萝卜叶绿体rbc L基因定位及ctDNA基因文库的构建

用改进的高离子强度法分离的萝卜叶绿体（ｃｔ）经ＳＤＳ６０℃裂解，抽提的ｃｔＤＮＡ只需简单纯化即可用于酶切分析．萝卜ｃｔＤＮＡ用４种限制性内切酶ＢａｍＨⅠ，ＰｓｔⅠ，ＨｉｎｄⅢ和ＥｃｏＲⅠ分别进行单酶完全酶解，推算其分子量和长度分别为８２．５×１０６和１２５ｋｂ．以Ｎｉｃｋｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ标记的异源探针ｒｂｃＬ基因与ｃｔＤＮＡＥｃｏＲⅠ片段进行杂交，初步定位在Ｅ１１片段（１．７ｋｂ）上．以ＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＭ１３为载体构建了萝卜ｃｔＤＮＡＥｃｏＲⅠ基因文库     

rbcL基因在水稻叶绿体DNA基因库克隆中的定位

由水稻品系珍汕９７不育系为材料制得的叶绿体ＤＮＡ（ｃｔＤＮＡ）基因库中，筛选到屯含核酮糖１，５－二磷酸羧化酶／加氧酶大亚基基因（ｒｂｃＬ）的重组质粒，对该重组质粒用ＰｖｕⅡ，Ｐｓｔ１ｔ和ＳａｌＩ限制性内切酶进行了分析并制得了限制图谱，ｒｂｃＬ基因在该图谱上进行了定位。     

鳙鱼线粒体DNA的限制性内切酶图谱

用１１种限制性内切酶（ＢａｍＨⅠ、ＢｇｌⅠ、ＢｇｌⅡ、ＢｃｏＲⅠ、ＨｐａⅠ、ＫｐｎⅠ、ＰｓｔⅠ、ＳａｃⅠ、ＳａｌⅠ、ＸｈｏⅠ、ＸｂａⅠ）分析鳙鱼的线粒体ＤＮＡ（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＤＮＡ，简称ｍｔＤＮＡ），构建了全部１１种酶２２个切点的物理图谱．鳙鱼线粒体ＤＮＡ的分子大小约为１６．４４ｋｂ．酶切位点的分布是非随机的．     

全长和截短的δ内毒素cryIAc基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达

在昆虫病毒转移载体ＰＶＬ１３９３多角体基因启动子下游克隆了全长的苏芸金杆菌δ内毒素基因ｃｒｙＩＡｃ，得到了重组转移载体ｐＴｈＹ１，用ＫｐｎＩ将ｃｒｙＩＡｃ基因进行了截短，得到了重组转移载体ｐＶＬＹ２．随后在两种重组转移载体ｃｒｙ基因的下游引入了ＩＥ１启动于驱动的ｎｅｏ基因作为筛选标记和ＳＶ４０小ｔ抗原终止区作为ｃｒｙ基因的终止信号，得到了重组转移载体ｐＶＬＹｌｎｅｏ和ＰＶＬＹ２ｎｅｏ，分别用两种重组转移载体ＤＮＡ与野生型ＡｃＮＰＶＤＮＡ共转染昆虫Ｓｆ９细胞，用Ｇ４１８筛选后经有限稀释法纯化，得到了携带全长和截短。ｒｙＩＡｃ基因的两种重组病毒ｖＶＬＹ１ｎｅｏ和ｖＶＬＹ２ｎｅｏ，分别在昆虫细胞中表达了分子量为１３３３００和８２０００的ｃｒｙ蛋白，大小分别与ｃｒｙＩＡｃ晶体蛋白和预计的截短蛋白相同，并均具有与原晶体蛋白相同的免疫活性，生物测定表明两种表达产物均具有杀虫活性，和昆虫病毒一起产生协同增效毒性．     

