刺五加叶黄酮脂质体和滴丸的药动学差异比较

采用液质联用(LC-MS/MS)方法,分析刺五加叶黄酮脂质体、刺五加叶滴丸和刺五加叶黄酮提取物经大鼠灌胃给药后其主要成分金丝桃苷的药代动力学和生物利用度,考察刺五加叶黄酮的适宜剂型。用PKsolver软件进行药代动力学数据处理,大鼠灌胃刺五加叶黄酮提取物、刺五加叶滴丸和刺五加叶黄酮脂质体后测得金丝桃苷的最大血药浓度(C_(max))分别为(210.24±10.3)、(254.12±9.2)、(349.34±12.5)μg/L;0~t时间内药时曲线面积(AUC_(0-t))分别为(30.7±2.7)、(35.01±1.98)、(45.2±2.8)μg/(m L·min);平均驻留时间(MRT)分别为(334.42±75.36)、(394.56±90.26)和(640.35±84.26)min。结果表明,刺五加叶黄酮脂质体血药达峰浓度增加,清除速率降低,药时曲线下面积加大,生物利用度显著提高,脂质体有望成为刺五加叶黄酮的适宜剂型。     

中药土鳖虫溶栓成分的分离纯化研究

对土鳖虫水浸醇沉提取物2号样品进行了离子交换柱层析，得组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。实验结果表明，组分Ⅲ的溶栓活性明显高于组分Ⅰ和组分Ⅱ，其蛋白质占量为88．9％，分子量约为38，018，效价为313UK／mg，比活力为352UK／mg蛋白。将组分Ⅲ再进行凝胶过滤柱层析，得组分Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ。组分Ⅵ的生物活性高于组分Ⅳ和组分Ⅴ，蛋白质含量为89．3％，电泳呈现两条带，分子量约为34，623和39，811，效价为77UK／mg，比活力为86UK／mg蛋白。将组分Ⅵ进行反相高效液相色谱柱层析，收集保留时间为17min的洗脱峰，得到土鳖虫纯蛋白质，呈白色絮状，极易溶于水。再一次用反相高效液相色谱检查其纯度，保留时间为17．073min．无杂质峰。纤溶活性实验结果表明，组分Ⅵ既有直接降解纤维蛋白的作用，同时也有纤溶酶原激活剂样作用。     

荧光法研究PTB与白蛋白的结合

利用药物对蛋白的荧光猝灭作用,用荧光法研究了N-苯酰甲噻唑溴(PTB)与牛血清白蛋白(BSA)及人血清白蛋白(HSA)的相互作用.测定发现BSA溶液的最大激发波长为280 nm,HSA溶液的最大激发波长为200 nm.分别向溶液中加入PTB后,原有的最大发射波长处的强度明显减弱.说明PTB对BSA和HAS有荧光猝灭作用.PTB与BSA,HSA有中等强度的结合.测得15℃时PTB与BSA,HSA的结合常数分别为3.66×103和3.83×103,结合位点数n分别为1.02和1.16;37℃时PTB与BSA,HSA的结合常数分别为3.58×103和3.35×103,结合位点数分别为0.95和0.87.根据热力学常数确定了PTB与BSA,HSA之间的主要作用力类型均为静电作用力.通过F(o)ster偶级-偶级非辐射能量转移原理,得到BSA,HSA与PTB结合的位置距色氨酸残基的距离分别为7.5和7.9 nm.根据白蛋白的结构,可以推测BSA,HSA与PTB结合的位点在ⅡA亚结构域,靠近Try214的区域.     

表面等离子体共振生物传感器研究人参皂甙与血清白蛋白的相互作用

To use a newly developed wavelength modulation surface plasmon resonance （SPR） biosensor, an experimental protocol was developed to investigate the interaction of ginsenosides with serum albumin. With a known concentration of the ginsenosides, bound percentages of the ginsenosides with human serum albumin （HSA） or bovine serum albumin （BSA） were obtained. SPR technique could require no labeling and this method provided the detailed information on association and disassociation of molecules in real time. The results indicate that the sensitivity of wavelength modulation SPR biosensor is sufficient for detection and characterization of binding events involving low-molecular weight compounds and their immobilized protein targets.     

中草药中槲皮素的毛细管电泳法测定

近年来,毛细管电泳法用于中药的分析正在逐渐展开．微波辅助萃取是微波与传统的溶剂萃取法相结合后形成的一种新的萃取方法,目前已被用于环境、食品和天然产物的提取等领域,我们也曾用微波萃取法研究了中药刺五加和黄芩中的黄酮类化合物。     

