超高效液相色谱-串联质谱法定量分析尿液中色氨酸及其代谢产物

基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)建立定量分析色氨酸(Trp)及代谢产物3-OH-犬尿氨酸(3-OH-Kyn)、3-OH-邻氨基苯甲酸(3-OH-AA)、黄尿酸(XA)、犬尿氨酸(Kyn)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)、犬尿喹啉酸(KA)和5-羟色胺(5-HT)的方法,应用该方法分析其在尿样中的含量,探讨排泄规律。将尿样稀释、离心后,加入丹磺酰氯(DNS-Cl)衍生,经Thermo C₁₈色谱柱(50 mm×3 mm, 2.7 μm)分离和0.1%甲酸和甲醇梯度洗脱后,采用电喷雾电离(ESI)源,在正离子扫描和多反应监测(MRM)模式下检测。以咖啡酸(CA)为内标,定量分析。结果显示,8种目标化合物的线性关系良好,相关系数(R ²)≥0.9740,检测灵敏(LOD为0.005~0.5 ng/mL),回收率高(93.24%~107.65%)。采用本方法检测分析了健康志愿者70个尿液样本,在尿样中检测到Trp原型及其7种代谢产物。结果表明,体内的Trp是通过原型和代谢两种方式排泄:Trp原型的含量为5.22~20.88 μg/mL;尿液中经代谢后排泄的Trp量是原型的124%~268%,即体内的Trp主要经代谢后排出体外。方法主要研究了Trp-5-HT和Trp-Kyn两条途径的代谢产物含量,Trp经Kyn降解生成的3-OH-AA和3-OH-Kyn含量较多,即Trp-Kyn是体内Trp的主要代谢途径。方法通过UPLC-MS/MS实现了尿液中Trp及其代谢产物含量的检测,能为临床检查提供技术和理论支持。     

表面活性剂增敏催化动力学荧光法测定蔬菜中的色氨酸

在PH=4.8的HAc-NaAc缓冲溶液中,基于表面活性剂十六烷基三甲基溴化胺对色氨酸催化高碘酸钾氧化罗丹明B的褪色反应有较强的增敏作用,建立了测定色氨酸的表面活性剂增敏催化动力学荧光新方法.研究了反应的适宜条件及动力学参数.在优化实验条件下,色氨酸浓度在3.0-25.0 mg/L范围内与荧光强度呈良好线性关系,回归方...     

高效液相色谱法检测胃液中色氨酸和利多卡因

采用高效液相色谱-紫外-荧光和高效液相色谱-紫外-质谱联用法,证明胃癌患者胃液中存在的荧光物质主要为色氨酸.建立了反相高效液相色谱-双波长同时紫外检测法定量分析胃液中色氨酸和利多卡因的方法.使用Kromasil C18柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm),以含0.1%三氟乙酸的甲醇溶液与含0.1%三氟乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱分析.色氨酸使用278 nm检测,浓度在0.5～200 mg/L范围内峰面积对浓度的线性相关系数为0.9994;利多卡因使用254 nm检测,浓度在20～5000 mg/L范围内相关系数为0.9992.色氨酸和利多卡因的检出限分别为0.15和5 mg/L;平均加标回收率分别为70.8%～110.4%(色氨酸) 和87.1%～116.2% (利多卡因).利用本方法对38例胃癌患者和48例非胃癌患者的胃液进行测试,两组胃液中色氨酸的含量存在一定的差异.     

荧光探针法研究色氨酸二肽与DNA的相互作用

以溴化乙锭(EB)为荧光探针,对色氨酸二肽(Trp-Trp)与小牛胸腺DNA的作用机制进行了研究,考查了酸度、离子强度及磷酸根离子对Trp-rrp与DNA相互作用的影响;结果表明,在ph 7.2的模拟体液条件下,Tro-Trp可与DNA发生相互作用;向DNA-EB体系中加入Trp-Trp时荧光逐渐减弱,这说明Trp-Trp 能与DNA发生作用.通过ScatehaId方程进一步分析发现,Trp-Trp对DNA-EB的影响表现为混合模式:一方面,Trp-Trp能中和DNA上的磷氧负离子,导致DNA链收缩,从而影响DNA的构象,使嵌入的EB从DNA中部分游离出来,荧光减弱;另一方面,Trp-Trp与EB也存在静电位点竞争.     

