动力学荧光法测定抗坏血酸

基于在硫酸介质中 ,抗坏血酸能活化钒 ( )催化溴酸钾氧化藏红 T的反应 ,使其荧光猝灭 ,建立了动力学荧光法测定抗坏血酸的新方法。方法的检出限为 5 .8× 1 0 -3 μg/m L,线性范围为 0～ 0 .5 6μg/m L。可用于药品、蔬菜、尿液中抗坏血酸含量的测定     

微流控芯片毛细管电泳法检测细胞内活性氧与细胞凋亡关系

建立了微流控芯片毛细管电泳激光诱导荧光同时测定细胞内活性氧和凋亡信号的方法。先用AlexaFluor488 annexin V细胞凋亡试剂盒标记细胞凋亡的外翻磷脂酰丝氨酸,再用双氢罗丹明123(DHR123)标记细胞内活性氧,用PBS将细胞调整为终密度1.2×106cells/mL的细胞悬液。细胞群经反复冻融法破碎后,以20 mmol/L硼砂(pH 9.2)作电泳缓冲溶液,分离电压1.2 kV,进样时间60 s,1 min内可完成活性氧和细胞凋亡信号的同时测定。方法简单、快速,细胞内活性氧和DHR123的反应产物(Rh123)在0.5～3μmol/L浓度范围内线性关系良好,相关系数(r)为0.998,检出限(S/N=3)为0.058μmol/L,可用于细胞内活性氧的定量分析。测得HepG2肝癌细胞活性氧含量为0.16μmol/L,被阿霉素诱导凋亡后,细胞内活性氧含量升高至1.77μmol/L。     

荧光光度法测定环境水样中的苯酚和对苯二酚

建立了荧光光度法直接测定环境水样中的苯酚和对苯二酚的新方法.通过β-环糊精增敏,三维荧光扫描选择测量波长,在波长对为λex/λem=273/307 nm时测定苯酚,苯酚的线性范围为0～1×10-4 mol/L,检出限为6.6×10-8 mol/L;在波长对为λex/λem=295/331 nm时测定对苯二酚, 对苯二酚的线性范围为0～1.5×10-5 mol/L,检出限为5.2×10-9 mol/L,回收率达到93.5%～103.5%.     

锰C-抗坏血酸甲醛-化学发光体系的研究

实验观察到锰 氧化抗坏血酸可以产生弱的化学发光 ,甲醛对这一化学发光反应有较强的增敏作用 ,据此建立了测定抗坏血酸的流动注射化学发光分析法。方法的检出限为 2× 1 0 -8mol/L抗坏血酸 ;线性响应范围为 6 .0× 1 0 -8～ 2 .0× 1 0 -5mol/L。对 1 .0× 1 0 -6mol/L的抗坏血酸进行 1 1次测定 ,相对标准偏差为 2 3%。该方法已成功应用于维生素C针剂和片剂中抗坏血酸含量的测定 ,结果与药典方法测得值一致     

动物组织中金霉素残留测定的高效液相色谱柱后衍生反应研究

建立了动物组织中金霉素残留测定的高效液相色谱柱后衍生法,研究了镁离子和草酸体系对金霉素荧光强度的影响。结果表明,镁离子浓度和草酸浓度为1∶1.2时,金霉素的荧光强度最强。动物组织样品以5%高氯酸提取,正己烷脱脂,C18净化,Hy-persil ODS C18(250×4.6 mm,5μm)分离,流动相为甲醇∶0.05 mol/L草酸=80∶20(V/V),流速为0.7 mL/min,柱后0.05 mol/L乙酸镁衍生,流速为0.1 mL/min,紫外检测器和荧光检测器同时测定,提高了金霉素残留定量灵敏度。紫外检测波长365nm,荧光检测波长eλx=360 nm,eλm=520 nm。     

aFGF拮抗剂对3T3细胞蛋白质组影响的研究

六肽P₂(VYMSPF)是我室从噬菌体展示肽库中筛选出来的aFGF拮抗剂,为研究其对aFGF信号传导机制的影响,对处于4种不同生理条件下的NIH3T3细胞(正常的细胞、加P₂刺激的细胞、加aFGF+肝素刺激的细胞、加aFGF+肝素+P₂刺激的细胞)的全细胞裂解液进行双向电泳分离及软件分析.对后2种细胞的蛋白质图谱中表达差异的5个蛋白质点进行质谱分析和数据库检索.鉴定出3种表达下调的蛋白质,其中鸟苷酸结合蛋白α-11亚单位和1C-型核因子分别参与细胞内aFGF信号传导以及转录调控.这些差异点的变化为进一步研究P₂对aFGF信号传导途径的抑制作用提供了实验基础和线索     

