固相萃取/液相色谱-质谱/质谱法测定山银花中5种主要黄酮苷元的含量

该文通过含有盐酸的乙醇溶液回流水解并提取,HLB固相萃取柱净化,液相色谱-质谱/质谱法检测,建立了山银花中槲皮素、木犀草素、山萘酚、芹菜素和黄芩素5种黄酮苷元含量的测定方法。实验以芦丁、木犀草苷、紫云英苷、野漆树苷和黄芩苷5种黄酮苷为代表开展研究,山银花样品经50%的乙醇溶液(含10%浓盐酸)回流2 h水解黄酮苷,同时对黄酮苷元进行提取,HLB固相萃取柱净化,采用Mightysil RP-18色谱柱分离,液相色谱-质谱/质谱法检测(电喷雾离子源、多反应监测模式、负离子扫描),外标法定量测定水解后的5种黄酮苷元含量。方法的定量下限(S/N=10)为0.005 g/kg(槲皮素),0.01 g/kg(木犀草素和芹菜素)和0.05 g/kg(山萘酚和黄芩素)。在0~1.0 g/kg范围内,5种黄酮苷元的线性相关系数均大于0.995;在山银花样品中对待测物进行3种加标水平的回收实验(加标水平相当于水解后槲皮素和木犀草素含量为:0.10、0.20、0.40 g/kg,山萘酚、芹菜素和黄芩素含量为:0.05、0.10、0.20 g/kg),方法的平均回收率70.4%~104%;相对标准偏差为4.0%~12%。该方法实现了山银花中多种主要黄酮苷元含量的同时测定,且对研究山银花药效及与黄酮类化合物的关系具有重要意义。     

RP-HPLC/二极管阵列检测器同时测定飞机草中3种黄酮

应用高效液相色谱法/二极管阵列检测器同时测定了飞机草中木犀草素、槲皮素和山柰酚的含量。色谱柱HiQ sil C18W柱(4.6 mm×25 cm,5μm),流动相V(甲醇)∶V(水)∶V(磷酸)=50∶49.8∶0.2,检测波长槲皮素254 nm,木犀草素和山柰酚360 nm,温度30℃,流速1 mL/min,进样量10μL。确定了以超声波提取法制备飞机草分析样品的方法:溶剂为体积分数85%的乙醇,液固比为10∶1(mL/g),提取时间为1 h。结果表明,3种黄酮在0.01×10-3~0.10×10-3g/mL范围内呈现良好线性关系(R2>0.999 0),平均加样回收率分别为99.601 7%、99.032 6%和99.450 8%,RSD<2%。该方法操作简便、准确度高,可快速测定飞机草中木犀草素、槲皮素和山柰酚3种物质的含量。     

HPLC法同时测定24种花中的5种活性成分含量

建立了高效液相色谱法(HPLC)同时测定24种花中绿原酸、金丝桃苷、槲皮素、木犀草素和异鼠李素含量的方法。采用C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%冰乙酸溶液梯度洗脱,检测波长350 nm,柱温35℃,流速0.8 mL/min。绿原酸、金丝桃苷、槲皮素、木犀草素和异鼠李素分别在0.0208~104.00μg/mL(r=0.99993),0.017~85.00μg/mL(r=0.99998),0.0172~86.00μg/mL(r=0.99997),0.0304~152.00μg/mL(r=0.99997),0.0168~84.00μg/mL(r=0.99986)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加标回收率(n=9)92.26%~99.09%,仪器精密度(n=6)RSD均小于3.1%,方法重复性(n=6)的RSD均小于3.6%。方法可同时测定这24种花中绿原酸和黄酮类物质的含量,可作为花中活性成分定量分析的方法。     

KMnO_4-甲醛流动注射化学发光法测定木犀草素

在酸性介质中,木犀草素在KMnO4-HCHO体系中产生化学发光,据此建立了一种简便、快速测定木犀草素的化学发光新方法。化学发光强度与木犀草素的浓度在5.0×10-8~1.5×10-5g/mL范围内呈现出良好的线性关系。其检测限(3σ)为3.0×10-8g/mL,对8.0×10-7g/mL的木犀草素溶液进行11次平行测定,相对标准偏差为2.8%。方法可应用于实际样品和合成样品中木犀草素的测定。并探讨了反应的机理。     

