蚕丝蛋白固相萃取分离富集细胞色素c的研究

在特定实验条件下, 蚕丝蛋白对细胞色素c表现出选择性吸附. 以蚕丝蛋白微填充柱为载体, 在流动系统中建立了细胞色素c的分离富集方法, 以分光光度法在410 nm处检测分离富集过程. 在进样流速低于10 μL/s时, 2 mL样品溶液(pH=5.6的水溶液)中5 μg/mL的细胞色素c可被蚕丝蛋白微柱完全吸附, 而在洗脱流速低于15 μL/s时, 200 μL NaCl溶液(1.0 mol/L)可将吸附的细胞色素c完全洗脱, 分离富集系数为10. 用本方法测定细胞色素c的线性范围为1.0~10.0 μg/mL, 检出限为0.33 μg/mL, 精密度RSD为2.5%(5 μg/mL, n=9). 此外, 还采用本文方法对人全血中的蛋白质进行了分离富集, 并用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳验证了分离后蛋白的纯度.     

整体柱集成的微流控芯片用于禽流感病毒检测

微芯片毛细管电泳由于分离速度快、试剂消耗小,是一种重要的分析方法.为了提高通量,拓展应用,不同的预处理方法被采用.固相萃取(SPE)是一种重要的预处理方法,萃取材料包括磁珠~([1,2])、膜~([3])、整体柱~([4,5])等.整体柱由于通透性好,富集效率高,制备简单等特点而广泛用作固相萃取材料.     

微通道蛋白质吸附的流动电势表征

蛋白质在固体表面的吸附与许多生命现象和生物应用相关,比如血液凝结、细胞粘附及材料的生物相容性等~([1]),也是化学、生物、医学、材料等多种学科都密切关注的问题~([2]),相应研究有很大的科学价值和应用前景.     

基于铁(Ⅱ)-百里香酚蓝显色反应的分光光度法测定食品中的铁(Ⅱ)

<正>铁是人体必不可少的微量元素之一,在人体内的血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素和其他酶的合成中起着非常重要的作用。从食物中获取铁是人体铁的重要来源,因此食品中铁含量的测定具有重要意义。目前,测定铁多采用光度法~([1-3])和原子吸收光谱法~([4]),其中光度法具有简便、快速、成本低等优点,在     

黄原脂棉分离-石墨炉原子吸收光谱法测定咸味食品中的镉

正黄原脂棉是由纤维素与氢氧化钠反应生成碱纤维后与二硫化碳发生磺化反应的产物,即二硫代甲酸钠纤维素酯,又称黄原酯棉,属纤维素改性产物~([1])。改性纤维素(一般指螯合纤维素)在分离富集金属元素方面有着广泛的应用。其中,巯基棉最为广泛,用巯基棉分离富集痕量金属元素已有许多报道~([2-10])。用巯基棉富集空气中的汞~([11]),已被列为行业标准,但其缺点是巯基棉制备过程较复杂,尤其是     

适配体功能化多壁碳纳米管整体柱分离富集细胞色素c

本文结合核酸适配体的特异性吸附及碳纳米管比表面积大的特点,研制了核酸适配体功能化碳纳米管/聚合物复合整体柱(AMMC),并将其应用于细胞色素c(Cyt c)选择性分离。结果表明,AMMC具有良好的通透性和稳定性,可选择性富集Cyt c,富集量可达1.47 mg。结合顺序注射系统,AMMC成功用于猪心样品中Cyt c的选择性分离富集,在生物样品分析中具有良好的应用前景。     

细胞色素c在羟基磷灰石修饰玻碳电极上的直接电化学

采用沉淀法合成羟基磷灰石纳米晶体，由于具有独特的多吸附位点特征，羟基磷灰石可作为一种新型电子传递促进剂用于细胞色素c的直接电化学研究．在pH7．0的磷酸盐缓冲溶液中，细胞色素c在羟基磷灰石修饰玻碳电极表面于0．074V(vs．Ag/AgC1)处有一对准可逆的氧化还原峰，为细胞色素c血红素辅基Fe(Ⅲ)／Fe(Ⅱ)电对的特征峰．实验结果表明细胞色素c与羟基磷灰石之间的静电作用．促进了细胞色素c在玻碳电极表面扩散控制的准可逆单电子转移过程．讨论了电位扫描速度、溶液离子强度对细胞色素c直接电化学的影响．     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱研究浊点萃取过程中汞形态与二乙基二硫代氨基甲酸钠的螯合反应行为

近年来,环境或生物样品中汞形态的测定备受关注,有效的分离手段结合高灵敏度的元素检测成为首选的分析方法~([1]),若辅以合适的富集技术可以更好地提高检测的灵敏度~([2]).     

