测定地骨皮中18种氨基酸

采用高效液相色谱法测定地骨皮中18种氨基酸的含量。地骨皮样品用10-乙基吖啶酮-2-磺酰氯为柱前衍生试剂进行衍生化。以Akasil-C18色谱柱为固定相,用乙腈(5+95)溶液和乙腈(95+5)溶液以不同比例混合的溶液为流动相进行梯度洗脱,用荧光检测器测定。18种氨基酸的线性范围均为32fmol~100pmol,检出限(3S/N)在2.06~8.65fmol之间。加标回收率在96.4%~107%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在均小于4.0%。     

在线衍生-高效液相色谱法测定化妆品中的游离甲醛

采用自动在线衍生-高效液相色谱法测定化妆品中游离甲醛的含量。样品经乙腈涡旋提取,以2,4-二硝基苯肼的乙腈-乙酸溶液为衍生液,在线衍生2min后,衍生物在Agilent C_(18)色谱柱上分离,以乙腈(65+35)溶液为流动相进行洗脱,用二极管阵列检测器测定,检测波长为355nm。甲醛线性范围为1.0~20.0mg·L~(-1),测定下限(10S/N)为50mg·kg~(-1)。加标回收率在83.0%~98.4%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在3.4%~7.8%之间。     

高效液相色谱法测定指甲油中甲醛、乙醛和丙酮

采用高效液相色谱法测定指甲油中甲醛、乙醛和丙酮的含量。样品用乙腈和水提取,2,4-二硝基苯肼为衍生剂,采用Kromasil-C18色谱柱为分离柱,以乙腈-水(65+35)溶液为流动相,在检测波长364nm处进行测定。甲醛、乙醛和丙酮的质量浓度均在0.01~20.0mg·L-1范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)在0.001 5~0.003 5mg·L-1之间。加标回收率在88.6%~110%之间,相对标准偏差(n=6)在1.2%~9.7%之间。     

柱前衍生-反相高效液相色谱法测定氨基酸

向氨基酸溶液中加入对甲氧基苯磺酰氯(MOBS-Cl)试剂,在55℃水浴中加热35min使氨基酸衍生化,所得含有氨基酸衍生物的溶液用于反相高效液相色谱分析。选用ODS C_(18)柱(4.6mm×150mm,5.0μm)为固定相,以不同体积比的15mmol·L~(-1)磷酸二氢钠溶液和乙腈为流动相进行梯度淋洗,以235nm作为检测波长,提出了测定氨基酸的柱前衍生-反相高效液相色谱法。17种氨基酸衍生物的峰面积与其浓度均在0.01～5.0mmol·L~(-1)范围内呈线性关系,检出限(3S/N)在0.0010～0.0050mmol·L~(-1)之间。取5.0,25.0,50.0g·L~(-1)氨基酸标准溶液从衍生化操作开始分别重复测定5次,根据所测得峰面积值计算其相对标准偏差均小于5.0%。     

高效液相色谱法测定壮阳保健品中4种硫代西地那非类药物

提出了用高效液相色谱法测定壮阳保健品中4种非法加入的硫代西地那非类药物的方法。样品用乙腈-水(1+1)溶液超声提取。用ACE C18色谱柱分离,柱温为35℃,进样量为10μL,所用流动相为由(A)三乙胺溶液-甲醇-乙腈(60+20+20)混合液和(B)三乙胺溶液-甲醇-乙腈(8+46+46)混合液,以不同体积比混合的溶液进行梯度淋洗。检测波长为230nm。4种药物的线性范围均在1.00~100mg·L-1范围内,检出限(3S/N)均为67μg·kg-1。加标回收率在92.0%~101%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)均小于1.5%。对阳性样品进一步用LC-MS/MS确证。此外,还研究了硫代西地那非的二级质谱裂解规律和紫外光谱特征。     

衍生液提取-高效液相色谱法测定食品中甲醛

提出了高效液相色谱法测定了几种食品中甲醛含量。以衍生液2,4-二硝基苯肼乙腈溶液-pH 5的磷酸盐缓冲溶液(1+1)的混合溶液为提取剂对样品进行提取,以Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为固定相,以甲醇-水(70+30)溶液为流动相分离。甲醛的测定下限(10S/N)为5.0 mg.kg-1。以鲜香菇、鲜鱿鱼、奶粉和面粉样品为基体,分别添加5.0,10.0,20.0 mg.kg-1甲醛标准溶液,回收率在73.3%~97.7%之间,相对标准偏差(n=6)在1.4%~5.0%之间。     

