紫外、氦氖激光等复合诱变产果胶酶细菌ZH1的研究

ZH₁菌株是从自然界分离筛选而来的,该菌株产果胶酶的最适pH为7.0;最适温度33℃;培养36h达产酶高峰,酶活力为73.5μ/mL,将ZH₁作为出发菌株,经紫外线诱变、硫酸二乙酯诱变,亚硝基胍和紫外线复合诱变及氦氖激光等多次反复诱变,选育得到一株产果胶酶性稳定且酶活明显提高的突变株ZHg,其酶活为301m/mL,比出发菌株ZH₁产果胶酶能力提高3.1倍.     

He-Ne激光对产ALDC地衣芽孢杆菌的诱变效应

采用He-Ne激光(波长632.8mm,功率9mW)对一株产α-乙酰乳酸脱羧酶为1.22IU/mL的地衣芽孢杆菌H-5,分别以10min、20min、30min、40min进行照射处理,结果表明,10min照射对H-5菌的芽孢萌发有激活作用,促进其生长速度;20min和30min照射对H-5菌株的产酶力有明显的影响,筛选出三株比出发菌株产酶力提高2倍以上,且对啤酒发酵中双乙酰降解作用明显的变异菌株,其中L-20’₆菌株经传代培养及酯酶同工酶分析,证明发生了稳定的遗传变异.40min照射对H-5的生长和产酶力有限制作用.     

重离子辐照结合α-纤维素适应性进化提高黑曲霉真菌纤维素酶活性研究

为获得可有效降解植物细胞壁中纤维素的高产纤维素酶菌株,将具有安全可靠、不产生毒素、生长速度快且发酵周期短等优势的黑曲霉作为出发菌株。利用重离子12C6+束流按照0 , 40 , 70 , 100 , 130 , 160, 190 Gy的辐照剂量对黑曲霉原始菌株进行辐照,经平板初筛后得到两株优良菌株;然后添加α-纤维素进行了8周自适应性进化,通过连续5代发酵该菌株生长性能稳定;将得到的每代菌株进行胞内蛋白分子量的对比,得到一株最优菌株CJH-JWSFZh-W122,将其摇瓶发酵测定纤维素酶活性,其产纤维素酶的滤纸酶活(FPA)到了223.5 U/mL,内切葡聚糖酶活(CMC)达到了440.8 U/mL,分别比原始菌株提高了6.07%和8.01%。突变株在连续5代发酵后仍保持了良好的发酵性能。对突变菌株CJH-JWSFZh-W122和原始菌株进行了RAPD分析和SDS-PAGE电泳分析,证实了该菌株存在基因突变。     

激光诱变选育果胶酶高产菌株

采用Ar＋、He－Ne、LD、YAP等激光辐照果胶酶产生菌，不同波长激光辐照均获高酶活菌株，其中从LD激光与He－Ne激光辐照组中选育出酶活达6×104单位／g的高产菌株（比对照组提高122％），并稳定地应用于生产．文中从黑曲霉抱子与DNA的吸收光谱以及电镜观察黑曲霉抱子的结果出发，对激光诱变机制进行了初步探讨．     

紫外激光等选育生淀粉糖化酶高产菌株及其应用

以紫外线、LiCl、5-氟尿嘧啶、HNO2为诱变剂,黑曲霉Sx为出发菌株,选育出生淀粉糖化酶酶活力提高12%的突变株黑曲霉S′x.制取黑曲霉S′x的原生质体,用He-Ne激光照射,经反复筛选得到突变株黑曲霉Sy,其酶活力较出发菌株提高51%,而酸性蛋白酶活力降低45%.并对其在农作物秸杆的应用进行了研究.     

紫外激光等选育生淀粉糖化酶高产菌株及其应用

以紫外线、LiCl、5氟尿嘧啶、HNO₂为诱变剂,黑曲霉Sx为出发菌株,选育出生淀粉糖化酶酶活力提高12%的突变株黑曲霉S’x制取黑曲霉S’x的原生质体,用HeNe激光照射,经反复筛选得到突变株黑曲霉Sy,其酶活力较出发菌株提高51%,而酸性蛋白酶活力降低45%并对其在农作物秸杆的应用进行了研究.     

激光诱变选育果胶酶高产菌株

采用Ar⁺、He-Ne、LD、YAP等激光辐照果胶酶产生菌,不同波长激光辐照均获高酶活菌株,其中从LD激光与He-Ne激光辐照组中选育出酶活达6×10⁴单位/g的高产菌株(比对照组提高122%),并稳定地应用于生产.文中从黑曲霉抱子与DNA的吸收光谱以及电镜观察黑曲霉抱子的结果出发,对激光诱变机制进行了初步探讨.     

He-Ne激光选育高木质素降解率的白腐真菌Lx

用He-Ne激光对一株木质素降解活性较高的白腐真菌L₁进行选育.将该菌的菌丝体和原生质体多次照射诱变,结果得出:在波长632.5nm,用功率为6mW和7mW照射该菌的菌丝体,选育出的菌株L₆和L₇木质素降解率可达38.1%和39.88%,比出发菌株L₁提高了33%和39%.用功率9mW的He-Ne激光辐照原生质体,照射20min时,原生质体致死率已达100%.在照射时间为10min时,选育出一株木质素降解率达43.03%的菌株L_x,比出发菌株L₁提高了50%.同工酶分析显示该菌株发生了稳定的遗传突变.     