高效液相色谱法同时测定不同产地及不同药用部位景天三七中4种黄酮类成分的含量北大核心CSCD

建立了同时测定不同产地及不同药用部位景天三七中槲皮素、木犀草素、山奈酚和异鼠李素含量的高效液相色谱(HPLC)法。采用TOP ODS-AQ色谱柱(250×4.6mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,检测波长为365nm。结果表明,槲皮素、木犀草素、山奈酚和异鼠李素的浓度分别在1.90~189.90μg·mL-1(r=0.99996),1.12~112.00μg·mL-1(r=0.99998),3.71~370.56μg·mL-1(r=0.99995)和0.98~97.60μg·mL-1(r=0.99996)范围内与其色谱峰面积呈良好线性关系;平均加标回收率分别为99.79%、100.06%、100.19%和100.00%,且不同产地及不同药用部位的4个黄酮类成分在数量上或质量上有明显差异。该方法快速、准确,重现性好,可用于同时测定景天三七中槲皮素、木犀草素、山奈酚和异鼠李素含量。     

毛细管电泳法测定密蒙花中的橙皮素、木犀草素和芹菜素

建立了毛细管电泳法分析密蒙花中橙皮素、木犀草素和芹菜素的方法,研究了缓冲溶液pH和浓度、工作电压和进样时间以及β CD的影响。在优化的条件下,3种物质在15min内得到良好分离。橙皮素、木犀草素和芹菜素的质量浓度分别在0.01～0.50mg mL、0.02～0.70mg mL、0.04～0.80mg mL范围内与峰高成良好线性,线性相关系数分别为0.9992、0.9994和0.9984。3种物质基于迁移时间和峰高的相对标准偏差分别为1 3%、2 2%、2 6%和4 2%、3 7%、4 6%。检出限分别为3 5、4 5和5 0μg mL。     

反相高效液相色谱法测定罗布麻叶中槲皮素和山萘酚

采用反相高效液相色谱法(RP-HQLC)测定了罗布麻叶中槲皮素和山萘酚。色谱柱为Nova-pak C18(15cm×4.6mm i.d.),流动相为A.甲醇、B.1%乙酸,流速为0.6mL/min,检测波长为360nm。槲皮素在0.0137~0.136μg、山萘酚在0.0053~0.0265μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9998和0.9980。槲皮素的回收率为99.6%,RSD为0.97%;山萘酚的回收率为98.2%,RSD为2.0%。方法可用于罗布麻叶中槲皮素和山萘酚的测定。     

毛细管电泳紫外检测法测定莲须中的槲皮素、木犀草素、山萘酚、异槲皮甙

采用毛细管区带电泳紫外检测法(CZE-UV)同时测定中药莲须中槲皮素、木犀草素、山萘酚、异槲皮甙4种有效成分.研究了缓冲溶液的离子浓度、pH值和电压对分离度和迁移时间的影响,得到了最佳分离实验条件.在离子浓度为40 mmol/L Na2B4O7缓冲溶液(pH 9.0)中,分离电压为16 kV,波长为254 nm时,槲皮素、木犀草素、山萘酚、异槲皮甙4种物质在10 min内得到了良好的分离测定,其检出限分别为5.0、6.7、4.5和6.0 mg/L.本方法应用于实际样品的测定,结果令人满意.     

电化学传感分析复方金银花药剂中木犀草素含量

采用循环伏安法制备了聚多巴胺修饰电极，并在NaOH溶液中进行电化学活化，得到木犀草素电化学传感器。通过循环伏安法探讨了木犀草素在传感界面的电化学反应机理。结果显示，活化后的多巴胺修饰电极对木犀草素具有显著的电催化作用，氧化峰电流较裸电极增强了91.7%。在最佳条件下，通过微分脉冲伏安法，建立了木犀草素氧化峰电流与浓度的标准工作曲线，线性范围为0.10～200.00μmol/L，检出限为31.65 nmol/L。将该传感器应用于市售金银花颗粒样品和金银花露样品中木犀草素测定，根据反向延伸法，计算得样品中木犀草素含量分别为297μg/g和2.15μg/mL；标准加入法回收率分别为98.5%～115.0%和93.6%～111.5%。     

