反相高效液相色谱法分离测定烟草中的多酚类化合物

对植物中9种多酚类化合物的色谱分离条件进行了优化,分别探讨了流动相组成、流动相中醋酸浓度、醋酸溶液与甲醇的比例对保留时间的影响,确定了梯度分离条件,并对9种天然多酚类化合物进行了定量分析。该方法的检测限为13.26~59.29 mg/kg (S/N=3)。在3.0～100.0 mg/L 范围内呈良好的线性关系,相关系数r2为 0.9979~0.9999。9种待测化合物的加标回收率为96.8%~108%,相对标准偏差(RSD)小于3.8% (n=3)。用80%甲醇超声提取烟草样品,并通过优化的色谱条件对其进行分析,测定了实际烟草样品中芸香苷和绿原酸的含量。结果表明,该方法具有一定的实用价值。     

枸杞润肤霜中两种酚酸类成分的高效液相色谱检测及质谱确证

建立了自制枸杞润肤霜中绿原酸和咖啡酸的高效液相色谱分析及液相色谱-串联质谱确证方法。枸杞润肤霜样品经甲醇超声提取,提取液离心处理后,取上清液经微孔滤膜过滤后测定。采用Aglient HC-C18色谱柱(250×4.6mm,5μm)分离,以甲醇-0.5%乙酸水溶液(27∶73,V/V)为流动相,等度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长327nm。绿原酸、咖啡酸分别在3.3~250μg/mL、3~225μg/mL间线性关系良好(r=0.9993);平均加标回收率分别为98.28%、99.26%,相对标准偏差(RSD)均为1.93%。自制枸杞润肤霜中绿原酸、咖啡酸含量分别为0.0398 mg/g、0.0323mg/g。该方法快速、准确,适用于同时测定枸杞润肤霜中绿原酸、咖啡酸的含量。     

金银花不同部位中绿原酸和木犀草苷含量的测定

利用HPLC法测定金银花不同部位中绿原酸和木犀草苷。采用ODS-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(0.03 mol/L磷酸)为流动相进行梯度洗脱,流速:1.0 mL/min,检测波长:350 nm,柱温:室温。绿原酸浓度在0~0.4 mg/mL内与峰面积呈良好线性关系(r2=0.999 6),回收率为101.9%~105.2%,相对标准偏差为3.18%(n=6)。木犀草苷浓度在0~0.1 mg/mL内与峰面积呈良好线性关系(r2=0.999 1),平均回收率为100.5%~104.0%,相对标准偏差为3.42%(n=6)。结果表明:金银花、芽等部位绿原酸和木犀草苷的含量较高。     

HPLC法同时测定油橄榄叶中的5种多酚类化合物含量

建立了HPLC法同时测定油橄榄叶抗糖尿病有效部位中的5种多酚类化合物含量。优选的色谱条件为:色谱柱:Sinochrom ODS-BP柱(250×4.6 mm,5μm);DAD检测器;检测波长:230 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL;流动相:水(A)+甲醇(B),梯度洗脱:0~5 min,30%B;5~20 min,30%B~52%B;20~25 min,52%B~50%B。在优选的色谱条件下,5种多酚类化合物能够得到较好的分离。日内RSD为1.4%~2.6%,日间RSD为0.8%~2.8%,回收率为97.1%~113.2%。方法可用于测定油橄榄叶及其抗糖尿病有效部位中的5种多酚类化合物的含量。     

HPLC法同时测定24种花中的5种活性成分含量

建立了高效液相色谱法(HPLC)同时测定24种花中绿原酸、金丝桃苷、槲皮素、木犀草素和异鼠李素含量的方法。采用C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%冰乙酸溶液梯度洗脱,检测波长350 nm,柱温35℃,流速0.8 mL/min。绿原酸、金丝桃苷、槲皮素、木犀草素和异鼠李素分别在0.0208~104.00μg/mL(r=0.99993),0.017~85.00μg/mL(r=0.99998),0.0172~86.00μg/mL(r=0.99997),0.0304~152.00μg/mL(r=0.99997),0.0168~84.00μg/mL(r=0.99986)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加标回收率(n=9)92.26%~99.09%,仪器精密度(n=6)RSD均小于3.1%,方法重复性(n=6)的RSD均小于3.6%。方法可同时测定这24种花中绿原酸和黄酮类物质的含量,可作为花中活性成分定量分析的方法。     

