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以微量HeLa细胞(107个)为对象, 经细胞裂解、还原羧甲基化、胰酶降解和Oasis-HLB柱提取分离得到总糖肽后, 用PNGase F酶解释放N-糖链. 对所得N-糖链用Sep-Pak C18柱纯化后进行完全甲基化衍生, 再采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析HeLa细胞表面N-糖链的结构轮廓. 结果表明, 在获得的34种N-糖链中, 除高甘露糖型、二天线、三天线、四天线和五天线等N-糖链外, 还出现了在某种程度上与肿瘤发生转移相关的特殊平分型和Lewis结构. 利用MALDI-TOF MS技术可快速分析微量癌细胞表面N-糖链的结构轮廓, 为进一步寻找肿瘤糖链标志物及肿瘤的早期预防诊断提供技术支持. 相似文献
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以琼胶糖为原料, 通过酸法与酶法降解以及凝胶过滤色谱分离, 获得了9种寡糖. 采用还原胺化法将其与1,2- 二-十六烷基-3-磷脂酰乙醇胺甘油(DHPE)偶联, 获得了相应拟糖脂. 采用糖芯片技术, 通过与标准寡糖(LNnT与LNT)比较, 评价了其与凝集素RCA120的相互作用. 首次发现, 酸法水解得到的琼胶寡糖与RCA120作用力明显高于LNnT, 表明具有Galβ1,4AnG-R结构类型的寡糖与RCA120亲和力强于Galβ1, 4GlcNAc-R, 且亲和力的大小与聚合度无关. 相似文献
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