芹菜素电化学探针与核酸作用机理的研究

通过电化学法研究了fsDNA影响下芹菜素(API)在金电极上的电极行为,优化确定了fsDNA的检测条件。结果表明,在4.0×10-7~7.0×10-6g/mL浓度范围内峰电流的增强与加入的fsDNA的浓度呈线性关系,线性方程为ΔIp/(μA)=3.20CfsDNA(10-5g/mL)+1.06,检测限为5.8×10-8g/mL,对模拟样品的测定结果令人满意;研究还表明芹菜素发生了3e传递行为,并有质子参与,且该行为受到扩散控制。通过循环伏安、紫外-可见光谱等方法对API与fsDNA间的作用机制进行了初步探讨,结果表明两者之间存在着静电作用,结合常数K=1.8×104L/mol。     

高效液相色谱法测定野生和人工种植库鲁木提草中柚皮苷和木犀草素的含量

本文建立了新疆库鲁木提草中柚皮苷和木犀草素两种活性成分的高效液相色谱同时测定方法,并实现了野生及人工栽培库鲁木提草中柚皮苷和木犀草素的检测。采用Agilent HC-C_(18)色谱柱(250×4.6mm,5μm)分离,以甲醇-0.2%HAc水溶液作为流动相,在柱温为室温和流速1.00mL/min条件下进行梯度洗脱,实现了两种活性成分之间以及它们与干扰组分的良好分离。柚皮苷和木犀草素的线性范围分别为120~1 440mg/L(r=0.9998)和17.5~210mg/L(r=0.9999),加标回收率分别为93.8%~100.2%(RSD=1.8%~2.7%,n=3)和98.3%~100.6%(RSD=1.3%~2.9%,n=3)。研究结果表明野生库鲁木提草中柚皮苷和木犀草素的含量更高。     

高效液相色谱法测定北柴胡地下部分黄酮类化合物的含量

建立了高效液相色谱法测定北柴胡地下部分黄酮类化合物含量的方法。采用SepaxGP-C18色谱柱(250×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸(体积比35∶65),检测波长360 nm,柱温30℃,流速1.0 mL/min。结果表明,北柴胡地下部分含有槲皮素。芦丁、木犀草素、槲皮素、山奈酚、芹菜素分别在0.0050～0.0248、0.0050～0.0248、0.0051～0.0256、0.0046～0.0232、0.0054～0.0272 mg/mL范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9957、0.9995、0.9998、0.9998、0.9998,槲皮素的平均回收率为98.34%,相对标准偏差(RSD)为0.76%。该法简便,快速,准确,重复性好,可作为北柴胡药材质量控制的方法。     

毛细管区带电泳法测定芹菜素木犀草素和异槲皮甙

建立了毛细管区带电泳法(CZE)分析测定芹菜素、木犀草素和异槲皮甙的方法。研究了缓冲溶液的浓度、pH、分离电压等对分离的影响。在优化条件下,三种被测物质可以在11min内实现良好的分离。芹菜素、木犀草素和异槲皮甙的峰面积与浓度分别在0.001250~0.8000,0.002500~0.1000和0.002500~0.1000g.L-1浓度范围内呈良好的线性,线性相关系数分别为0.9995,0.9995和0.9981。检出限(S/N=3)分别为0.00042,0.0005和0.00082g.L-1。并对银菊珍珠胶囊中的芹菜素、木犀草素和异槲皮甙进行了测定,结果满意。     

木犀草素在玻碳电极上的直接电化学行为及其测定

应用循环伏安法研究木犀草素于玻碳电极的电化学行为.在磷酸盐缓冲液中(pH 4.0),-0.2~+0.8V电位区间内,木犀草素于玻碳电极表面发生的电极反应是吸附控制的准可逆2电子转移过程,电子转移系数α=0.66;建立了检测木犀草素含量的差示脉冲伏安法(DPV).在富集电位+0.4 V下,经富集240 s后,测得木犀草素氧化峰电流Ip与其浓度在1.0×10-8~1.0×10-6mol.L-1范围内呈良好的线性关系,最低检出限为5.0×10-9mol.L-1.本法操作简单、快速、灵敏、准确,可为木犀草素药物质量的控制和检测提供一种简便的新方法.     

