液相色谱-串联质谱法测定人血浆中卡托普利的浓度

建立了测定人血浆中卡托普利的LC/MS/MS法。取血浆0.2 mL,用对溴苯甲酰甲基溴进行衍生化,经甲醇沉淀蛋白后,以甲醇-10 mmol/L乙酸铵-甲酸(80/20/0.4,V/V)为流动相,用Zorbax SB-C18柱分离,通过配有电喷雾离子化源的四极杆-线性离子阱质谱仪,以多反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z416→m/z216(卡托普利衍生物)和m/z28→m/z193(安定)。卡托普利的线性范围为2.5~1000μg/L,最低定量限为2.5μg/L,样品分析时间为2.0 m in。该法精密、准确,在灵敏度和分析速度上优于以往文献报道,适用于游离型卡托普利血药浓度的监测和药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法同时测定血浆中白藜芦醇苷及其代谢产物

建立同时测定大鼠血浆中白藜芦醇苷及其代谢产物白藜芦醇的液相色谱-串联质谱方法。以Lichro-spher C18色谱柱为分析柱,乙腈-水为流动相,采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测(MRM)模式检测,内标法定量,用于定量分析的离子反应分别为m/z389/227(白藜芦醇苷)和m/z227/143(白藜芦醇)。血浆中的白藜芦醇苷及白藜芦醇用乙酸乙酯提取,N2吹干乙酸乙酯,残留物用甲醇溶解,注入LC/MS/MS系统进行检测。在选定的样品预处理、色谱及质谱条件下,白藜芦醇苷、白藜芦醇及内标物能够达到基线分离而且离子化效果好。用LC/MS/MS法检测大鼠血浆中的白藜芦醇苷及其代谢产物白藜芦醇,线性范围0.4~200μg/L,日内、日间精密度(RSD)均小于15%;检测血浆低、中、高3个浓度(1、20、100μg/L)白藜芦醇苷的回收率分别为106.2%、97.8%和91.6%;检测血浆低、中、高3个浓度(1、20、100μg/L)白藜芦醇的回收率分别为113.2%、103.6%和93.4%。本方法具有灵敏、准确、快速的特点,可用于白藜芦醇苷的药代动力学研究。     

大鼠血浆中木兰花碱浓度的测定

采用LC-MS/MS技术建立大鼠血浆中木兰花碱浓度的测定方法,并进行大鼠体内药动学研究.以水-乙腈溶液为流动相梯度洗脱,以Kromasil Eternity-5 C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,5μm)为分析柱,电喷雾离子源(ESI),正离子模式,选择离子监测(SRM).木兰花碱在0.2～50μg·L~(-1)的范围内线性良好,相关系数R~2=0.991 2.方法专属性、准确度与精密度、提取回收率与基质效应、稳定性均符合生物样品的测定要求.大鼠灌胃给与5 mg·kg~(-1)木兰花碱后,AUC_(0-∞)为(184.5±58.7)μg·h·L~(-1),MRT为(7.7±3.1) h,t_(1/2z)为(6.3±2.3) h,T_(max)为(0.75±0.0) h,C_(max)为(50.36±17.8)μg·L~(-1).采用LC-MS/MS技术建立了大鼠血浆中木兰花碱的浓度测定方法,并进行了方法学验证,方法专属性好,灵敏、准确、快速,适用于木兰花碱在大鼠体内的药动学研究.     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中福斯克林

建立了测定大鼠血浆中福斯克林的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS).血浆样品经液-液萃取后,以V(甲醇):V(10 mmol/L 醋酸铵):V(甲酸)=75:25:0.1为流动相,用Hypersil ODS柱分离,流速0.8 mL/min(柱后分流50%),通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,以多反应监测方式(MRM)检测.用于定量分析的离子分别为m/z 428/375(福斯克林)和m/z 494/369(格列本脲,内标).福斯克林血浆浓度测定方法的线性范围为0.8～800 μg/L; 日内、日间精密度(RSD)均小于10%;准确度(RE)小于±9%.每个样品测试时间4.5 min.应用此法测试了大鼠口服或静注福斯克林后的血药浓度.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中托品酸浓度