盐酸吡哆辛在聚L-色氨酸修饰电极上的电化学行为及其分析测定

制备了聚L-色氨酸修饰玻碳电极(PTRP/GCE),用循环伏安法、线性单扫描伏安法、计时电量法等研究了盐酸吡哆辛(VB6)在PTRP/GCE上的电化学行为及电化学动力学性质, 实验表明：VB6在PTRP/GCE上的电极过程为1电子1质子的不可逆氧化反应,在20～400mV/s范围内,峰电流与扫速的平方根呈良好的线性关系,电极活化面积A为0.29cm2,扩散系数D为1.9612×10-4cm2/s。在pH=3的HAc-NaAc缓冲溶液中,VB6在PTRP/GCE电极上氧化峰电流与其浓度在1×10-4～5×10-6mol/L范围内呈良好的线性关系,线性回归方程为：ipa（μA） =7.7399+408.8129c (mmol/L),R=0.9931,检出限为1×10-6mol/L,VB6样品测定平均回收率为100.15%。     

L-色氨酸甲酯氢溴酸盐与醛的高立体选择性Pictet-Spengler反应合成手性1,3-二取代-1,2,3,4-四氢-β-咔啉

研究了L-色氨酸甲酯氢溴酸盐与醛的Pictet-Spengler反应,该反应经过一个晶体诱导过程,高立体选择性地合成了一系列1,3-二取代-1,2,3,4-四氢-β-咔啉化合物,其结构经~1H NMR,IR,MS和元素分析表征.     

Fluorescence-quenching of Tryptophan Ion-18-crown-6 Complex——A Different Observation from Its Neutral Counterpart

It is well-known that primary amines form inclusive complexes with crown ethers. This kind of noncova-lently inclusive complexes,exemplified tryptophan complex with 18-crown-6,was studied by combination of two experimental methods,fluorimetry and mass spectrometry,with theoretical calculation. Fluorescence intensity of tryptophan in the absence and the presence of 18-crown-6 in aqueous HAc-NaAc buffer solution at pH=3.73 has been studied by fluorometry. The fluorescence intensity decreases significantly wit...     

基于内滤效应的YVO4∶Eu荧光纳米探针测定色氨酸

采用溶剂热法合成了发光性能和水溶性良好的YVO4∶Eu纳米探针(YVO4∶Eu NPs).由于YVO4∶Eu NPs的激发光谱与色氨酸的吸收光谱有很大程度的重叠,二者可发生荧光内滤效应,其中色氨酸为吸光体、YVO4∶Eu NPs为荧光体,YVO4∶Eu NPs的发光被猝灭.基于此,建立了基于YVO4∶Eu NPs内滤效应测定色氨酸含量的方法.对YVO4∶Eu NPs的加入量、反应溶液pH值和反应时间进行了优化,在最佳反应条件下,本方法测定色氨酸的线性范围为4.0×10-6~4.0×10-4 mol/L,检出限为1.0 ×10-6 mol/L(3σ).采用本方法测定了酱油中色氨酸的含量,回收率为95.2%和97.3%.本方法具有简便快速、灵敏准确的特点.     

壳聚糖/多壁碳纳米管复合膜电化学手性识别色氨酸对映异构体

采用滴涂方式将羧酸化多壁碳纳米管(f-MWCNTs)修饰于玻碳电极(GCE)表面成膜,然后恒电位法在上述修饰电极表面电沉积壳聚糖(CS)膜,形成CS和f-MWCNTs复合膜修饰电极(CS/f-MWCNTs/GCE),并用于色氨酸(Trp)对映异构体的手性识别。采用扫描电子显微镜(SEM)表征了修饰电极表面形貌的差异,电化学阻抗(EIS)和循环伏安法(CV)研究修饰电极的电化学行为差异。差分脉冲伏安法(DPV)用于区别色氨酸(Trp)对映异构体,分离系数可达2.38。研究发现该修饰电极对L-Trp的DPV响应信号强于D-Trp,检测的线性范围为8.0×10~(-6)~4.0×10~(-3)mol/L,检出限(S/N=3)为5.0×10~(-6)mol/L。该方法简单、经济、快速,对发展其它手性化合物的检测方法提供了参考。     

碳纳米管复合微球修饰L-色氨酸及其对LDL的吸附性能

本文以多孔碳纳米管/活性炭复合微球为载体, 以L-色氨酸为配基, 采用环氧氯丙烷偶联法, 制得修饰L-色氨酸的碳纳米管/活性炭复合微球(L-CNTs/AC)。采用扫描电镜、氮气吸附、傅立叶红外光谱、热分析、X射线光电子能谱等对复合微球进行表征;通过体外静态吸附法对其低密度脂蛋白(LDL)吸附能力进行初步研究。结果表明:环氧氯丙烷偶联法可接枝上L-色氨酸。复合微球中碳纳米管加入量越多, 对LDL的吸附能力越强;当碳纳米管加入量为45wt%时, 对LDL的吸附量达4.623 mg·g^-1, 是未添加碳纳米管的2.3倍多。这是因为碳纳米管不仅可促进复合微球中20~100 nm孔的形成, 而且还可促进复合微球配基修饰量的增多, 从而大大增强了复合微球对LDL的吸附能力。此复合微球可望开发成一种新型的血液灌流LDL吸附剂。