凝胶渗透色谱净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱法同时测定食用植物油中9种真菌毒素

提出了用凝胶渗透色谱净化和柱后光化学衍生-高效液相色谱法(HPLC)测定食用油中9种真菌毒素。样品用乙腈均质提取,用凝胶色谱柱进行净化。为解决黄曲霉素B1和G1在水溶液中的荧光猝灭问题,在二极管阵列检测器(DAD)和荧光检测器(FLD)之间连接了光化学衍生器,使B1和G1衍生成荧光强度高的物质。HPLC分析中用SunFireTMC18色谱柱和以不同体积比的(A)水和(B)甲醇-乙腈(1+1)溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱。9种真菌毒素分别在一定浓度范围内呈线性,检出限(3S/N)在0.01~0.20mg·kg-1之间。以空白样品作基体进行加标回收试验,回收率在83.0%~97.4%之间,相对标准偏差(n=6)在1.2%~4.8%之间。     

固相萃取-超高效液相色谱法测定水体中4种硝基呋喃类药物

采用固相萃取-超高效液相色谱法测定水体中呋喃西林、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃唑酮等4种硝基呋喃类药物的含量。样品经HLB固相萃取柱净化后,用氨水-甲醇(5+95)溶液洗脱。以BEH C18色谱柱为分离柱,以乙腈和含有0.1%(体积分数)甲酸的2mmol·L-1乙酸铵溶液以体积比23比77组成的混合液为流动相,在检测波长360nm处进行测定。4种硝基呋喃类药物的质量浓度均在5.0~200μg·L-1范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)为0.02μg·L-1。以空白样品为基体进行加标回收试验,所得回收率在84.5%~97.2%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.5%~4.5%之间。     

固相萃取-高效液相色谱法测定化妆品中的鞣花酸含量

建立了固相萃取-高效液相色谱法测定化妆品中鞣花酸的含量。样品用甲醇-水(1+1)溶液提取,超声提取10min,以10 000r·min-1转速离心5min,移取5.00mL上清液,经MAX固相萃取柱处理,用甲酸-甲醇(5+95)溶液洗脱。MG C18柱(250mm×4.6mm,5μm)为固定相,以0.2%(体积分数)磷酸-乙腈(18+82)溶液为流动相进行洗脱,检测波长为254nm。线性范围为0.5~100mg·L-1,测定下限(10S/N)为20mg·kg-1,应用该方法对化妆品中鞣花酸的含量进行检测,加标回收率在83.5%~100%之间。     

高效液相色谱法测定化妆品中5种性激素

应用高效液相色谱法测定化妆品中5种性激素的含量。化妆品样品以甲醇提取,采用Kromasil 100-5C18色谱柱为分离柱,以乙腈-水(65+35)溶液为流动相,在检测波长242nm和290nm处进行测定。5种性激素的质量浓度均在0.100~10.0mg·L-1范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)在0.552~1.01 mg·kg-1之间,测定下限(10S/N)在1.10~5.04mg·kg-1之间。加标回收率在96.2%~110%之间,测定值的相对标准偏差(n=9)在均小于10%。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中加替沙星、莫西沙星和左氧氟沙星

提出了同时测定水产品中加替沙星、莫西沙星和左氧氟沙星的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。样品经乙腈提取、正己烷除脂浓缩后用Supelclean LC-SCX固相萃取柱富集,用氨水甲醇(25+75)溶液洗脱。洗脱液氮气吹干,用乙腈-水(10+90)溶液溶解定容至2.0mL,取10μL进行分离测定。以不同体积比的乙腈与5mmol·L~(-1)乙酸铵的混合溶液为流动相作梯度淋洗,经ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱分离,采用电喷雾正离子源及多反应监测模式测定。对3种化合物的质谱裂解规律进行了研究,3种化合物的质量分数在1 00μg·kg~(-1)以内呈线性,检出限(3S/N)在3.7～4.8μg·kg~(-1)之间;以3种水产品样品为基体,在3个标准加入水平下进行回收率和精密度试验,加标回收率在70.5%～83.7%之间,相对标准偏差(n=6)均不大于13%。     

