高效液相色谱法同时测定鸭梨种子中3种内源激素

建立了高效液相色谱同时测定鸭梨种子中3种内源激素赤霉素(GA3)、生长素(IAA)和脱落酸(ABA)含量的方法.采用C18反相色谱柱,柱温35 ℃,以甲醇-水(含1%乙酸)(4∶ 6, V/V)为流动相,流速为1 mL/min, 检测器波长开始用254 nm, 2.5 min时将波长切换至210 nm,至3.8 min,GA3出峰结束后,再次将波长切换回254 nm测定IAA和ABA.GA3、IAA和ABA的平均回收率分别为92.8%、91.6%和94.7%.为快速、准确分离和测定鸭梨种子内源激素提供了一种可靠方法.     

在线固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时检测大豆不同部位的4种植物激素

采用双三元液相色谱(Dual gradient liquid chromatography,DGLC)建立了在线固相萃取技术与电喷雾串联质谱联用方法(Online SPE DGLC-ESI MS/MS),并成功应用于实际样品检测。本方法同时检测大豆不同部位中的4种酸碱性植物激素(赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(IAA)、玉米素(ZT)和脱落酸(ABA))。通过考察固相萃取富集柱、分析色谱柱、流动相对植物激素的保留和选择性的影响,获得较高的灵敏度、回收率、稳定性及精密度。大豆样品经液氮低温研磨,以80%甲醇溶液提取,再经离心稀释过滤后,进样分析。进样后样品经在线固相萃取Hypersep Retain AX柱洗脱保留,目标分析物依次转移至分析柱Acclaim PA2色谱柱,并以0.1%甲酸和甲醇溶液作为流动相进行梯度洗脱,采用选择反应监测离子模式(SRM)同时采集正负离子通道进行定性分析,基质标准曲线外标法进行定量分析,GA3,IAA,ZT在0.1~50μg/L范围内线性良好,检出限为0.0002μg/g;ABA在0.5~50μg/L的范围内线性良好,其检出限为0.0010μg/g。以0.8,4.0和40μg/L分别为低、中、高浓度考察4种植物激素的回收率为76.1%~93.5%,RSD为0.8%~6.0%。结果表明,籽粒中含有的ABA浓度明显高于其它部位。本研究为快速准确地分离和测定大豆不同部位内源激素提供了有效方法。     

超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法同时测定植物组织中多种激素

建立了同时测定植物组织中玉米素(ZT)、吲哚乙酸(IAA)、赤霉素类(GA1、GA3、GA4)、脱落酸(ABA)、茉莉酸(JA)7种植物激素的超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法(UHPLC-QqQ-MS/MS)。采用C18色谱柱(50×2.1mm,1.8μm)分离,以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,在多反应监测(MRM)模式下进行定性定量分析,外标法定量。7种植物激素的检出限为0.01~8.77ng·mL~(-1),定量限为0.02~29.23ng·mL~(-1),在实验所采用的浓度范围内线性相关系数(R2)在0.9870~0.9990之间。植物样本前处理采用C18-SPE小柱进行富集和纯化,极大地减少了基质干扰。在辣椒叶片基质中,7种植物激素在低、中、高3个加标水平下的平均回收率为65.8%~90.9%,相对标准偏差(RSDs,n=5)为2.1%~5.5%。该方法简单、快速,灵敏,准确,适用于对植物组织中多种激素的同时测定。     

固相萃取-高效液相色谱法测定马尾松组织中内源激素

建立了固相萃取-高效液相色谱法(SPE-HPLC)测定马尾松组织中内源激素赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(IAA)、玉米素核苷(ZR)和脱落酸(ABA)的分析方法。采用WatersC18反相柱(250×4.6mmi.d.,5μm),以体积比为45∶54∶1的甲醇-水-乙酸溶液为流动相,流速1.0mL/min;进样量20μL;检测波长254nm;外标法定量测定。选用Sep-PakC18固相萃取小柱富集内源激素,再经流动相洗脱预处理。4种内源激素在1.0～3.0μg/g添加范围内的回收率为88.4%～108.3%,GA3、IAA、ZR和ABA检出限依次为0.05μg/g、0.02μg/g、0.03μg/g和0.01μg/g。     