阿佛曼链霉菌的~(12)C离子辐照效应及高产菌株选育

选用12C6+离子辐照诱变阿维菌素B1a产生菌ZJAV-A1,研究其诱变效应。实验结果表明,12C6+离子辐照剂量50Gy时致死率97%,正突变率最高可达到34.2%。通过12C6+离子诱变处理,结合平板培养基及斜面培养基的正突变菌株筛选,最终获得一株稳定性良好,阿维菌素B1a组分产量稳定在4460—4588μg/ml之间,较出发菌株提高11.1%—14.7%的突变株ZJAV-Y1-203。     

He-Ne激光诱变黑曲霉Sx的原生质体

对生淀粉糖化菌黑曲霉Sx用混和酶制取原生质体进行了探索.在GM培养基中加入一定量的Cu²⁺、Mn²⁺,原生质体产量较高;采用pH4～5的蜗牛酶、纤维素酶、溶菌酶的混合酶,最佳浓度比为:1.5:3.5:1.5(mg/mL).取在GM培养基中培养17～18h的菌丝,在32℃酶解3h,原生质体产量最高,达到2.4×10⁵个/mL;在加入β-巯基乙醇及二硫苏糖醇处理菌丝时,原生质体产量提高近3倍.在再生培养基中,加入终浓度为30mmol/LMgSO₄时,原生质体再生率由16.7%提高到25.6%.用He-Ne激光照射原生质体时,功率9mW照射30min时致死率为50%,随着时间的延长,原生质体存活率降低.采用波长632.5nm、功率9mW、光斑直径5mm的He-Ne激光多次照射诱变,筛选出一株酶活力最高菌株黑曲霉Sy,活力提高51%,经连续传代5次,酶活力稳定.     

He-Ne激光和紫外线对PHB产生菌的复合诱变效应

采用紫外线、He-Ne激光及紫外线与He-Ne激光复合作用的方法, 对本实验室的一株产PHB的细菌G-Q7进行诱变, 以提高其产量. 结果表明, 紫外线和He-Ne激光单独作用, 诱变效果不佳, 而二者的复合作用却能产生很好的效果. 用He-Ne激光辐照20 min再经紫外线照射150 s, 正变菌株的细胞量为11.5g/L, PHB含量为65%, 并具有良好的遗传稳定性. 对诱变前后菌株积累的PHB产物的外观、热性质和13C-NMR图谱进行分析, 结果表明该诱变使代谢途径中的某种酶发生了改变.     

He-Ne激光对增强UV-B辐射拟南芥抗氧化系统的损伤修复

以培养6周左右的拟南芥为材料,采用UV-B辐射（剂量1 KJ/m2/d）和He-Ne激光器（波长632.8 nm,输出功率5 mW·mm2,辐照时间60 s）对材料进行处理,分成CK（没有经过UV-B或激光辐照）组、B(UV-B辐射)组、BL（UV-B和激光复合处理）组和L（激光辐照）组4个不同处理组.结果表明:增强的UV-B辐射拟南芥幼苗导致MDA(Malondialdehyde)、超氧阴离子含量升高,GSH(Glutathione)含量降低,PAL(phenylalanine ammomia-lyase)、CAT(catalase)和APX(ascorbate peroxidase)活性升高,SOD(supemxide dismutas)活性降低.单独He-Ne激光处理使MDA、超氧阴离子含量降低,GSH的含量升高,SOD、APX、CAT的活性升高,PAL的活性降低.UV-B辐射后再用He-Ne激光进行后处理,发现与单独UV-B辐照处理相比,MDA、超氧阴离子含量降低,GSH含量升高,SOD、APX、CAT的活性升高了,PAL的活性降低了.因此激光在一定程度上提高了拟南芥叶片抗氧化能力,在此基础上讨论了其可能的形成机理.     

He-Ne激光对钝顶螺旋藻的诱变效应

利用He-Ne激光(波长632 nm，功率10 mW)诱变钝顶螺旋藻IS（Spirulina platensis IS），经过一定时间的辐照，选取生长较快的藻种测量其β-胡萝卜素、蛋白质及多糖含量，进一步筛选出生长快、高产胡萝卜素或高产蛋白质的藻种.实验结果表明：与出发藻种IS相比，经He-Ne激光15min和25 min照射后的藻种MS-1、MS-2和 MS-3，藻丝形态发生变化，藻丝变短、螺旋变紧密，生长速度明显加快，其中 MS-1的β-胡萝卜素含量增幅为18.1%，MS-3的蛋白质和多糖含量均有较大增加.此外通过对出发藻种和诱变藻种的叶绿素a和胡萝卜素的紫外吸收光谱进行比较，发现诱变藻种与出发藻种相比最大吸收峰值略有变化，从而说明He-Ne激光对于钝顶螺旋藻的诱变效应.     

He-Ne激光对γ-亚麻酸产生菌少根根霉的诱变作用

采用He-Ne激光和化学诱变剂LiCl对少根根霉孢子和原生质体进行复合诱变,从一株产GLA的出发菌株少根根霉R8#中选育出高产菌株RC378.摇瓶培养含油脂量47.8%,GLA含量12.6%,比出发菌株油脂含量提高了130.8%,GLA含量提高了276.7%.从菌落形态、同工酶酶谱、红外光谱吸收特征和油脂产量及组成比较分析表明:该菌株较出发菌株具有显著的变异.菌株RC378经传代培养,产脂量维持在41.1%～48.7%,GLA含量维持在10.8～12.6%.该菌株具有较好的遗传稳定性.     

Lamb-dip spectroscopy of some lower carbon-hydrogen compounds

The results of the investigations of some carbon-hydrogen compounds are represented, which were carried out on the basis of Lamb-dip spectroscopy utilizing a magnetically tunable He-Ne laser at the wavelength 3.39 μm.