高压对米曲霉理化性质影响及诱变的研究

 在100~400 MPa压力、保压20 min的条件下处理酱油酿造菌种——米曲霉,研究高压对米曲霉存活率、形态特征、生理性质、蛋白酶、淀粉酶活性等的影响,并诱变筛选优良菌株。结果表明：高压对米曲霉的存活率、形态特征有明显的影响;压力对蛋白酶及淀粉酶活性的影响也有特异的规律,即在一定压力范围内（0.1~200 MPa）蛋白酶的活性随着压力的增加而减小,但随着压力的进一步升高（200~400 MPa）蛋白酶的活性又逐渐增强,在300 MPa时超过对照组,400 MPa时蛋白酶的活性达到最高值;淀粉酶在0.1~100 MPa时活性下降,在200 MPa时其平均的糊化和糖化活性最强、活力最高,当压力升高活性又开始降低,400 MPa时几乎又回到对照值。另外,高压处理后获得一株理想的变异菌株HP300a：生长速度快、孢子数量多、蛋白酶活力高,且不易被杂菌污染。其成曲的几项主要指标均优于对照株,酿出酱油的几项主要指标也明显优于对照株。为利用高压诱变筛选米曲霉优良菌种、提高酿造酱油产品的产量及质量提供了理论依据,并发现了高压处理米曲霉引起其蛋白酶及淀粉酶活性改变的特殊规律。     

智能型金纳米棒荧光探针的制备及其肿瘤细胞成像研究

开发能特异和灵敏检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的智能型荧光分子探针,对于癌症的早期精准诊断与治疗至关重要。本文基于MMP-2特异性识别的多肽底物,利用一价铜离子催化的"点击"化学反应将荧光素(FITC)和多肽底物GPLGVRGY相偶联,与SH-PEG-COOH修饰的金纳米棒在EDC和Sulfo-NHS的作用下通过酰胺化反应,制备得到一种新的MMP-2特异性响应的荧光共振能量转移(FRET)金纳米棒探针GNR@FITC。体外重组酶检测实验、MTT实验及细胞共聚焦显微成像结果表明,该探针对MMP-2过表达小鼠乳腺癌细胞4T1表现出较好的特异性和检测灵敏度,具有进一步开发应用于乳腺癌早期诊断的极大潜力。     

正交法优化前处理-气相色谱测定菠萝罐头中的二溴乙烷残留量

建立了蒸馏-气相色谱测定菠萝罐头中二溴乙烷残留量的方法。采用正交法优化正己烷-丙酮混合提取液的配比及盐添加量。回收率结果表明,影响提取效果的因素依次为蒸馏溶剂体积比无水硫酸钠添加量蒸馏水添加量。最佳蒸馏提取条件为:无水硫酸钠添加量20g,蒸馏水添加量150mL,蒸馏溶剂为正己烷-丙酮(2∶1)。方法检出限为0.5μg/kg;在0.5、1.0、5.0、10μg/kg4个加标水平下的平均回收率为99%～106%;相对标准偏差为3.1%～7.0%。该方法简便、快速、灵敏、准确,适用于菠萝等水果罐头中二溴乙烷残留量的测定。     

原子吸收光谱法测定龙葵果中微量元素的含量

采用炭化-湿式消解原子吸收光谱法测定龙葵果中的铜、铅、锌、镍、镓5种微量元素的含量,采用湿式消解原子荧光光谱法测定龙葵果中的锗的含量。龙葵果中Cu,Pb,Zn,Ni,Ga,Ge含量分别为13.82,2.51,35.62,2.86,0.016,0.16μg/g。龙葵果中各元素的回收率在99.08%—102.72%之间,RSD值在0.14%—2.78%之间,采用原子吸收光谱法测定几种微量元素稳定性好,结果准确可靠。作为药食两用的植物龙葵果含丰富的矿物质元素,对人体补充微量元素有较高的利用价值。     