液相色谱-串联质谱法同时测定油茶不同组织中5类内源激素

本文以油茶枝条、嫩叶、花芽和种仁为材料,建立高效液相色谱-串联质谱法同时对油茶不同组织中内源激素生长素(IAA)、赤霉素A4(GA4)、玉米素(tZ)、脱落酸(ABA)、茉莉酸(JA)5类内源激素的测定方法。油茶不同组织经液氮研磨后用提取液(含75%甲醇、5%甲酸水溶液)提取,通过固相萃取柱(MCX)纯化,用甲醇洗脱得到IAA、ABA、JA、GA4;氨化甲醇洗脱得到tZ;合并洗脱液后,利用液相色谱-串联质谱在多反应检测(MRM)模式下进行定量分析。IAA、ABA、JA、GA4的最佳洗脱体积为2mL,tZ的最佳洗脱体积为3mL。测定5种激素线性相关系数R20.995;方法检出限为0.4~1.2ng/g,加标回收率范围在88%~101%之间,相对标准偏差为7.3%。应用该方法对油茶不同组织内源激素含量的测定结果表明,油茶的花芽和嫩叶的生长素水平较枝条和果实高,种子中茉莉酸含量最高为978.3ng/g,GA4/ABA比例为嫩叶种仁花芽枝条,与油茶各部位生长速度一致。建立的方法适于对弱酸性和碱性激素进行快速纯化分析。     

高效液相色谱法测定藏药萨热大鹏丸中羟基红花黄色素A

用反相高效液相色谱法测定藏药萨热大鹏丸中的羟基红花黄色素A。C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.05%H3PO4溶液,梯度洗脱;流速:1 mL/min;柱温25℃;检测波长为403 nm。羟基红花黄色素A在0.11136~0.94654μg的范围内呈线性关系,回归方程为y=2435.7402x-10.9502,r=0.9999;平均加样回收率为99.9%,RSD为0.3%。该方法可用于萨热大鹏丸中羟基红花黄色素A的测定。     

高效液相色谱法分离和测定小麦中的5种内源激素

建立了高效液相色谱法(HPLC)用于分离和测定小麦中的吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA₃)、玉米素(ZT)和水杨酸(SA)5种植物内源激素。经过条件优化,选用甲醇作为样品提取溶剂。然后,经石油醚和乙酸乙酯萃取,经Sep-Pak C18小柱纯化。液相色谱的分离采用Eclipse XDB-C₁₈ (250 mm×4.6 mm, 5 μm)反相色谱柱;流速为1 mL/min;进样量10 μL。检测器波长设置为254 nm; 14.5 min时切换到240 nm; SA洗脱后即18 min时切换回254 nm。流动相A为甲醇,B为乙酸溶液(pH 3.6)。梯度条件为0~7 min, 20%A; 7~10 min, 20%A~28%A; 10~17 min, 28%A; 17~19 min, 28%A~40%A; 19~35 min, 40%A。结果表明,小麦中各激素的分离效果理想,加标回收率达96.9%~98%,相对标准偏差在1.54%~2.29%之间。因此,该方法的建立为快速、准确地分离和测定小麦内源激素提供了可靠的方法。     

高效液相色谱法同时测定款冬花中四种酚酸

建立了同时测定款冬花中没食子酸、绿原酸、咖啡酸和阿魏酸的高效液相色谱方法。采用Sepax Gp-C18色谱柱(250×4.6mm,5μm),以甲醇-0.5%乙酸溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长280nm,20min内4种酚酸可实现基线分离。结果表明,各组分在一定浓度范围内呈良好线性关系,相关系数均大于0.9990,检测限为0.05~0.14mg/L,平均回收率在92.3%~102.0%之间,相对标准偏差为0.27%~2.70%,且不同来源的款冬花中4种酚酸的含量有明显差异。该方法简便、快速、准确、重复性好,可作为款冬花药材质量控制的方法。     

