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1.
加晓丹  柯从玉  孙萱  耿信笃 《化学学报》2012,70(15):1631-1636
为使混合机理色谱(MMC)得到广泛地应用,合成、表征和评价MMC固定相就成了首先要解决的问题.依据离子交换色谱柱也具有疏水色谱(HIC)保留机理的特征,选了4种弱阳离子交换(WCX)柱和一根二维[2D(WCX,HIC)]色谱柱,研究了标准蛋白在这两类色谱柱上的保留行为.这四种WCX色谱柱中的两种能在WCX和HIC两种分离模式下分离蛋白,虽不如2D色谱柱效果好,但有可能当成"准2D柱"来使用.发现蛋白在这四种WCX柱上所显示的HIC分离特征各不相同,且保留值随盐浓度变化呈现出的"U型"曲线也有大的差异.实验结果显示,"U型"曲线的宽度和临界点分别与色谱动力学和热力学因素相关.还对这两类色谱固定相的峰容量表征方法和命名提出了建议和说明.  相似文献   
2.
郭鸿  张养军  高娟  耿信笃 《色谱》2001,19(1):1-4
 比较了Snyder经验公式中的K0w 与S和溶质计量置换保留模型 (SDM R)中溶质保留参数Z(1mol溶剂化溶质被溶剂化固定相吸附时 ,在其接触表面处释放出溶剂或置换剂的总摩尔数 )与lgI(与 1mol溶质对固定相的亲和势有关的常数 )之间的定量关系。SDM R中的两个参数间不仅对同系物溶质可以有很好的线性关系 ,而且对非同系物溶质也有很好的线性关系。其线性关系的好坏主要取决于这两个参数数值范围的大小 ,与文献中报告的线性关系取决于是否单因素影响溶质的保留和完全由统计学规律决定的结论不同。  相似文献   
3.
以推导改进的Langmuir模型过程中的总热力学平衡常数的表达式为基础,考察了卵清蛋白在疏水连续棒状色谱柱上的会行为,发现当蛋白在保留情况下,能很好地符合Langmuir模型,而且,进一步研究了吸附量与溶剂浓度的关系。发现在保留情况与,其吸附量的对数与流动相中置换剂的摩尔浓度之间在成线性关系。当流动相中硫酸铵浓度仅相关0.5mol/L时,其最大吸附量相差30倍,说明在比较柱的吸附量时,应选择适合的溶剂浓度,提出了在等浓度条件下洗脱条件蛋白能够在色谱柱保留时的饱和吸附量为其有效吸附量,在这种条件下的流动相的组成才是研究溶质饱和吸附量的合适组成。  相似文献   
4.
张养军  李翔  耿信笃 《色谱》2001,19(5):423-426
 在生物大分子的高效液相色谱分离中 ,由计量置换保留模型可得出生物大分子在色谱柱上的保留行为取决于流动相中置换剂的浓度的结论。据此提出了用于蛋白同时复性及纯化的制备型装置 (USRPP)中最小流动相用量的估算公式 ,并进一步得出在保持最小流动相用量不变的条件下 ,改变流动相流速和线性梯度时间几乎不影响制备型USRPP分离蛋白的分离度和复性效率的结论。该结论与实验结果一致。  相似文献   
5.
张养军  申烨华  张启东  耿信笃 《色谱》2000,18(6):487-490
 提出了以醋酸 水作为流动相的体系中 ,在ODS柱上分离生物大分子的反相高效液相色谱 (RPLC)方法。实验结果表明 ,醋酸 水的洗脱能力强于甲醇 水 三氟醋酸体系 ,在一定程度上克服了色谱分离中一些蛋白质的不可逆吸附且具有便于冷冻干燥的优点。用参数Z(1mol溶剂化溶质被溶剂化固定相吸附时从两者接触表面释放出置换剂的摩尔总数 ) ,logI(与 1mol溶质对固定相亲和势有关的常数 )和 j(与 1mol溶剂对固定相亲和势有关的常数 )对 9种蛋白质在此流动相体系中的保留进行了表征。  相似文献   
6.
反相液相色谱中同系物保留过程中的等焓点   总被引:2,自引:0,他引:2  
张维平  郭鸿  耿信笃 《分析化学》2000,28(4):480-485
依据液相色谱中溶质计量置换保留模型,从理论上分别推导了出在反相高效订色谱(RPLC)中同系物端基和重复结构单元对Z(1mol溶剂化溶质被固定相吸附时,在其接触表面释放出溶剂的摩尔总数)与绝对温度倒数间的线性关系式。也从分子结构参数推荐导出了同系物端基对总变的贡献△H,和同系物非端基(或键长)对总焓变的贡献△HsNc的表达式。从而建立了等焓点的坐标方程,阐明了等点的纵坐标相是溶质在等点处的变为零,等  相似文献   
7.
用计量置换吸附模型研究液-固色谱中的溶质保留机理   总被引:3,自引:0,他引:3  
宋正华  耿信笃 《化学学报》1990,48(3):237-241
本文以表面物理化学吸附模式为基础, 推导出液-固色谱中溶质计量置换保留模型. 与其他模型进行比较的结果证明本模型为最佳. 提出用参数j作为区别反相色谱和液-固色谱的判据.  相似文献   
8.
重组人干扰素-γ的制备与鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
吴丹  高栋  白泉  耿信笃 《色谱》2008,26(2):206-211
用聚乙二醇200疏水相互作用色谱固定相(PEG200-STHIC)分别在色谱柱和色谱饼上完成了一步复性并同时纯化来源于大肠杆菌(E.coli)表达的重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)。为了能使色谱分离方法用于不同来源的rhIFN-γ的纯化,对rhIFN-γ在反相色谱、离子交换色谱、固定化镍离子亲和色谱上的保留行为也进行了研究。色谱柱纯化的rhIFN-γ收集液经排阻色谱除盐和冷冻干燥得到rhIFN-γ干粉。用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对rhIFN-γ干粉进行了测定,rhIFN-γ单体的相对分子质量为17184.0,二聚体的相对分子质量为34204.4。用细胞病变抑制法(CPEI)测定rhIFN-γ干粉的比活性为9.5×108 IU/mg。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定rhIFN-γ干粉的纯度高于95%。用色谱柱复性并同时纯化rhIFN-γ的质量回收率达到93.7%,纯度高于95%,比活性为4.3×107 IU/mg。结果表明,采用PEG200-STHIC色谱柱复性并同时纯化rhIFN-γ是一种十分高效的方法。  相似文献   
9.
10.
研究了用反相色谱模式, 在不同流动相流速条件下所得到的细胞色素C的肽谱图. 发现在低流速时, 保留弱的肽谱峰增多, 而在高流速时保留强的肽谱峰增多, 未发现溶质分子质量与溶质相对保留值(RRT)之间存在有特定的变化关系. 然而却发现了两种变化规律, 即溶质相对保留值(RRT)与流动相流速之间的双对数线性关系(1) log RRT=a+blog ν, 及所得该二线性参数, a与b之间的线性关系(2) a=c+db. 预计该结果可能会在液相色谱指纹图谱研究和蛋白质组学中分离低丰度蛋白时有潜在的应用价值.  相似文献   
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