胶束电动毛细管色谱分离氨基酸和磷酸化氨基酸

本文报道了胶束电动毛细管色谱分离、汞灯诱导荧光电荷耦合器件检测分析氨基酸和磷酸化氨基酸的 4-氟 - 7-硝基苯 - 2 - 口恶 - 1 ,3-丫唑衍生物。研究表明 ,在 p H9.35的 1 0 mmol/L硼砂和 1 0 mmol/L十二烷基硫酸钠的电泳缓冲介质中 ,5种氨基酸和 3种磷酸化氨基酸在 1 0 min内完全分离 ,检测灵敏度为 1 .2 1× 1 0 - 8～ 5 .2 1×1 0 - 8mol/L ,分离效率达 7.3× 1 0 5～ 3.0× 1 0 5/m理论塔板数 ,结果令人满意     

高效液相色谱法测定水中硝基苯和苯胺含量

建立了高效液相色谱直接进样快速分析水样中苯胺和硝基苯的方法.操作条件为:进样量5 μL;流速1 mL/min;流动相为V(乙腈)∶ V(3.85 g/L乙酸铵+3 g/L乙酸)=65∶ 35混合液;苯胺用荧光分析,λex/λem =280/340 nm;硝基苯用紫外分析,波长为262 nm;分离柱为Eclipse XDB2-C8 柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm);测试时间为3.2 min;样品前处理方法:1.0 mL水样与1.0 mL甲醇混匀,用微孔滤膜(0.45 μm, 有机系)过滤.苯胺和硝基苯标准曲线的线性相关系数均 >0.999.测试苯胺、硝基苯时,仪器精密度分别为1.56%和0.13%.方法的回收率在89%～110%之间.仪器对苯胺和硝基苯的检出上限分别是50和200 mg/L; 苯胺和硝基苯的方法检出限分别是18和21 μg/L.     

基于CoFe(Ⅲ)PBA/GO过氧化物模拟酶化学发光法检测H2O2和抗坏血酸

制备了一种具有过氧化物酶活性的类普鲁士蓝/氧化石墨烯复合纳米材料(CoFe(Ⅲ)PBA/GO)。将具有过氧化物酶活性的CoFe(Ⅲ)PBA/GO和化学发光法相结合,构建了一种用于检测H₂O₂和抗坏血酸(AA)的化学发光分析法。CoFe(Ⅲ)PBA/GO催化H₂O₂产生的O₂·^-,·OH,1O₂自由基氧化Luminol会产生很强的化学发光信号,通过检测化学发光强度可以实现对H₂O₂的检测。该方法检测H₂O₂的线性范围为0~0.8μmol/L,检测限为11 nmol/L。利用AA作为活性氧消除剂可以抑制化学发光反应的特点,实现了AA的检测。该方法测定AA的线性范围为0.02~0.8μmol/L,检测限为20 nmol/L。方法已应用于H₂O₂消毒水中H₂O₂和维生素C片中抗坏血酸的检测。     

柱切换-荧光检测反相高效液相色谱法测定血浆中特布他林浓度

采用柱切换技术 荧光检测反相高效液相色谱法测定血浆中特布他林 (TB)浓度。使用LunaC8( 2 )和KromasilC18为分析柱 ( 1 5 0mm× 4.6mm ,5 μm)和预处理柱 ( 2 5mm× 4.6mm ,5 μm) ,流动相分别为pH 3 0 ,0 .0 3 3mol/L磷酸盐缓冲液∶甲醇∶乙腈 ( 92∶7∶1 )和水∶甲醇∶乙腈 ( 97∶2∶1 ) ,流速均为 1 .0ml/L。血浆样品经乙腈沉淀蛋白后进样 ,切换时间为 3 .2～ 4.2min。荧光检测 ,λex为 2 80nm ,λem为 3 0 9nm。以沙丁胺醇作内标 ,按内标法定量。标准曲线线性范围为 0 .8～ 3 2 μg/L ;最低定量限为 0 .8μg/L;TB和内标的保留时间分别为 8.7和 9.3min;日内RSD小于 4% ,日间RSD小于 9% ,方法回收率在 93 %～ 1 1 2 %。     