高效液相色谱同时测定注射用双黄连(冻干)中六种活性成分含量

建立了高效液相色谱(HPLC)同时测定注射用双黄连(冻干)中绿原酸、咖啡酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸、黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的含量的方法。采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(250×4.6 mm,5mm),以乙腈―0.25%(wt)冰醋酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长350 nm,柱温35℃。结果表明,六种成分基本分离,线性关系良好,平均回收率在99.72%~101.56%之间。本方法准确、简便、重现性好,可以实现注射用双黄连(冻干)多成分质量控制。     

超高效液相色谱法同时测定食品中7种合成色素

建立了超高效液相色谱法(UPLC)同时测定食品中柠檬黄、新红、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红和亮蓝7种人工合成色素。采用ACQUITY UPLBEHC18柱(50×2.1mm,1.7μm),以0.02mol/L的乙酸铵和甲醇为流动相,梯度洗脱,流速0.3mL/min,柱温30℃,检测波长为254nm和628nm,用外标法定量。7种合成色素在1~100μg/mL范围有良好的线性关系(r≥0.9994),平均回收率在83.5%~99.9%范围,相对标准偏差为0.57%~2.91%。该法简便、快速、灵敏,结果准确可靠,适用于食品中上述7种人工合成色素的分析。     

植物内源激素的反相高效液相色谱法测定

报道了以6－N－苄基腺嘌呤（BA）为内标的反相高效液相色谱法测定玉米素（ZT）、赤霉素（GA3）、激动素（KT）、3－吲哚乙酸（IAA）和脱落酸（ABA）等5种植物内源激素的条件;采用μBondapakC18柱、乙腈－甲醇－0．6％（φ）乙酸流动相、检测波长254nm,建立了一种从植物中提取5种激素的样品处理方法,并测定了马铃薯块茎中的5种植物内源激素的含量。     

气相色谱法分离和测定3种植物内源激素

 应用大口径毛细管气相色谱法,以正二十二烷为内标物,对植物组织中的吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)和赤霉素(GA)等3种内源激素进行了测定。结果表明:IAA,ABA和GA的最低检测限依次为0.16,0.08和0.48mgL,相对标准偏差均小于3.0%,平均回收率为88.4%～92.2%。方法简便、灵敏、准确、重现性好。     

植物激素的反相高效液相色谱法分离和测定

探讨了分离和测定８种植物生长激素的反相高效液相色谱法。结果表明：以含有０．８％醋酸的甲醇和水作为流动相,采用梯度洗脱,可在１６ｍｉｎ内将８种物质完全分离并可进行定量测定,线性关系良好。方法具有快速、简便、准确的特点。     

液相色谱-串联质谱分析盐胁迫下植物激素的含量变化

建立了高效液相色谱．离子阱串联质谱高灵敏、快速测定多种内源植物激素的新方法。在最佳条件下,吲哚乙酸（IAA）、脱落酸（ABA）和赤霉酸（GA3）在5min内实现完全分离,最低检测限为8．0ng．mL-1．借助串联质谱技术,解释了三种激素的结构碎裂过程．探讨了盐胁迫下,上述内源激素含量的变化趋势．研究表明,随着NaCl浓度增大,IAA和GA3含量降低,ABA含量明显升高．初步揭示了内源激素和植物抗盐性之间的相互关系．     