建立测定大鼠血浆中托品酸浓度的超高效液相色谱-串联质谱法。以双氯芬酸钠作为内标,采用Phenomenex Luna C_(18)色谱柱,流动相为0.1%甲酸水-乙腈溶液,运行时间为4.5 min,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,进样量为5μL,柱温40℃。样品经大气压力化学离子源负离子化后,通过三重四极杆串联质谱仪,在多反应监测模式下测定托品酸(m/z 164.93→102.93)和内标双氯芬酸钠(m/z 293.97→214.01)的浓度。血浆样品前处理采用甲醇沉淀蛋白。结果表明,托品酸的血浆浓度在40～25000 ng/mL内线性良好,定量下限为40 ng/mL,批内、批间精密度(RSDs)均在1.2%～6.7%以内,准确度(RE)在96.4%～113.8%以内。血浆样品室温放置6 h,样本处理后室温放置8 h,反复冻融3次及冰冻(-20℃)保存7 d的情况下均稳定。本方法适用于大鼠血浆中托品酸浓度的测定,也可为临床浓度监测提供依据。     

厚朴苷A在大鼠体内的药动学研究

采用LC-MS/MS技术建立大鼠血浆中厚朴苷A浓度的测定方法,并进行大鼠体内药动学研究.以0.1％甲酸水溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱,以Hypersil C8(MOS2)色谱柱(2.1 mm×50 mm,3μm)为分析柱,电喷雾离子源(ESI),正离子模式,选择离子监测(SRM).厚朴苷A在10～2000 ng·mL-...     

高效液相色谱-串联质谱法测定比格犬血浆中的莫诺苷浓度及其药代动力学

运用高效液相色谱-串联质谱联用技术,建立了简单、快速、灵敏的比格犬灌胃莫诺苷后血药浓度的检测方法。血浆样品采用蛋白质沉淀法处理,以芍药苷作为内标,色谱柱为Inertsil ODS-SP色谱柱(50 mm×2.1 mm,5μm),流动相为水(含1 mmol/L甲酸钠)-乙腈,梯度洗脱,流速0.4 mL/min。采用电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测(MRM)模式。绘制血药浓度-时间曲线,并采用DAS 2.0软件计算药代动力学参数。方法学实验结果表明内源性杂质不干扰莫诺苷和内标的测定,线性范围为2~5 000μg/L(r=0.996 6),定量限为2μg/L。方法精密度、准确度、回收率和基质效应均符合生物样品测定的要求,适合比格犬血浆中莫诺苷浓度的测定,可以应用该方法进行莫诺苷的药代动力学研究。比格犬灌胃莫诺苷3个剂量(5、15、45 mg/kg)后的血药浓度-时间曲线下面积(AUC(0-∞))分别为(1 631.20±238.50)、(3 984.05±750.38)、(10 397.64±3 156.34)μg/L·h,与给药剂量之间呈现良好的线性关系。     

超声提取-凝胶渗透色谱法净化-超高效液相色谱-串联质谱法测定鸭肠及其制品中6种常见抗生素的残留量

建立了超声提取-凝胶渗透色谱法(GPC)净化-超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)测定鸭肠及其制品中6种常见抗生素残留量的分析方法。将鸭肠或鸭肠制品粉碎后,取样品12.0 g至50 mL塑料离心管中,依次加入甲醇30 mL、氨水1.0 mL、除水剂无水硫酸钠3.0 g,均质1 min,超声提取15 min,冷冻离心6 min,上清液全部转移至GPC净化瓶中,按GPC条件进行净化处理,将收集的淋洗液用氮吹仪氮吹至近干,残渣加1 mL甲醇溶解,经0.45μm滤膜过滤,滤液采用UHPLC-MS/MS定性、定量检测。结果显示:替米考星、罗红霉素、红霉素、氧氟沙星、环丙沙星、氟苯尼考的质量浓度在0.01～10.00 mg·L~(-1)内与对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)依次为0.221,0.153,0.396,0.112,0.577,0.089μg·kg~(-1)。按标准加入法进行回收试验,回收率为82.4%～107%,测定值的相对标准偏差(n=6)均小于5.0%。     

HPLC研究甘草次酸对大鼠槲皮素血浆浓度及肝脏分布的影响

建立了大鼠血浆和肝脏槲皮素的高效液相色谱测定方法,并用于探索甘草次酸对大鼠槲皮素血浆浓度及肝脏分布的影响。采用ODS-SP柱,流动相为甲醇-0.4%H3PO4溶液,检测波长为370 nm,流速为1.0 mL/min。结果显示血浆和肝脏槲皮素测定的线性范围分别是0.050～10.0μg/mL和0.125～0.625μg/g。血浆和肝脏测定回收率分别是92%～101%和80%～96%,检测限分别是0.048μg/mL和0.011μg/g。大鼠口服槲皮素后在血浆未能检测到游离槲皮素,低浓度以及高浓度合药组中槲皮素浓度(水解后)高于单药组。甘草次酸对槲皮素肝脏分布没有显著影响。     