火焰原子吸收分光光度法测定钨矿石中铋

1　主要仪器和试剂WFD- Y 型原子吸收分光光度计 ;铋空心阴极灯。仪器工作条件 :波长 30 6 .8nm,空气 -乙炔流量 2 .2 L/ min～ 6 .5L/ min,灯电流 1 2 m A,狭缝0 .2 mm,燃烧器高度 8.5mm。铋标准液体积分数为 5% ,硝酸溶液 ,质量浓度为 50 0 μg/ m L,使用时用体积分数 5%的盐酸稀释至所需浓度。2　分析步骤称取 0 .5g试样于 1 0 0 m L烧杯中 ,加 1 0 m L浓盐酸 ,低温加热分解片刻 ,再加 3m L浓硝酸 ,继续分解完全 ,蒸发至残余量 1 m L左右 ,取下冷却。加 2 .5m L 浓盐酸 ,用水转移至 50 m L比色管中 ,并稀释至刻度 ,摇匀。待溶液澄…     

高效液相色谱-荧光检测法测定环境水中的苯胺和苯酚

建立了用高效液相色谱荧光检测法同时测定环境水中苯胺和苯酚的分析方法。色谱柱为EclipseXDB C8(4.6mmi.d.×150mm,5μm),流动相为甲醇 磷酸盐缓冲液(0.1mol/L磷酸二氢钾 0 1mol/L磷酸氢二钠,pH6.87)V(甲醇)∶V(磷酸盐缓冲液)=50∶50,流速1 0mL/min,柱温25℃,检测波长0minλex/λem=230/340nm(测定苯胺),3.5minλex/λem=215/300nm(测定苯酚)。测定苯胺的线性范围0.2～120ng,r=0.9999,检出限0.01ng;测定苯酚的线性范围0.4～500ng,r=0.9998,检出限0.02ng,回收率98.1%～101.2%。该方法已用于对环境水中苯胺和苯酚的测定。     

4种Keggin型磷钼酸盐对蘑菇酪氨酸酶活性和黑色素生成的抑制及抗氧化作用

合成并表征了4种过渡金属钒取代的Keggin型磷钼酸盐Na_3+nPMo_12-nV_nO₄₀(PMo_12-nV_n)(n=2, 3, 4, 5). 酶动力学实验结果表明, 4种多酸对酪氨酸酶的抑制类型为可逆的混合型抑制, 过渡金属钒取代的个数会影响酪氨酸酶的抑制效果. 当所加酶量为500 U/mL时, PMo₁₀V₂, PMo₉V₃, PMo₈V₄和PMo₇V₅对酪氨酸酶的半抑制率(IC₅₀)分别为(7.046±0.506), (12.128±0.574), (12.362±0.802)和(9.860±1.490) mmol/L. 分子对接研究表明, 化合物与酪氨酸酶之间主要存在氢键和范德华力. 细胞实验结果表明, 在0~200 μmol/L范围内, 4种多酸未对B16黑素瘤细胞产生细胞毒性, 且能显著抑制黑色素的生成. 此外, 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)与2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除实验显示, 4种多酸具有良好的抗氧化能力, 清除DPPH自由基能力优于ABTS.     

STAB-TPB协同增敏邻二氮菲间接光度法测定抗坏血酸

基于抗坏血酸与铁(Ⅲ)氧化还原和铁(Ⅱ)与邻二氮菲配位显色反应,建立了十八烷基三甲基溴化铵和十四烷基溴化吡啶协同增敏测定抗坏血酸新方法。TPB-STAB体系集助溶、保护、催化、增敏为一体,有效提高配合物的光灵敏性,摩尔吸光系数增大2.2倍,方法的线性范围为0~10μg/m L,检出限为0.01μg/m L,用于实际样品中抗坏血酸含量的测定。     