液相色谱-串联质谱法测定蔬菜及其制品中5种农药残留量

提出了液相色谱-串联质谱法测定蔬菜及其制品中苯霜灵、灭多威、扑灭津、哒螨灵及吡螨胺等5种农药残留量的方法。蔬菜样品经含0.1%(体积分数)乙酸的乙腈及无水硫酸镁和无水乙酸钠提取并离心分离后,取上清液蒸干,用乙酸酸化的乙腈2mL溶解。将此溶液加入于PSA、C18与石墨碳黑混合吸附剂粉末中经涡旋混合的分散固相净化方法净化。以Hypersil GOLD-C18色谱柱为分离柱,以不同体积比的(A)甲醇和(B)甲酸-水(1+9)的混合液为流动相进行梯度洗脱,洗脱液用乙腈-水(2+8)混合液定容,进行MS测定。采用电喷雾负离子源多反应监测模式检测。5种农药在一定的质量浓度范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)均为0.01mg·kg-1。加标回收率在86.1%~95.7%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.2%~3.8%之间。     

微波辅助衍生-离子液体分散液液微萃取-高效液相色谱法测定发酵酒和饮料中甲醛

提出了微波辅助衍生-离子液体分散液液微萃取-高效液相色谱法测定发酵酒和饮料中的甲醛。以2,4-二硝基苯肼为衍生试剂,1-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐为提取剂,乙腈为分散剂,样品溶液在300 W的微波功率下辐照60s后离心,甲醛衍生物被萃取到离子液体中,用乙腈定容。以SB-C18色谱柱为分离柱,以水-甲醇(2+8)溶液为流动相进行洗脱,检测波长355nm。甲醛的质量浓度在1.00~100μg·L-1范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)为0.16μg·L-1,测定下限(10S/N)为0.53μg·L-1。对啤酒、葡萄酒、可乐和橙汁4个样品进行加标回收试验,回收率在92.5%~99.1%之间,测定值的相对标准偏差(n=5)在2.6%~7.8%之间。     

高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中9种β_2-受体激动剂残留量

采用高效液相色谱-串联质谱法测定了猪肉中9种β-受体激动剂的残留量。样品经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解后加入高氯酸沉淀蛋白并离心,取上清液过PCX阳离子固相萃取小柱净化,用氨水-甲醇(5+95)混合液洗脱,氮气吹干后用乙腈定容至1 mL。以CAPCELL PAK CR色谱柱为分离柱,以10mmol·L-1乙酸铵溶液-乙腈(55+45)混合溶液(含体积分数为0.1%的甲酸)为流动相进行洗脱,采用电喷雾正离子源及选择反应监测模式进行测定,内标法进行定量。9种β-受体激动剂的质量浓度在4.00~100μg·L-1范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)在0.09~0.50μg·L-1之间。对空白样品进行加标回收试验,回收率在83.2%~102%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在5.0%~12%之间。     

溶液捕集-高效液相色谱法测定卷烟主流烟气中主要羰基化合物

卷烟主流烟气中的羰基化合物用含2,4-二硝基苯肼的乙腈-磷酸溶液为吸收液进行捕集,并在此溶液中使羰基化合物衍生化,所得衍生化产物供高效液相色谱分析。采用Merck LichrosphereRP C₁₈色谱柱进行分离,并用不同配比混合的水-乙腈-四氢呋喃-异丙醇（59+30+10+1）、水-乙腈-四氢呋喃-异丙醇（33+65+1+1）和乙腈的混合液作为流动相进行梯度淋洗,用紫外检测器于波长365 nm处测定。方法的检出限（3S/N）在0.04～0.12μg·g^-1之间。方法用于卷烟主流烟气的分析,回收率在75.0%～96.0%之间,测定值的相对标准偏差（n=5）在2.0%～9.3%之间。     