长吻鮠肝脏线粒体DNA的研究

采用密度梯度离心法及ＤＮａｓｅⅠ、ＲＮａｓｅ消化法制备并纯化了长吻鮠　（ＬｅｉｏｃａｓｓｉｓＬｏｎｇｉｒｏｓｔｒｉｓ）肝脏线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）．用９种限制性内切酶对ｍｔＤＮＡ进行了分析．ＸｈｏⅠ、ＢｇｌⅡ、ＥｃｏＲⅠ、ＰｓｔⅠ、ＢｇｌⅠ、ＢａｍＨⅠ、ＸｂａⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＳａｌⅠ在长吻　ｍｔＤＮＡ分子上分别具１、３、３、２、１、２、４、７、０个切点．ｍｔＤＮＡ分子量约１０．３１×１０５道尔顿，大小为１６．６９ｋｂ．根据单酶和双酶解片段的数目和分子量，建立了长吻　ｍｔＤＮＡ的限制性酶切图谱．     

在不同pH值和离子强度的磷酸缓冲液中的小麦小孢子有丝分裂

用不同pH和离子强度的磷酸缓冲液短期处理花粉为单核期的小麦花药来研究其花粉(小孢子)的有丝分裂状况.结果表明:pH和离子强度影响小麦小孢子的第一次有丝分裂.对不等分裂百分率的影响的最适pH值随离子强度的提高而降低,在离子强度为0.02M时,以pH为8.0处理的花粉不等分裂百分率最高;在0.067M,以pH6.8的最高;0.1M时,以pH5.6的最高.对均等分裂的影响,其趋势与对不等分裂的影响相似,唯幅度略小.用0.02M—pH8.0处理的花粉均等分裂率明显高于用0.1M—pH5.6处理的. pH和离子强度也影响花粉的进一步分裂,即影响多核花粉百分率,不过其各处理间的差异比不等分裂和均等分裂各处理间的要小. pH和离子强度还影响花粉的退化.在低离子强度时,pH高花粉退化数少,高离子强度时则相反;在低pH时,离子强度高,花粉退化少,高pH时则相反.花粉退化率高的处理正是花粉分裂率低的处理,由此看来,两者可能存在一定的反相关.     

草鱼线粒体DNA酶切图谱的研究

用１０种限制性内切酶对草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｕｓ）肝脏线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）进行了分析，其分子大小约１６．５８ｋｂ．ＰｓｔⅠ，ＢａｍＨⅠ，ＸｂａⅠ，ＢｇｌⅠ，ＨｉｎｄⅢ，ＢｇｌⅡ，ＰｖｕⅡ，ＸｈｏⅠ，ＥｃｏＲⅠ，ＳａｌⅠ在草鱼ｍｔＤＮＡ分子上分别具有２，３，３，４，７，３，６，２，４及０个切点．根据单酶解及双酶解结果建立了草鱼ｍｔＤＮＡ的限制性酶切图谱     

中国人CD59cDNA克隆、序列分析及其表达

用ＲＴ－ＰＣＲ方法从中国人胚胎总ｍＲＮＡ中扩增出４２０ｂｐ人补体终末阶段同源限制因子（ＣＤ５９）的ｃＤＮＡ，序列分析结果表明，所获得的ＣＤ５９ｃＤＮＡ与文献报道中的基因序列完全一致，含ＣＤ５９全长编码区．构建了真核表达质粒，在３Ｔ３细胞中得到了表达．     

小菜蛾颗粒体病毒DNA限制性酶切分析及基因组DNA片段克隆

小菜蛾颗粒体病毒ＤＮＡ用ＢａｍＨＩ和ＸｈｏＩ酶切，经０．７５％琼脂糖凝胶电泳，分别得到１２条带和８条带，平均分子量为１１３．０ｋｂ．用Ｓｕｐｅｒｃｏｓ１Ｃｏｓｍｉｄ作载体，将Ｓａｕ３ＡＩ部分消化的ＰｘＧＶ－ＤＮＡ随机片段插入该载体的ＢａｍＨＩ酶切位点，转化于ＸＬ１－Ｂｌｕｅ受体菌，经Ａｍｐ平板筛选转化子，挑出２５６个Ａｍｐ＋菌落，以３２Ｐ－ｄＣＴＰ标记的ＰｘＧＶ－ＤＮＡ为探针，斑点杂交筛选得到５９个阳性重组体，再经电泳检测，得到了５９个不同大小的ＰｘＧＶ－ＤＮＡ片段克隆．     