高效液相色谱-二极管阵列检测同时测定烟草中多酚类

用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)建立了烟草中绿原酸、莨菪亭、芸香苷同时测定的方法。烟草样品用甲醇/水(4∶1,V/V)超声萃取,过滤,上样。用Hypersil ODS(4.6 mm(i.d.)×150 mm,3μm)色谱柱,甲醇/TFA水溶液梯度洗脱,PDA光谱图辅助定性,内标法定量。该方法预处理简单,重现性好,回收率84.4%~96.4%;相对标准偏差为1.4%~6.4%。     

固相萃取-高效液相色谱法测定大鼠尿样中调环酸钙

建立了大鼠尿样中调环酸钙的高效液相色谱(HPLC)测定方法。样品经Waters OasisMAX 3cc固相萃取小柱净化,Poroshell 120EC-C18色谱柱(100×4.6 mm,2.7μm)分离,甲醇-0.01%甲酸水溶液梯度洗脱,流速为0.4mL/min,检测波长275nm。研究结果表明,尿样中调环酸钙的质量浓度在0.20~5.00μg/mL范围内线性关系良好(R2=0.999),检出限为0.06μg/mL,定量限为0.19μg/mL,回收率在96.41%~104.94%之间。日内相对标准偏差(RSD)为2.14%~3.89%,日间RSD为5.01%~7.58%。该方法前处理简单可行,适合尿样中调环酸钙的测定。     

气相色谱-质谱联用法同时测定烟草中的1-丙醇、二甘醇、三甘醇、丙二醇与丙三醇

将烟草样品粉碎至40目,以1,4-丁二醇为内标,甲醇为萃取溶剂,超声萃取60 min后,以气相色谱-质谱/选择离子监测(GC-MS/SIM)法测定1-丙醇、二甘醇、三甘醇、丙二醇和丙三醇的含量。结果表明:目标化合物在1~100μg/mL范围内线性关系良好,方法的检出限为0.05~0.48μg/mL,回收率为90.2%~103.7%,相对标准偏差(RSDs)为0.9%~3.0%。方法的前处理简单、灵敏度高、定性定量准确,适用于烟草中多元醇的定性定量分析。     

高效液相色谱法测定2种中药片剂中紫丁香苷的含量

建立了测定2种中药制剂灭澳灵片和活络消痛片中紫丁香苷含量的高效液相色谱方法.采用KromasilC18反相色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm),以乙腈-1%冰醋酸溶液(体积比10∶90)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长265 nm,在15 min内完成分离检测.紫丁香苷在0.16~100μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),最低检出限0.1μg/mL(S/N=3).灭澳灵片的加样回收率为92.2%~97.6%,活络消痛片的加样回收率为94.0%~102.6%.     

高效毛细管电泳法同时检测苹果中4种多酚类化合物

利用高效毛细管电泳法(HPCE),对苹果中根皮苷,表儿茶素,芦丁,绿原酸4种多酚类化合物进行分离与测定。在最佳实验条件:缓冲溶液为10 mmol/L Na_2B_4O_7-H_3BO_3,pH 9.2,检测波长280 nm,分离电压25 kV,测定了4种多酚类化合物的标准品,其线性范围分别为0.005~0.120,0.005~0.550,0.004~0.450,0.020~0.600 mg/mL,相关系数r在0.9977~0.9992之间,检出限分别为34.1,56.7,37.8,38.9μg/L(S/N=3)。日内及日间精密度和平均回收率范围分别为0.13%~4.5%和为96.7%~104.5%,相对标准偏差(RSD)≤3.7%(n=3)。方法可用于苹果中多种酚类物质的同时检测。     

自动石墨消解–电感耦合等离子体质谱法同时测定左氧氟沙星胶囊中7种金属元素

建立自动石墨消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)同时测定左氧氟沙星胶囊中铅、铬、砷、镉、锡、铝、铁7种金属元素含量的方法。以HNO3-H2O2()体积比为1∶1为消解体系,采用自动石墨消解法消解左氧氟沙星胶囊样品,消解液除酸后,用5%硝酸溶液定容至50 mL,采用电感耦合等离子体质谱法对消解液进行测定,以内标法定量。铅、铬、砷、镉、锡、铝、铁的质量浓度在0.05~20.0μg/mL范围内与质谱响应值成良好的线性关系,相关系数均大于0.998,方法检出限为0.119~1.323μg/kg。样品加标回收率为91.2%~105.5%,测定结果的相对标准偏差为1.67%~3.46%(n=6)。该方法样品前处理简单,检出限低,测定结果准确,适用于左氧氟沙星胶囊等沙星类抗生素中多种金属元素残留的测定。     