高效液相色谱/质联用测定大鼠血浆中双丹方活性成分

运用LC/MS联用技术,建立同时测定大鼠血浆中丹参素、原儿茶醛、芍药苷和丹皮酚4种活性成分的分析方法。在Agilent XDB-C8柱上,以乙腈-水-0.1%醋酸为流动相,流速0.6mL/min,柱温35℃,梯度洗脱于26min内完成分析。采用选择离子监测(SIM)方式,同时以负离子模式检测丹参素、原儿茶醛、芍药苷及正离子模式检测丹皮酚。该方法简单,准确,灵敏度和专属性较好。日内精密度和日间精密度分别小于5.2%和9.9%。据此研究大鼠口服双丹方提取物后10h内血浆中上述4种物质的含量变化,结果表明:丹参素和原儿茶醛浓度在30min达到峰值,而芍药苷与丹皮酚浓度分别在60min及20min达到峰值。     

固相萃取结合光纤传感快速检测大鼠血浆中异丙酚及其药动学研究

建立了固相萃取结合光纤传感快速检测大鼠血浆中异丙酚的方法,并研究了异丙酚的药动学.采用正压固相萃取进行样品的快速前处理,构建光纤传感紫外检测系统,通过4-氨基安替比林衍生化法对样品进行衍生化后进行光纤传感紫外检测,并进行大鼠单次静脉注射异丙酚的药代动力学研究.该方法的线性范围为1.20～21.0 μg/mL,定量限1.20 μg/mL.异丙酚的回收率大于95％,RSD小于7％.大鼠单次静脉注射异丙酚后体内的代谢过程符合开放性二室模型,其分布半衰期(t1/2α)为1.335±0.052 min,消除半衰期(t1/2β)为50.09±0.016 min.血药浓度时间曲线下面积(AUC(0-∞))为212.65±39.4 μg·min/mL.方法 可用于异丙酚药代动力学研究和血药浓度检测.     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定大鼠血浆中阿帕替尼与紫杉醇

建立了同时定量测定大鼠血浆中阿帕替尼和紫杉醇的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,并应用于药动学研究。血浆样品经固相萃取(SPE)处理。色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse Plus C18柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,体积流量0.4 m L/min,柱温40℃,进样量为3μL。质谱采用电喷雾正离子源模式(ESI+),多反应监测模式(MRM)进行定量测定。阿帕替尼和紫杉醇在0.5~1 500μg/L范围内均呈良好的线性关系(r2≥0.998),最低定量下限(LLOQ)均为0.5μg/L,日内、日间精密度RSD≤8.4%,准确度为92.5%~107.1%,提取回收率为86.2%~95.1%,基质效应(86.6%~108.6%)不影响待测物血药浓度的测定。经方法学验证,该法快速灵敏,可同时对阿帕替尼和紫杉醇进行血药浓度监测,为临床联合用药研究提供了重要的分析手段。     

刺五加叶黄酮脂质体和滴丸的药动学差异比较

采用液质联用(LC-MS/MS)方法,分析刺五加叶黄酮脂质体、刺五加叶滴丸和刺五加叶黄酮提取物经大鼠灌胃给药后其主要成分金丝桃苷的药代动力学和生物利用度,考察刺五加叶黄酮的适宜剂型。用PKsolver软件进行药代动力学数据处理,大鼠灌胃刺五加叶黄酮提取物、刺五加叶滴丸和刺五加叶黄酮脂质体后测得金丝桃苷的最大血药浓度(C_(max))分别为(210.24±10.3)、(254.12±9.2)、(349.34±12.5)μg/L;0~t时间内药时曲线面积(AUC_(0-t))分别为(30.7±2.7)、(35.01±1.98)、(45.2±2.8)μg/(m L·min);平均驻留时间(MRT)分别为(334.42±75.36)、(394.56±90.26)和(640.35±84.26)min。结果表明,刺五加叶黄酮脂质体血药达峰浓度增加,清除速率降低,药时曲线下面积加大,生物利用度显著提高,脂质体有望成为刺五加叶黄酮的适宜剂型。     

