使用疏水作用色谱研究蛋白质的构象变化

研究了高效疏水作用液相色谱中(HIC)色谱条件改变对蛋白质构象的影响。发现固定相配体的疏水性、温度及流动相中盐的阴离子、阳离子和pH值都影响蛋白质的构象。     

甲酸－异丙醇体系分离蛋白质时甲酸的作用研究

 本文在反相高效液相色谱上，用甲酸－异丙醇体系作流动相，研究了甲酸浓度变化对蛋白质分离的影响。结果表明当甲酸浓度增加时，蛋白质的保留时间减小和计量置换模型之值的降低反映了甲酸在这个体系中具有洗脱剂的作用。甲酸使蛋白质在流动相中的溶解度增大，具有离子对试剂的作用。在这个体系中甲酸还具有破坏蛋白质结构的功能。     

分离尿激酶的胍基型亲和色谱填料研究

尿激酶的精制一般使用亲和色谱法［’－‘ｊ．目前实际使用和文献报道最多的填料是在 ＳｅＰｈａｒｏｓｅ上键合对氨基苯眯（ｐ－ＡＢＺ）制得的［‘ｊ．这种填料分高效果较好,但机械强度不高,只能用于常压色谱,而且寿命较短．前文［‘１报道了用 ＳｅＰｈａｒｏｓｅ和聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球为基质, Ｐ－ＡＢＺ为配基分离尿激酶的亲和色谱填料的对照研究．本文报道以含肥基的有机小分子为配基,ＳｅＰｈａｒｏｓｅ及两种聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球为基质的分离尿激酶色谱填料的合成和性能试验．发现肥基己酸和精氨酸为配基的亲和色谱…     

促卵泡激素的径向色谱纯化工艺

 比较了径向离子交换色谱与经典离子交换色谱在纯化工艺放大过程中的分离效果 ,证实了径向色谱比经典色谱更适合于促卵泡激素 (FSH)的纯化 ,并建立了适合于大规模生产FSH的径向色谱纯化新工艺。纯化后FSH的比活性为 180IU/mg ,活性回收率为 5 6 % ,产品质量符合国家药典规定。     

高效亲和液相色谱法纯化基因重组人白细胞介素-2

1 引言高效亲和液相色谱(HPAC)是将经典亲和色谱的高特异性同高效液相色谱的快速、高效相结合产生的一种蛋白质的分离技术.它使经典亲和色谱原来需要几个小时才能完成的纯化工作缩短为十几分钟或更短,而且纯化倍数高,分离效果好.因此,HPAC在近年基因重组蛋白质的纯化方面得到了广泛的应用.基因重组人白细胞介素-2(rhIL-2)是生物体内具有重要生物学功能的细胞因子,目前已成功地进行了基因表达.本文以自制的rhIL-2单克隆抗体(McAb)的HPAC填料纯化了大肠杆菌(E.coli)表达的rhIL-2.     

重组人干扰素—γ的凝胶色谱分离及其变性剂对分离结果的影响

使用十二烷基硫酸钠，盐酸胍和尿素三种不同的变性剂溶解基因重组人干扰素－Ｇａｍｍａ（ｒ－ＩＦＮ－γ）包含体，然后进行凝胶色谱分离。使用活性，电泳和高效疏水作用色谱三种方法，比较了三种变性剂对分离结果的影响，结果为：尿素溶解包含体后ｒ－ＩＦＮ－γ的分子量与杂质相差较大，盐酸胍溶解液经分离后ｒ－ＩＦＮ－γ比活最高，ＳＤＳ对ｒ－ＩＦＮ－γ的构象影响较大。     

淀粉改性有机物包裹顺磁性微粉的制备及应用

淀粉改性有机物包裹顺磁性微粉的制备及应用常建华，郭治安，姚永辉（西北大学化学系，西安７１００６９）郭立安（第四军医大学中心实验室，西安７１００３２）有机物包裹的微球是近年来发展起来的新材料，可作药物用于动脉栓塞治疗某些恶性肿瘤［１］。也可作分离介质用...     

在反相色谱和疏水作用色谱中温度对蛋白质保留值的影响

人们在反相色谱(RPC)和疏水作用色谱(HiC)上研究温度对蛋白质保留值影响时,常把蛋白质保留时间随温度增加而增长作为属于HIC的一个标准,将保留时间随温度增加而减小作为RPC的一个特点。实际上常常出现与之相反的保留行为。过去对于这些反常的行为解释并不令人满意。我们研     

化学改性琼脂糖凝胶的物化性能及其对重组人血白蛋白的纯化应用研究

考察了几种经过化学改性后带有离子交换配基的琼脂糖凝胶介质的理化性能.通过外形观察、元素及金属含量分析、柱效测定、耐压及流速测定、离子交换容量和蛋白吸附容量测定,从多方面对性能进行验证比较,并对其在分离纯化重组人血白蛋白的应用性能进行了初步研究.结果表明国产产品与进口产品理化性能相当.     

使用高效疏水作用色谱和凝胶色谱纯化重组人干扰素—γ

基因重组人干扰素一y（rhIFN－y）已成功地在大肠杆菌（E．colt）中获得表达．但在纯化工艺中仍有许多问题需要解决，如纯化步骤多、复性不完全及活性回收率低等．为此国内外学者开展了一系列研究，试图使用一些新的分离方法和手段来解决上述问题［‘’‘j．本文利用近年来开发的纯化蛋白质有效工具即高效疏水作用色谱（＊＊me）结合凝胶色谱（％c），从包含体人手，经过合理的工艺按排，成功地将山IFN－y进行了纯化．方法简单、快速，而且避免了rhIFN－y在纯化中采用大量溶剂稀释复性和通过透析来除去变性剂的麻烦．1实验部分1．1仪器…