Study on the determination of polyphenols in tobacco by HPLC coupled with ESI-MS after solid-phase extraction

A high-performance liquid chromatography method coupled with electrospray ionization-mass spectrometry for the determination of polyphenols in tobacco is studied. The polyphenols are extracted from a tobacco sample by being refluxed in a boiling water bath with 80% methanol and purified by solid-phase extraction with a C18 cartridge. The chlorogenic acid, rutin, scopoletin, caffeic acid, scopolin, and other polyphenols are satisfactorily separated on a Nova-Pak C18 chromatographic column (3.9 x 150 mm) with methanol and 0.05 mol/L potassium dihydrogen phosphate buffer solution gradient elution as mobile phase at a flow rate of 0.5 mL/min. Each of the polyphenols is monitored by photodiode array detector at its maximum wavelength: chlorogenic acid, 326.1 nm; rutin, 354.8 nm; scopoletin, 344.0 nm; caffeic acid, 323.7 nm; and scopolin, 365.2 nm. The limits of detection are: 100 ng/mL for chlorogenic acid, 125 ng/mL for rutin, 60 ng/mL for scopoletin, 50 ng/mL for caffeic acid, and 100 ng/mL for scopolin. The key polyphenols in tobacco are identified by comparing the retention time, the UV-spectrum, and the mass spectra with those of the standards. The recovery of tobacco polyphenols is 94-105%, and the relative standard deviations are 1.28-1.49%. This method is successfully applied to qualitatively and quantitatively analyze the polyphenols in tobacco with good results.     

反相高效液相色谱法快速检测大豆素火腿中5种防腐剂

建立一种快速检测大豆素火腿中的苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、羟苯甲酯、羟苯乙酯5种防腐剂含量的反相高效液相色谱法。大豆素火腿样品用水-甲醇(2∶1)超声振荡提取,提取液沉淀蛋白后,用0.45μm滤膜过滤,以Angilent Zorbax SB-C18色谱柱分离,梯度洗脱,用二极管阵列检测器检测。5种防腐剂得到良好的分离,质量浓度在0.1~5.0μg/mL范围内与色谱峰面积线性相关,相关系数(r2)均大于0.995,加标回收率为80.8%~115.2%,方法检出限为0.03~0.17μg/mL,定量限为0.10~0.54μg/mL,重复性相对标准偏差为1.35%~3.78%(n=6)。该方法样品处理简单,准确度高,重复性好,检出限低,适用于大豆素火腿中防腐剂含量的监测。     

双丙酮-D-甘露糖醇—硼酸络合酸手性毛细管电泳法分离盐酸莱克多巴胺立体异构体

采用手性多羟基化合物—硼酸络合酸为手性选择剂,建立了分离盐酸莱克多巴胺4个立体异构体的手性毛细管电泳(NACE)方法。实验考察了手性选择剂的种类、浓度和三乙胺浓度对手性分离效果的影响。结果表明,双丙酮-D-甘露糖醇—硼酸络合酸手性选择剂的分离效果最好,优化的缓冲溶液组成为含100 mmol/L双丙酮-D-甘露糖醇、100 mmol/L硼酸和72 mmol/L三乙胺的甲醇溶液。在优化的实验条件下,盐酸莱克多巴胺的4个立体异构体均可以达到基线分离,质量浓度在6.2~200.0μg/mL范围内与峰面积分别呈现良好的线性关系,检测限和定量限分别为0.6μg/mL和2.0μg/mL,加标回收率为97.5%~102.5%,饲料中的提取回收率为66.4%~72.5%。方法可用于盐酸莱克多巴胺4个立体异构体的手性分离和含量测定。     

高效液相色谱法测定洗手液中水杨酸和对氯间二甲苯酚

建立高效液相色谱仪同时测定洗手液中水杨酸和对氯间二甲苯酚含量的方法。采用Shim-pack Scepter C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇–0.1%磷酸水溶液(体积比为70∶30),流量为1.0 mL/min,柱温为室温,检测器为岛津SPD–M20A二极管阵列检测器,检测波长为280 nm。水杨酸和对氯间二甲苯酚与色谱峰面积呈良好的线性关系,线性范围分别为40~400 μg/mL,20~200 μg/mL,相关系数均为r^2=0.999 9。方法的检出限为0.1 μg/mL,水杨酸和对氯间二甲苯酚测定结果的相对标准偏差分别为0.79%,1.39%(n=5),加标回收率为96.9%~99.8%。该方法方法简便、快速、灵敏度高、重现性好,能同时准确检测洗手液中水杨酸和对氯间二甲苯酚的含量。     