酸化沉淀蛋白-超快速液相色谱-串联质谱法测定肝损伤大鼠血浆中的头孢呋辛

为了研究二代头孢类新药头孢呋辛赖氨酸在肝损伤大鼠体内的药代动力学过程,建立了采用超快速液相色谱-串联质谱(UFLC-MS/MS)快速测定肝损伤模型大鼠血浆中头孢呋辛含量的方法。血浆样品在酸性条件下用乙腈沉淀蛋白,采用Shim-pack XR-ODS色谱柱(75 mm×3.0 mm, 2.2 μm)为分析柱、乙腈-0.1%甲酸水溶液(40:60, v/v)为流动相、流速为400 μL/min进行色谱分离,采用电喷雾负离子(ESI~)模式电离、多反应监测(MRM)模式进行质谱检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 423.2→206.8 (头孢呋辛)和m/z 454.1→238.4 (内标头孢噻肟)。结果表明,大鼠血浆中头孢呋辛的质量浓度在0.01～1 mg/L和1～400 mg/L范围内线性关系良好(r＞0.99),定量限为0.01 mg/L,日内和日间精密度(以相对标准偏差(RSD)计)均小于11.5%,准确度(RE)为~7.1%～2.2%,平均萃取回收率大于83.5%,样品运行时间仅为3.0 min,能够满足生物样品的测定需求。该法简便、快速,已用于肝损伤大鼠静脉注射头孢呋辛赖氨酸的药代动力学预实验研究。     

顶空固相微萃取-气质联用法检测尿液中的曲马多

建立尿液中曲马多的顶空固相微萃取气相色谱质谱联用(HS-SPME-GC/MS)分析方法。利用响应面法对顶空固相微萃取的条件进行优化,在优化的条件下,采用SKF为内标,在选择离子模式下,选取m/z 58(曲马多)和m/z 86(SKF)为定量离子,利用GC/MS对尿液中的曲马多进行定量分析。工作曲线线性范围超过0.05~1.0μg/mL(r2=0.9962)。检测限为0.011μg/mL(S/N=3),定量限为0.038μg/mL(S/N=10),用0.1μg/mL和0.75μg/mL曲马多标准液计算回收率分别在100.20%~109.65%和98.43%~103.82%之间,RSD为5.32%和9.13%(n=5)。建立的方法适用于尿液中曲马多。     

液相色谱-串联质谱法确证分析环境水样中痕量克百威

采集水样后,立即按比例在每升水样中加入1.0mol·L-1硝酸溶液5mL,并于4℃温度下保存。取此水样9.0mL,加入甲酸-乙腈(1+99)混合液1.0mL,混匀,经0.2μm滤膜过滤。滤液按工作条件在Shim-pack XR-ODS II色谱柱上分离,以0.01%(体积分数)甲酸溶液-乙腈(3+7)混合液作流动相进行洗脱。洗脱液按选定条件泵入质谱离子源,在ESI+模式下,克百威的准分子离子为m/z 222.2[M+H]+,MS/MS裂解最强和次强碎片离子分别为m/z 123.0和m/z165.1,两者的峰强比为Im/z123.0∶Im/z165.1=100∶20。选择离子对m/z 222.2/123.0和m/z222.2/165.1作为定性分析离子对,并选择前者作为定量分析离子对。所提出的克百威的可能裂解途径采用Q Exactive高分辨质谱予以确认。在水样分析中,根据分析对象色谱分离的保留时间(2.67min)和裂解后的碎片离子及其峰的强度比,与克百威标准溶液的结果比较,即可判定水样中是否存在克百威。定量分析的结果表明:克百威质量浓度在0.05~10.0μg·L~(-1)内与对应的峰面积呈线性关系,其检出限(3S/N)为0.01μg·L~(-1)。用标准加入法进行回收试验,测得回收率在88.4%~96.5%之间。精密度试验的结果表明:其日内相对标准偏差(n=6)在0.90%~5.6%之间,日间相对标准偏差(n=6)在1.8%~7.3%之间。     

