新型磁性亲和吸附剂的制备及其在尿激酶纯化中的应用研究

合成了磁性聚乙烯醇和磁性聚甲基丙烯酸甲酯微球,并以它们为基质,用环氧氯丙烷、羰基二咪唑或溴化氰活化后,分别键合氨基乙酸、6-氨基己酸、乙二胺或己二胺为间隔臂,用1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺盐酸盐或羰基二咪唑为偶联试剂,分别偶联对氨基苯甲脒、L-精氨酸甲酯、胍基乙酸或胍基己酸配体,合成了17种磁性亲和吸附剂,并用于尿激酶粗品的纯化.与前文制备的8种磁性亲和吸附剂作对照,研究了基质、活化试剂、间隔臂分子、偶联试剂及配体等因素对尿激酶纯化效果的影响.这些磁性亲和吸附剂在尿激酶的纯化中取得了较好的效果,大多数磁性亲和吸附剂的活性回收率在40%～70%之间,纯化倍数为15～40,吸附容量为0.08～0.2mg/mL.     

分离尿激酶的胍基型亲和色谱填料研究

尿激酶的精制一般使用亲和色谱法［’－‘ｊ．目前实际使用和文献报道最多的填料是在 ＳｅＰｈａｒｏｓｅ上键合对氨基苯眯（ｐ－ＡＢＺ）制得的［‘ｊ．这种填料分高效果较好,但机械强度不高,只能用于常压色谱,而且寿命较短．前文［‘１报道了用 ＳｅＰｈａｒｏｓｅ和聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球为基质, Ｐ－ＡＢＺ为配基分离尿激酶的亲和色谱填料的对照研究．本文报道以含肥基的有机小分子为配基,ＳｅＰｈａｒｏｓｅ及两种聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球为基质的分离尿激酶色谱填料的合成和性能试验．发现肥基己酸和精氨酸为配基的亲和色谱…     

新型磁性葡聚糖亲和吸附剂的制备及在尿激酶纯化中的应用

 采用反相悬浮包埋技术合成多分散的粒径在 5 0目～ 30 0目的磁性葡聚糖微球 (MDMS)。MDMS经环氧氯丙烷活化后 ,分别键合氨基乙酸、6 氨基己酸和乙二胺作为间隔臂 ,以碳二亚胺为偶联剂 ,分别偶联L 精氨酸甲酯、对氨基苯甲脒和胍基己酸配体 ,制备了 5种磁性亲和吸附剂。研究了分散介质及其粘度和密度、有机相和水相的体积比、表面活性剂的用量、搅拌速度等因素对微球制备的影响。将所制备的磁性亲和吸附剂应用于尿激酶粗品的纯化 ,并讨论了偶联试剂和配体对尿激酶纯化效果的影响。