固相萃取-高效液相色谱法同时测定牛奶中22种磺胺类兽药残留

建立了一种基于固相萃取技术同时测定牛奶中22种磺胺类兽药残留的高效液相色谱分析方法.样品经乙腈-甲酸混合溶液提取,乙腈饱和的正己烷除酯后,HLB固相萃取柱净化,以甲醇-2 mmol/L乙酸铵(含0.2％乙酸)为流动相进行梯度洗脱,XBridge C18色谱柱进行分离,采用光电二极管阵列检测器检测,外标法定量.磺胺类化合...     

固相萃取-高效液相色谱法测定烟草样品中主要的植物多酚

 建立了先用体积分数为 80 %的甲醇水溶液回流提取烟草样品中的植物多酚 ,再采用Sep Pak C18固相微萃取小柱预分离脱脂的前处理方法 ,并选择了合适的分析烟草样品中植物多酚的高效液相色谱条件。采用C18柱 ,甲醇 磷酸二氢钾缓冲液为流动相进行梯度洗脱 ,烟草中主要的植物多酚均达到基线分离。提取各组分在其最大波长下的色谱图 ,根据其峰面积定量 ,并用紫外光谱图对烟草中主要的植物多酚进行辅助定性。在该方法中 ,多酚的标准回收率为 94%～ 10 5 %,RSD为 1 2 8%～ 1 49%。该方法可用于烟草样品中的植物多酚的测定。     

高效液相色谱法同时测定烟用甘草提取物中14种活性成分

0.100 0g的甘草提取物样品用10mL的80%(体积分数)甲醇溶液超声提取30min后静置30min,取上清液经0.45μm滤膜过滤。采用高效液相色谱法同时测定滤液中14种活性成分的含量,以Diamonsil Plus C18色谱柱为分离柱,用0.05%(体积分数)磷酸溶液和乙腈以不同比例混合的溶液为流动相进行梯度洗脱,用二极管阵列检测器测定。通过单因素试验和L9(33)正交试验对提取条件进行了优化。14种活性成分的质量浓度在一定范围内与其对应的峰面积呈线性关系,方法的检出限(3s)为0.02~0.12 mg·L^-1。在3个浓度水平进行加标回收试验,回收率为91.7%~143%,测定值的相对标准偏差(n=5)为1.2%~6.0%。     

在线固相萃取净化-高效液相色谱法测定人血浆中的霉酚酸

建立了在线固相萃取净化-高效液相色谱法联用(Online SPE-HPLC)测定人血浆中霉酚酸浓度的分析方法。联用系统以Capcell PAK MF Ph-1为净化柱,Poroshell 120?EC-C18为分析柱,血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,直接进样分析。结果表明,霉酚酸在0.20~50.00μg/mL范围内线性关系良好,相关系数(r)为0.9998,检出限和定量下限分别为0.07、0.20μg/mL。在0.39、25.00、50.00μg/mL 3个质量浓度下的平均回收率为96.2%~105%,日内和日间相对标准偏差(RSD)分别为2.6%~3.1%和2.9%~3.3%。该法操作简便、快速,可用于人血浆中霉酚酸浓度的分析。     

液相色谱-串联质谱法测定水中14种苯胺类化合物

通过优化色谱和质谱条件,建立了直接进样-液相色谱-串联四极杆质谱法同时快速检测水中14种苯胺类化合物的分析方法。水样经0.45 μm聚醚砜(PES)滤膜过滤后,采用Shim-pack FC-ODS柱(75 mm×4.6 mm, 3 μm)进行分离,以甲醇-0.1%(v/v)甲酸(35:65, v/v)梯度洗脱,流速0.3 mL/min,柱温35 ℃,串联四极杆质谱的多反应监测模式进行检测。在优化的分析条件下,14种苯胺类化合物可在12 min内分析完毕,而且线性关系良好(r>0.999),方法检出限在0.03~4.19 μg/L之间。对加标3个质量浓度(0.5、5.0、20.0 μg/L)的地表水样品平行测定6次,14种苯胺类化合物的相对标准偏差在0.4%~9.4%范围内。该方法抗干扰能力强、分析速度快、灵敏度高,已应用于实际样品的分析,样品加标回收率在68.0%~130%之间。