液相色谱-串联质谱法确证分析环境水样中痕量克百威北大核心CSCD

采集水样后,立即按比例在每升水样中加入1.0mol·L-1硝酸溶液5mL,并于4℃温度下保存。取此水样9.0mL,加入甲酸-乙腈(1+99)混合液1.0mL,混匀,经0.2μm滤膜过滤。滤液按工作条件在Shim-pack XR-ODS II色谱柱上分离,以0.01%(体积分数)甲酸溶液-乙腈(3+7)混合液作流动相进行洗脱。洗脱液按选定条件泵入质谱离子源,在ESI+模式下,克百威的准分子离子为m/z 222.2[M+H]+,MS/MS裂解最强和次强碎片离子分别为m/z 123.0和m/z165.1,两者的峰强比为Im/z123.0∶Im/z165.1=100∶20。选择离子对m/z 222.2/123.0和m/z222.2/165.1作为定性分析离子对,并选择前者作为定量分析离子对。所提出的克百威的可能裂解途径采用Q Exactive高分辨质谱予以确认。在水样分析中,根据分析对象色谱分离的保留时间(2.67min)和裂解后的碎片离子及其峰的强度比,与克百威标准溶液的结果比较,即可判定水样中是否存在克百威。定量分析的结果表明:克百威质量浓度在0.05~10.0μg·L^(-1)内与对应的峰面积呈线性关系,其检出限(3S/N)为0.01μg·L^(-1)。用标准加入法进行回收试验,测得回收率在88.4%~96.5%之间。精密度试验的结果表明:其日内相对标准偏差(n=6)在0.90%~5.6%之间,日间相对标准偏差(n=6)在1.8%~7.3%之间。     

反相高效液相色谱/电喷雾质谱法测定血浆中盐酸舍曲林

采用反相高效液相色谱-电喷雾质谱法(LC-ESI/MS)测定人体血浆中盐酸舍曲林。以盐酸丙咪嗪为内标,按内标法定量。血浆样品经pH 10.00碳酸钠溶液碱化,加入甲基叔丁基醚萃取,离心分离,取上清液吹干,用流动相溶解进样。色谱柱:RP-Extend-C18(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温:40℃;流动相:pH 3.00的三氟乙酸溶液-甲醇(40∶60,V/V),流速0.6 mL/m in。质谱采用选择离子监控模式,检测离子的核质比(m/z)分别是281(丙咪嗪)和159(舍曲林)。舍曲林和丙咪嗪的保留时间分别是5.4 m in和3.8 m in;舍曲林标准曲线线性范围为1~80μg/L;检出限为1.0μg/L(S/N>10);日间、日内相对标准差均小于6.0%,相对回收率为90%~106%;提取回收率在75%~93%范围内。此法适合人体药代动力学的血浆样品的分析,结果准确、可靠。     

奶粉中高氯酸盐的液相色谱-串联质谱测定

建立了奶粉中高氯酸盐的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法.奶粉样品用水-乙腈(体积比1:2)超声波振荡提取2次,于4 000 r/min离心后,上清液经Oasis HLB固相萃取小柱净化;采用离子交换色谱分离,色谱柱为METROSEP A Supp 5(150 mm×4.0 mm)阴离子交换柱,流动相为0.2 mol/L乙酸铵溶液-乙腈(体积比1 : 1),流速0.7 mL/min;电喷雾负离子模式电离,质谱多反应选择离子检测(MRM),检测离子对为 m/z 99→83和m/z 101→85,其中m/z 99→83为定量离子对.方法的相对标准偏差为3.59%,回收率为91% ～106%,检出限为1.0 μg/kg,定量下限为5.0 μg/kg.结果表明,该法简便快速、准确可靠,也适用于鲜牛奶、酸牛奶等其他乳制品中高氯酸盐的测定.     

禽蛋中头孢噻肟残留的高效液相色谱-串联质谱法测定

建立了高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定禽蛋中头孢噻肟药物残留的方法。禽蛋样品中的头孢噻肟用纯水提取,乙腈沉淀蛋白,Oasis HLB(500 mg,6 mL)固相萃取柱净化,8 mL甲醇洗脱。采用Zorbax XDB-C18(2.1 mm×50 mm,3.5μm)色谱柱,以0.2%甲酸水-乙腈为流动相,0.3 mL/min梯度洗脱,经高效液相色谱分离后,采用电喷雾质谱正离子模式电离,多反应选择离子检测(MRM)模式测定。检测离子对为m/z456.1/396.1、m/z456.1/324.1,其中m/z456.1/396.1为定量离子对。在1.35~135μg/L范围内标准曲线的线性关系良好,相关系数为0.999 3;在1.0、50.0、100μg/kg3个添加水平的平均加标回收率为87%~99%,相对标准偏差为1.9%~3.9%;方法检出限为0.3μg/kg,定量下限为1.0μg/kg。该方法简便、灵敏、准确、可靠,适用于禽蛋中头孢噻肟药物残留的分析。