紫外可见光谱及成像方法研究二妙丸药物对高尿酸血症疗效的影响

采用黄嘌呤及氧嗪酸钾联合腹腔注射的方法建立符合人体高尿酸血症发病机制的稳定动物模型,比较二妙丸水提物苍术和黄柏比例分别为1∶1,1∶2和2∶1的水提物(含生药360 mg·mL-1)及二妙丸 (360 mg·mL-1) 分别连续灌胃给予大鼠两周后,评价药物对高尿酸血症的治疗和保护作用。利用紫外可见分光光度法检测了血清及肝脏中黄嘌呤氧化酶(XOD)的活性变化。在570 nm处进行测定,结果显示,模型组与各组相比,血清中XOD活性显著升高(p<0.01),肝脏中XOD活性无显著差异(p>0.05),但各给药组与模型组相比血清和肝脏中XOD活性均显著降低(p<0.01),其中苍术和黄柏比例为1∶2的组方疗效最为显著。对肾脏石蜡切片应用苏木精-伊红染色法(HE染色)及马松三色染色法(Masson染色)进行染色,光镜下观察模型组及各给药组肾小球的形态变化及肾小管间质的纤维化程度。结果表明,模型组肾小球萎缩、血管袢分辨不清、出现一定程度的炎细胞浸润、肾间质纤维化等现象。各给药组与模型组比较,肾小球萎缩、炎细胞浸润、纤维组织生成等均有所改善。纤维化面积结果显示,模型组与各组相比纤维化程度显著升高(p<0.01或p<0.05),但与二妙丸组的差异性低于其类方给药组(p<0.05),其中苍术和黄柏比例为1∶2的组方疗效最显著。本实验以肾损伤和黄嘌呤氧化酶活性两个方面为考察指标,对高尿酸血症的治疗和保护作用进行评价,为后续二妙丸类方药物的开发提供科学依据。     

复方板蓝根颗粒抗病毒成分HPLC-UV指纹图谱及LC-ESI-MSn研究

建立了复方板蓝根颗粒提取物高效液相色谱(HPLC-UV)指纹图谱分析方法. 确定了10批不同来源复方板蓝根颗粒提取物的19个共有峰. 各提取物的HPLC-UV指纹图谱与对照指纹图谱比较, 相似度均在93%以上. 利用液相色谱与质谱联用(LC-ESI-MSⁿ)技术对主要共有峰的结构进行了鉴定. 药效学研究表明, 复方板蓝根颗粒提取物有抗病毒活性. 该指纹图谱精密度、稳定性和重现性良好, 可作为复方板蓝根颗粒的质量评价方法.     

姜黄素联合顺铂对卵巢癌细胞COC1的体外抗肿瘤作用

利用MTT比色法研究了姜黄素(Cur)联合顺铂（DDP）对卵巢癌COC1细胞的抑制作用。 结果表明,当ρ(DDP)为2.5~10 mg/L,ρ(Cur)=5 mg/L时,与DDP相比,二者联合用药对卵巢癌COC1细胞可产生协同抑制作用;ρ(Cur)=5 mg/L就可明显增强COC1细胞对顺铂的敏感性,增敏倍数为2.66倍;光学显微镜观察发现,药物作用后COC1细胞的形态发生了改变,细胞折光度下降,大小不一、形态各异、排列疏散和胞浆空泡化严重。 为探讨姜黄素协同顺铂抑制肿瘤的机制,本研究采用高效液相色谱法测定姜黄素辅助用药前后细胞内DDP含量的变化。 结果表明,在加入姜黄素前后,COC1细胞内顺铂含量虽然略有下降,但差异无统计学意义（P＞0.05）。 由此可见,姜黄素与顺铂联合用药对人卵巢癌COC1细胞增殖具有协同抑制作用,且姜黄素可同时增加COC1细胞对顺铂的敏感性,但姜黄素可能并未明显改变顺铂在细胞内的含量,即姜黄素可能不是通过影响顺铂进入细胞的通路而起协同抑制作用的。     

乌头碱在家兔肠道内代谢产物的LC/ESI-MSn研究

采用LC/ESI-MSn的方法对家兔肠道内的乌头碱代谢产物进行研究. 经与空白组比较发现, 给药后家兔小肠内容物中新增加6个化合物峰(M1～M6), 盲肠内容物中新增加5个化合物峰(M2～M6), 粪便中新增加2个化合物峰(M3, M4). 分别测定各化合物的准分子离子及各级串联碎片离子, 并与标准品的质谱断裂规律进行比较, 同时参考文献, 推断肠道内化合物M1为16-O-去甲基-8-O-去乙酰基乌头碱, M2为8-O-去乙酰基乌头碱, M3为16-O-去甲基乌头碱, M4为乌头碱(AC), M5为去氧乌头碱, M6为印乌头碱.     

中药刺五加叶中有效成分的几种微波辅助提取方法研究

利用高压微波提取法、常压回流微波提取法、流动微波提取法和索氏提取法提取中药刺五加中黄酮和皂苷类化合物,考察各种提取方法提取效率随时间的变化。结果表明,高压微波提取法在压力为300kPa,完全提取的时间为10min;常压回流微波提取法完全提取的时间为14min;流动微波提取法完全提取的时间为10min;索氏提取法需8h尚能完成。各种提取方法总黄酮的提取率分别为43．7、48．2、42．7和34．7mg／g;总皂苷的提取效率分别为60．2、61．5、59．8和46．5mg/g。与索氏提取法比较,微波提取法提取黄酮和皂苷,提取时间大大缩短,且提取效率显著提高。