柱前衍生液相色谱-串联质谱法测定珍珠粉中氨基酸

以邻苯二甲醛(OPA)为柱前衍生化试剂,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测,建立了测定珍珠粉中氨基酸的新方法。珍珠粉样品经研磨、拌糊、酸化、水解、蒸干、用乙腈定容等处理,采用Welch Topsil C_(18)色谱柱(150×2.1mm,3μm)进行分离,流动相为10mmol/L HAc-NH_4Ac/乙腈,梯度洗脱。在正离子模式下采用多重反应模式(MRM)进行监测。氨基酸在0.1ng/mL~100μg/mL浓度范围内线性良好,相关系数在0.9928~0.9990之间,7种氨基酸的检出限在0.03~15ng/mL之间,加标回收率在95%~105%之间。该方法灵敏度高、选择性好,适用于珍珠粉中氨基酸的测定。     

高效液相色谱法测定氧化型染发剂中11种染料

提出了高效液相色谱法测定氧化型染发剂中11种染料含量的方法。样品用甲醇-水(1+1)溶液超声萃取15min,经Capcell Pak C18MG S5色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)分离,用磷酸调至pH 7.7的乙腈-三乙胺磷酸缓冲溶液(3+97)为流动相进行等度洗脱,用二极管阵列检测器于波长280nm处检测。11种染料的线性范围均在20～500mg·L-1之间。以空白染发剂样品为基体,进行加标回收试验,回收率在70%～110%之间,相对标准偏差(n=6)均小于10%。     

高效液相色谱法同时快速测定壮阳类保健品中的18种非法添加物

采用高效液相色谱法同时快速测定壮阳类保健品中的18种非法添加物。样品经乙腈(1+1)溶液超声提取后,提取液经以亚3微米填料的Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱(50mm×4.6mm,2.7μm)分离,以(磷酸-三乙胺缓冲溶液)(pH 5.7)-甲醇-乙腈(70+15+15)混合液为流动相A、甲醇-乙腈(1+1)混合液为流动相B进行梯度洗脱,采用二极管阵列检测器,检测波长为230nm。18种添加物的检出限(3S/N)均为1.0 mg·kg~(-1),测定下限(10S/N)均为3.0mg·kg~(-1)。8种代表性添加物的线性范围为5.0~500 mg·L~(-1),加标回收率在88.2%~103%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在0.4%~1.6%之间。     

超高效液相色谱-串联质谱法定性和高效液相色谱法定量分析天南星中氨基酸成分

为建立中药材中氨基类极性非紫外活性成分的定性与定量分析方法,以中药材天南星为研究对象,采用柱前衍生化技术,以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,经C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 3.5 μm)分离和超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)分析,共解析了天南星中20个成分,包括18个氨基酸和2个胺类化合物。经优化衍生化条件,应用高效液相色谱法(HPLC),以Diamonsil C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)分离,以乙腈和0.05 mol/L醋酸铵-醋酸缓冲液(pH 6.5)为流动相,梯度洗脱,在254 nm下检测,建立了同时测定15种氨基酸含量的方法,经方法学考察符合含量测定要求。谷氨酸、色氨酸在2~100 mg/L范围内、精氨酸在6~300 mg/L范围内、其余各氨基酸在0.8~40 mg/L范围内均呈良好的线性关系,相关系数均不小于0.9995;平均回收率在95%~105%之间,RSD均小于3%;并成功应用于12批中药材的测定。本方法简便、灵敏、准确,具有可操作性,可用于快速鉴定中药中的氨基类成分以及进行含量测定。     

高效液相色谱法测定人血浆中的维生素D_3及25-OH-D_3

采用高效液相色谱法测定血浆中维生素D_3和25-OH-D_3的含量。样品经乙醇-乙腈(60+40)混合溶液提取后,提取液用氮气吹干,残渣用正己烷溶解后,过Waters silica固相萃取柱净化,净化液用氮气吹干后,将残余物溶于pH 6.5的5mmol·L-1磷酸盐溶液-乙腈-甲醇(30+15+55)缓冲溶液中。待测物在Symmetry C18色谱柱上分离,以pH 6.5的乙腈-5mmol·L~(-1)磷酸盐(20+80)混合液为流动相A,以甲醇-乙腈-四氢呋喃(65+20+15)混合液为流动相B,进行梯度洗脱;采用光电二极管阵列检测器,检测波长为265nm。维生素D_3和25-OH-D_3的线性范围均为3.0~72μg·L~(-1),检出限均为2.0μg·L~(-1)。加标回收率在88.5%~94.1%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)小于4%。