羟丙基-β-环糊精毛细管胶束电动色谱法测定密蒙花中的芹菜素和木犀草素

通过优化缓冲溶液pH和浓度、SDS浓度和β-CD等条件,建立了一种HP-β-CD毛细管胶束电动色谱法测定密蒙花中的芹菜素和木犀草素的方法。在优化的条件下,2种物质在15min内得到良好分离。木犀草素和芹菜素的峰高和浓度在0．01—0．60g/L范围内成良好线性。2种物质基于迁移时间和峰高的相对标准偏差分别为1．2％、1．9％和2．5％、2．8％。检出限分别为0．005和0．0045g／L。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定银杏保健茶中的16种黄酮类功效成分

建立了银杏保健茶中16种黄酮类物质的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法。16种黄酮成分分别为儿茶素、牡荆素、葛根素、大豆苷元、水飞蓟宾、槲皮素、木犀草素、芹菜素、柚皮素、橙皮素二氢查尔酮、山柰酚、橙皮素、异鼠李素、黄芩素、川陈皮素、桔皮素。实验优化了液相色谱条件和质谱参数。采用C₁₈柱分离,流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸)梯度洗脱,流速0.25 mL/min,以电喷雾离子源正离子多反应监测(MRM)模式进行MS/MS检测。16种黄酮类物质在各自的线性范围内具有良好的线性关系,相关系数大于0.996,低、中、高3个添加水平的平均回收率在70.9%~100.0%之间,相对标准偏差小于10%。通过检测发现实际样品中9种黄酮物质含量较高,分别是:山柰酚、槲皮素、橙皮素、牡荆素、木犀草素、儿茶素、芹菜素、柚皮素、异鼠李素,占总量的99.6%,此9种物质可作为银杏保健茶的质量控制指标。本法简便、快速、准确可靠,可用于控制银杏保健茶的质量。     

碳纳米管修饰碳纤维超微圆柱电极的研制与应用

制作了碳纳米管修饰碳纤维组合电极(EUME-CNT),研究了木犀草素在EUME-CNT上的电化学行为,并且通过优化测定参数,建立了木犀草素的电化学分析方法。检出限达到4×10-7mol/L,线性范围为6×10-7~1×10-5mol/L。     

β-环糊精修饰区带毛细管电泳法测定野菊花中刺槐素、木犀草素和槲皮素

通过研究缓冲溶液pH和浓度、工作电压、SDS浓度和-βCD浓度等条件,建立了β-环糊精修饰区带毛细管电泳法测定野菊花中刺槐素、木犀草素和槲皮素的方法。在优化的条件下,3种物质在8min内得到良好分离。刺槐素、木犀草素和槲皮素峰面积和质量浓度分别在2~400,2~500和2~500mg.L-1范围内呈良好线性,检出限分别为0.6,0.5和0.6mg.L-1。该方法被用于分析实际样品并得到满意的结果。     

木犀草素的电化学性质及在其测定中的应用

对木犀草素在单纯水溶液介质中的电化学行为作了研究。结果表明:在pH4.0的B-R缓冲溶液作底液的条件下,得到峰形对称的木犀草素的可逆氧化还原峰。循环伏安法(CV)试验结果表明:其在玻碳电极表面的电极反应受吸附所控制。用积分脉冲伏安法(DPV)研究了氧化峰电流(ipa)与木犀草素浓度(cLu)之间的关系,结果表明:木犀草素浓度在8.0×10-8～8.0×10-6mol.L-1之间呈线性关系,检出限(3S/N)为7.14×10-8mol.L-1,回收率在98.5%～104.0%之间。用线性扫描伏安当(LSV)试验表明:当cLu为4.14×10-5mol.L-1时,ipa达到最大值。据此按公式Q=nFAΓT可算出饱和吸附量ΓT为6.21×10-10mol.cm-2。根据Laviron原理和Langmuir吸附等温式可算出如下电极过程热力学参数,参与氧化还原过程的电子数n=2,电极反应质子数=2,转移系数a=0.90,表现电子传递速率常数ks=2.96s-1,对电极反应的机理也作了简要讨论。     

金银花不同部位中绿原酸和木犀草苷含量的测定

利用HPLC法测定金银花不同部位中绿原酸和木犀草苷。采用ODS-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(0.03 mol/L磷酸)为流动相进行梯度洗脱,流速:1.0 mL/min,检测波长:350 nm,柱温:室温。绿原酸浓度在0~0.4 mg/mL内与峰面积呈良好线性关系(r2=0.999 6),回收率为101.9%~105.2%,相对标准偏差为3.18%(n=6)。木犀草苷浓度在0~0.1 mg/mL内与峰面积呈良好线性关系(r2=0.999 1),平均回收率为100.5%~104.0%,相对标准偏差为3.42%(n=6)。结果表明:金银花、芽等部位绿原酸和木犀草苷的含量较高。