亚种间杂交稻内源激素的高效液相测定法

 建立了一种快速、提取率高的从植物中提取内源激素的样品处理方法 ,并研究了高效液相法测定亚种间杂交稻的 4种内源激素 :赤霉素 (GA3 )、3 吲哚乙酸 (IAA)、玉米素 (Z)和脱落酸 (ABA)的条件。采用WatersC18反相柱 (4 6mmi.d .× 2 5 0mm ,5 μm) ,SPD 6AV紫外检测器。以甲醇 水 乙酸 (体积比为 45∶5 4 2∶0 8)溶液为流动相 ,流速 1 0mL/min ;进样量 2 0 μL ;检测波长 2 5 4nm ;选用外标法进行定量测定。其回收率高 ,检出限分别为GA3 0 5mg/L ,IAA 0 1mg/L ,Z 0 3mg/L ,ABA 0 0 3mg/L。该法快速、灵敏、准确。     

高效液相色谱法测定烟火药剂中的没食子酸

建立了烟火药剂中没食子酸的高效液相色谱检测方法。采用ZorbaxEclipse XDB-C18色谱柱(4.6×150 mm)分离,以甲醇-0.1%冰乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min;测定温度为25℃;采用紫外检测器检测,检测波长为274 nm。没食子酸的质量浓度在0.5~20μg/mL时与色谱峰面积之间线性关系良好(相关系数r=0.9999);对烟火药剂样品进行3个不同浓度水平的添加回收,回收率为90.8%~100.2%,相对标准偏差(RSD)为1.2%~6.4%。     

离子对色谱法同时分离测定吡啶及咪唑离子液体阳离子

建立了用紫外检测的反相离子对色谱梯度淋洗同时分离测定4种吡啶离子液体阳离子和5种咪唑离子液体阳离子的方法。实验采用ZORBAX Eclipse XDB-C18反相色谱柱,以离子对试剂水溶液(用柠檬酸调节pH值)+乙腈为流动相,考察了离子对试剂种类和浓度、乙腈浓度和色谱柱温度对保留的影响,探讨了相关保留规律,确定最佳色谱条件为:流速1.0 mL/min、柱温30℃,以1.0 mmol/L庚烷磺酸钠水溶液(pH 4.0)-乙腈为淋洗液进行梯度洗脱。在此条件下,4种吡啶阳离子和5种咪唑阳离子在15 min内达到基线分离。检出限(S/N=3)为0.31～0.54 mg/L,峰面积的相对标准偏差为0.10%～0.75%。将该方法用于实验室合成的离子液体样品分析,加标回收率为94%～98%。该方法准确、可靠,具有较好的实用性。     

液相色谱-四极杆飞行时间质谱法快速测定草莓中6种植物生长调节剂的残留量

建立了高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(HPLC-Q TOF MS)快速检测草莓中2,4-滴、对氯苯氧乙酸、3-吲哚丁酸、氯吡脲、脱落酸、玉米素6种植物生长调节剂的分析方法。样品采用QuEChERS方法(Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe method)进行前处理(乙腈提取,C18吸附剂净化),采用Eclipse XDB-C8色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm),以乙腈-5 mmol/L乙酸铵-0.1%(v/v)甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,Q TOF MS电喷雾负离子模式分析检测。在全扫描采集模式下,以准分子离子峰的峰面积定量,以化合物的精确质量数定性。在Target MS/MS采集模式下,通过碎片离子的精确质量数进一步确证化合物。各化合物在0.005～1.0 mg/L范围内均呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.99。6种化合物的检出限为1～5 μg/kg,添加回收率为87%～107%,相对标准偏差(RSD)均小于10%(n=6)。本方法简便快捷,选择性好,灵敏度高,可满足国内外现行法规的限量要求。     

高效液相色谱法同时测定苏木中的巴西苏木素和原苏木素B

建立了同时测定苏木中巴西苏木素和原苏木素B的高效液相色谱检测方法。采用Agela Venusil XBP-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.2%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,测定温度为35℃,检测波长285 nm。巴西苏木素和原苏木素B的质量浓度均在0.005～1.0 mg/mL时与色谱峰面积之间线性关系良好,相关系数都为0.9999;回收率范围分别为96.7%～101.4%和99.4%～103.0%,相对标准偏差(RSD)为2.0%和1.3%。该法可以用于苏木药材的鉴定。