锑试金-电感耦合等离子体质谱法测定黑色页岩中6种铂族元素

正分析黑色页岩中铂族元素多以锍镍试金预富集~([1-3]),但样品中硫、碳等还原性组分含量差异显著~([4-6]),选用的试金配料需有针对性,因此增加了额外的工作量,亦对操作者经验有较高要求。相比硫镍试金,锑试金通过灰吹可以富集铂族元素且试剂无需纯化。本工作参考X射线荧光光谱法熔融制样预氧化操作流程~([7])及铼的氧化镁烧结法~([8]),     

双水相萃取结合液相色谱法分离蛋白质

建立了PEG/( NH4)2SO4双水相体系萃取富集,结合液相色谱分离分析多种蛋白质的方法.考察了无机盐种类和浓度、PEG分子量、pH值和温度等因素对双水相形成以及对细胞色素C、肌红蛋白、牛血清白蛋白、溶菌酶、胰蛋白酶分配行为的影响.结果表明,上述5种蛋白在室温、pH 3.5～9.0范围内,可在15％ PEG-4000/10％ (NH4)2SO4双水相体系中得到富集,且主要集中在下相.同样条件下,血清中的高丰度蛋白在上下相均有分配,下相分配量较大.通过双水相萃取分离蛋白质及对液相色谱一定时间段的色谱峰收集,可初步实现血清中高丰度蛋白质的分离去除.     

SPE-GC/MS联用测定丁香中挥发油

固相萃取(SPE)是一种用途广泛而且越来越受欢迎的样品前处理技术.SPE是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱,以达到分离和富集目标化合物的目的~([1]).因SPE具有安全、回收率高、重现性好、操作简便、快速、易实现自动化等优点,在相关领域应用广泛,具有良好的应用前景.     

基于偏振光波导分光光谱技术原位研究纳米金-细胞色素c 自组装过程

时间分辨偏振光波导分光光谱技术是一种用于研究表面分子吸附动力学的强大工具. 利用该技术实时、原位监测纳米金与细胞色素c的静电自组装过程, 发现随着吸附层数的增加, 纳米金粒子吸附层产生的局域等离子体共振(LSPR)吸收峰发生了红移, 而且在横磁(TM)模式下的红移比横电(TE)模式下的红移更快; 细胞色素c在纳米金表面的吸附导致LSPR吸收峰的峰位和强度在TM模式下显著红移和升高, 相比之下, TE模式下的LSPR吸收峰无明显变化. 对实验数据的分析验证了纳米金在细胞色素c单分子层表面的吸附动力学行为遵循扩散控制模型, 细胞色素c在纳米金单粒子层表面的吸附动力学行为遵循Langmuir等温吸附模型, 进一步估算了细胞色素c在纳米金表面的吸附速率常数、脱附速率常数和吸附自由能.     

吸附色素蛋白与纳米银粒子间的光诱导电子传递

采用表面增强拉曼光谱研究了吸附态微过氧化物酶和细胞色素c的光诱导还原.结果表明,吸附于粗糙银电极表面的过氧化物酶和细胞色素c在413nm激光连续照射下被部分还原.光诱导还原可归因于电极表面纳米银粒子的定域表面等离子体吸收使得自由电子受激,受激电子进而转移进入吸附分子空轨道,导致吸附蛋白质的还原.     

咪唑-细胞色素c复合物的溶液结构研究

轴向配体在决定血红素蛋白结构和性能方面的作用引起人们的兴趣[1]. 细胞色素c是一个重要的电子传递蛋白, 在天然状态下轴向配体His 18和Met 80与血红素的Fe原子配位. UV光谱和NMR谱显示氧化态细胞色素c配位的Met 80在pH大于9或强外源配体存在时较易被取代[2]. 人们对外源配体配位引发细胞色素c的构象的研究得到一些重要的结构特征[3,4]. 但对整个蛋白溶液结构完整精确的描述和血红素电子结构的研究还很少. 此外, 细胞色素c在重折叠过程中形成组氨酸配位的中间体, 而咪唑能捕获和阻断中间体的形成. 为此, 本文对咪唑-细胞色素c复合物溶液结构进行了研究.     