蝶呤类化合物的荧光性能研究

研究了蝶呤类化合物的天然荧光特性。着重考察了新蝶呤、生物蝶呤、黄蝶呤和蝶呤在 p H7.7磷酸盐缓冲溶液条件下的荧光光谱及各种因素对其荧光强度的影响。在最佳实验条件下 ,四种蝶呤类化合物的线性范围为 :蝶呤 0 .6～ 2 .8μg/m L,新蝶呤 0～ 2 .6μg/m L,生物蝶呤 0～ 2 .4μg/m L,黄蝶呤 0～ 6.0 μg/m L,检出限依次为 :4.2 9× 1 0 - 7g/m L,6.71× 1 0 - 8g/m L,5.79× 1 0 - 9g/m L和 1 .75× 1 0 - 8g/m L     

铜(Ⅱ)催化铍试剂还原反应的动力学及其应用

在 2 ,2′-联吡啶的存在下 ,铜 ( )催化抗坏血酸还原铍试剂 的反应。考察了影响反应的条件 ,讨论了反应机理 ,建立了测定超痕量铜的新方法。方法的检出限是1 .2 7× 1 0 - 11g/m L ,测定范围是 0 .0 0～ 1 .0 0 ng/m L。本法已用于自来水和矿泉水中痕量铜 ( )的测定     

高密度烃燃料四氢环戊二烯三聚体的合成及热裂解

以双环戊二烯为原料,经D-A反应及催化加氢合成了高密度烃燃料四氢环戊二烯三聚体(THTCPD).该三聚体的密度为1.082 g/cm3,体积热值为47.5 MJ/L,闪点为120℃,凝固点为48~49℃.采用裂解器与色谱-质谱联用技术,对THTCPD的热裂解进行了在线监测,结果表明温度对裂解反应影响较大.对裂解产物的结构进行了分析,产物以甲烷、乙烯、丙烯、环戊烯、环戊二烯、苯和甲苯为主.依据产物结构及单分子自由基反应模型,推测得到了9种路径的裂解机理.采用X3LYP法进行了各自由基的热力学计算,得到各反应路径的相对能量及路径比.通过不同温度下的裂解转化率,计算得到热裂解反应动力学方程,经线性拟合得到活化能Ea=6.67×104kJ/mol,指前因子A=133.75.     

聚苯胺及聚邻甲基苯胺的直接裂解质谱研究

本文用直接裂解质谱和裂解色谱/质谱研究了不同氧化程度聚苯胺(PAn)和聚邻甲基苯胺(POT)的裂解过程及链结构,并用碰撞诱导解离(CID)和联合扫描(B/E)等技术探讨了链的断裂机理。结果表明,聚苯胺及其衍生物在650℃下裂解时产生5个单元的线状齐聚物,PAn及POT中苯二胺和醌亚胺两种结构单元共存。并提出了PAn和POT的自由基过渡态热解机理。     

猝灭-恢复型电化学发光传感器测定抗坏血酸的研究

制备了氮硫掺杂石墨烯量子点(NSGQDs),并将其修饰在金电极表面.基于NSGQDs良好的电化学发光(ECL)特性,以其为探针,进一步将铜-金属有机框架(Cu-MOF)修饰于该电极表面,构建了猝灭-恢复型ECL传感器用于抗坏血酸的高灵敏检测.由于NSGQDs表面存在大量氨基,当Cu-MOF存在时,NSGQDs的ECL信号猝灭;加入抗坏血酸后,Cu-MOF从NSGQDs表面自动脱落,NSGQDs的ECL信号得以恢复.NSGQDs的ECL信号恢复值与抗坏血酸浓度在0.1～40 μmol/L之间呈良好的线性关系,检出限为3.2 nmol/L.该法已用于血样中抗坏血酸的测定,并进一步研究了人血液中抗坏血酸24h的药代动力学规律.     

pH值对L-抗坏血酸―赖氨酸/甲硫氨酸Maillard反应产物的抗氧化活性的影响

对不同pH值对L-抗坏血酸―赖氨酸/甲硫氨酸模型体系发生的美拉德(Maillard)反应所得到产物(MRPs)的抗氧化性活性的影响进行了研究。结果表明,MRPs的pH值在酸性条件下增大,在碱性条件下减小;在pH=5时,其紫外吸光度、棕色指数、还原力和DPPH自由基清除能力均达到最大;Fe2+螯合能力随着pH值的增大而增大。因此可以得出结论:pH值对抗坏血酸的MRPs的抗氧化活性有较大影响,且在pH=5时,抗坏血酸的Maillard反应产物的抗氧化活性最强。