白刺色素和黑果枸杞色素中花色苷与总多酚的测定

采用紫外-可见分光光度法测定白刺色素和黑果枸杞色素中的花色苷和总多酚的含量,白刺色素的花色苷和总多酚含量分别为4.6、0.10mg/g,黑果枸杞色素的花色苷和总多酚含量分别为14.6、0.22mg/g。该方法操作简单、灵敏度高,适宜检测花色苷和总多酚的含量。该实验为以后的白刺色素和黑果枸杞色素的开发与利用提供理论依据。     

常春藤皂苷元-半酯-AZT衍生物的合成及抗病毒蛋白酶活性

以常春藤皂苷元为原料,合成了5个常春藤皂苷元-半酯-AZT复合物,其结构经¹HNMR、¹³CNMR和ESI-MS表征。并对所有目标分子体外抗HIV-1和HCV NS3/4A蛋白酶的活性进行了初步评价,化合物5显示较强的抗HCV NS/4A蛋白酶的活性,IC₅₀=5.8 μM,其余化合物IC₅₀为10.6～42.3 μM。所有衍生物无抗HIV蛋白酶活性,揭示该类衍生物选择性抑制HCV NS3/4A蛋白酶。      

豆腐果苷-咪唑衍生物的合成及镇静活性研究

以豆腐果苷、2-羟基-1,2-二芳基乙酮(2a～2d)、乙酸铵和脂肪胺为原料,碘单质作为催化剂,成功地合成了一系列豆腐果苷-咪唑类衍生物4a～4h,新化合物4a～4h的结构经~1H NMR,~(13)C NMR,IR和HRMS确认.并用小白鼠实验对目标化合物4a～4h进行了镇静活性筛选,其中4e(400mg·kg~(-1))与豆腐果苷相比有较强的镇静活性.     

中国玉米期货市场价格发现功能的实证分析

利用相关系数、协整检验、格兰杰因果检验以及GS模型等方法对大连期货交易所玉米期货市场的发现价格功能进行了实证分析.结果表明:玉米期货价格与现货价格之间存在协整关系,期货价格具有良好的发现价格功能;存在期货价格和现货价格的双向格兰杰引导关系;玉米期货市场的发现价格功能中期货价格起着决定性的作用.     

2-(4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯基)-4-芳基-2,3-二氢-1,5-苯并硫氮杂的合成及镇静活性的研究

以豆腐果苷为原料,与4-取代苯乙酮发生Claisen-Schimidt反应,得到一系列E-4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯乙烯基-4-取代苯酮衍生物1a～1e,再将1a～1e与邻氨基苯硫酚发生1,4-Michael反应,得到2-(4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯基)-4-芳基-2,3-二氢-1,5-苯并硫氮杂衍生物2a～2e,以上化合物均未见文献报道,其结构经1H NMR,IR,MS加以确证,并对2a～2e进行了药理活性筛选.结果表明,部分化合物具有良好的镇静活性.其中,化合物2a(200mg·kg-1),2b(200mg·kg-1),2c(200mg·kg-1),2d(200mg·kg-1),2e(200mg·kg-1)与豆腐果苷相比较具有更强的活性.     

双水相萃取法从风干香肠中分离提取蛋白酶

双水相萃取(ATPS)是近年来发展起来的蛋白纯化方法。为了扩展该方法适应领域,同时为风干香肠形成过程酶系的研究提供具体方法。本实验研究了运用双水相技术分离提取风干香肠中蛋白酶,对构成双水相体系中的PEG分子量、浓度和类型以及盐浓度的影响进行了分析。确定了双水相组成体系为20%PEG1000(m/m)和25%MgSO4(m/m),在此体系中风干香肠的蛋白酶主要分布在上相,最高酶活12.37U/μg;纯化倍数为4.61;回收率为85%。通过分子筛层析对比,表明风干香肠经过双水相分离提取杂蛋白峰被除去,而蛋白酶峰几乎未受到影响,说明该双水相体系萃取香肠中蛋白酶具有良好的专一性。调解双水相pH值对蛋白酶的萃取没有影响,而添加电解质NaCl反而产生不利影响。