高容量硼酸亲和磁性纳米粒子的制备及其在邻羟基生物分子富集中的应用

硼亲和吸附法是分离富集邻羟基物质的重要方法。为提高吸附剂的吸附容量,本研究采用聚乙烯亚胺修饰磁性纳米粒子,增加粒子表面引发剂的密度,再通过表面引发原子转移自由基聚合法(SI-ATRP)将3-丙烯酰基苯硼酸原位聚合在纳米粒子表面,制备了一种高密度聚合物分子刷型的硼酸亲和磁性纳米粒子吸附剂。采用磁性分散固相萃取法对非邻羟基和邻羟基物质的混合液进行富集,发现此吸附剂对邻羟基小分子和生物大分子具有良好的吸附特异性;采用吸附等温线法测定了吸附剂的吸附容量,发现此吸附剂对邻苯二酚、腺苷和卵清蛋白的吸附容量分别为(151±32)μmol/g、(123±18)μmol/g和1.5μmol/g,远高于传统吸附剂的吸附容量。采用所制备的硼酸亲和磁性纳米粒子对尿液中4种核苷和蛋清中的糖蛋白进行萃取,结果表明,此吸附剂能够有效去除生物样品中的干扰物,且对核苷具有较高的萃取回收率(83.8%~108.7%,RSD15%),对糖蛋白有特异性富集作用,说明此吸附剂在生物样品的选择性富集中具有良好应用潜能。     

制备磁性分子印迹聚合物萃取环境水样中的氟喹诺酮类抗生素

氟喹诺酮类抗生素(FQs)是一种应用非常广泛的药物~([1]),被使用以后,可转移到环境水中,从而给环境带来污染.分子印迹聚合物(MIP),是指制备在空间结构和结合位点上与特定目标分子完全匹配的聚合物~([2]).     

高粱子粒淀粉表面色素的树脂分离研究

对纯化高粱淀粉过程中所得到的淀粉共生天然色素进行了树脂分离纯化研究.得到了树脂分离高粱淀粉共生色素的吸附动力学结果,3种大孔吸附树脂HPD-600、AB-8、H103对高粱红的吸附为慢速平衡型.通过对树脂分离所得色素成份的红外光谱、紫外光谱、质谱分析得出,高粱籽粒淀粉共生色素与高粱壳中的高粱红主要成份是同样的物质,鉴定出所分离的主要成份之一为5,7,4′-三羟基黄酮.     

Cyanex272-P507浸渍树脂协同萃取色层分离铥镱镥的研究

以Cyanex272-P507浸渍树脂采用萃取色层法对铥镱镥富集物进行了吸附和淋洗分离研究,考察了淋洗剂浓度、稀土负载量、淋洗液流速等因素对分离铥镱镥富集物的影响。结果表明,在充填的树脂粒度为0.3~0.6 mm的色层柱中,以0.2 ml.cm-2.min-1进料流速时能得到较大的吸附率;在稀土负载量为树脂重量的0.6%,淋洗液流速为1.0 ml.cm-2.min-1,温度为30℃,装柱树脂高度为400 mm(高径比为25∶1)的条件下,用1.0,1.5,2.0 mol.L-1盐酸梯度淋洗Tm,Yb,Lu,可实现铥镱镥富集物三者的完全分离。     

海洋沉积物中多氯联苯残留检测方法的研究

多氯联苯是环境中持久性有机污染物.由于该类物质的生物累积性,对人类和生物具有很大的潜在危害~([1]),因此研究检测海洋沉积物中多氯联苯的分析方法是环境分析中的重要课题之一.超声萃取能有效地将有机物从固体样品中萃取出来,而且超声萃取具有效率高、仪器价格便宜,操作简单等优点.     

固定Fe 3＋的磁性微球分离富集鼠肝中铁结合蛋白的初步研究

采用键合Fe3＋的纳米材料分离富集了大鼠肝脏中的铁结合蛋白质组, 并进行了质谱分析. 在相同的起始富集蛋白质量以及相同的吸附和洗脱条件下, 键合了Fe3＋的磁性纳米材料比未键合金属离子的空白材料富集了更多的蛋白质, 经质谱鉴定得到42个蛋白质, 主要包括代谢酶类、呼吸链主要成员、氧化还原蛋白、转运蛋白、血红蛋白等.