钼蓝比色法测定新疆果品中抗坏血酸的含量

本文研究了对果品中低含量抗坏血酸样品进行测定的钼蓝比色法，并对一些果品的Ｖｃ做了测定，结果说明灵敏度高，精密度好。     

相对论性冷电子束流静电双流不稳定性

激光核聚变的"快点火"过程中高能电子的产生会引起相对论性静电双流不稳定性,它对相对论性电子的传输和能量沉积有重要影响。从完全协变相对论性电磁流体力学方程出发,研究了相对论性冷电子束流激发的静电双流不稳定性。研究表明,快电子束流速度越大,对不稳定的增长率和不稳定区域的抑制性越强,即相对论性越强,越能抑制双流不稳定性的产生;而快电子束密度越大,越易于引发双流不稳定性;随着快电子束流速度以及束流密度的增大,不稳定性最大增长率都向小波数区域移动。     

腐殖酸与三价稀土元素的沉淀作用机制研究

对腐殖酸与三价稀土元素在水溶液中的结合作用进行实验研究,在宽浓度范围内探讨两者之间的络合与沉淀反应机制,考察溶液体系稳定性及其离子强度和pH值的影响.结果表明腐殖酸与稀土离子形成的配位络合物是沉淀产生的主要原因,共存体系的稳定性明显受到离子强度和pH值影响.腐殖酸和稀土元素通过共沉淀从溶液中去除,在作用机制上表现为离子交换、配位络合和共沉淀等多种形式.     

荧光光谱法研究罗丹明B与DNA的相互作用

在pH=7.4的三羟甲基胺基甲烷-盐酸(Tris-HCl)的缓冲溶液中,利用荧光分光光度法研究了小分子染料罗丹明B(RB)与小牛胸腺DNA(CTDNA)的相互作用.实验考察了离子强度、阴离子猝灭剂KI对RB-DNA体系的影响.结果表明:DNA的存在使得RB的荧光强度显著降低,RB以沟槽模式与DNA相互作用.     

海藻酸／明胶共混膜结构表征及性能

由海藻酸钠和明胶的水溶液共混,在5％（质量分数）的CaCl2水溶液中凝固,然后1％（质量分数）的HCl水溶液处理,成功制得海藻酸／明胶共混膜,采用红外光谱,X－射线衍射,原子吸收光谱,扫描电镜对共混膜进行了结构表征,并对共混膜的透光率,吸水率及力学性能进行了测试,结果表明,共混膜中海藻酸与明胶分子间存在着强的相互作用及良好的相容性,其中Ca^2 交联和海灌酸与明胶分子间静电作用使共混膜力学性能是到了显著改善,此共混膜可望成为一种潜在的伤口包扎,止血及人造皮肤材料。     

荧光光谱法研究葫芦[7]脲与牛血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱滴定法研究了葫芦[7]脲(CB[7])与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。实验发现,在常见的pH 7.4时,BSA的荧光强度随着CB[7]浓度的增大而明显降低,猝灭常数随温度升高而逐渐减小。结果表明,CB[7]能与BSA相结合,形成较稳定的配合物,BSA内源荧光猝灭属静态猝灭机理。分别采用Stern-Volmer方程和Lineweaver-Burk双倒数方程处理实验数据,获得了不同温度下的反应结合常数、结合位点数以及相关热力学参数。在298K时,其表观结合常数(KA)为2.337×105 L.mol-1,结合位点数为1.078。基于热力学参数判定CB[7]与BSA之间存在协同的疏水作用和静电作用,这表明一方面BSA的氨基酸残基上的非极性基团可部分进入CB[7]疏水性的腔体,另一方面BSA又能与CB[7]端口质子化的羰基产生静电作用。同步荧光技术研究发现CB[7]没有引起BSA构象的变化,这为葫芦脲在药物载体和生命科学领域的应用提供有用的信息。     

乙酰乳酸合成酶与抑制剂ZJ0777及CIE的分子对接和分子动力学模拟

乙酰乳酸合成酶(Acetohydroxyacid synthase,AHAS)是植物和微生物体内3种支链氨基酸生物合成过程中影响第1阶段的关键性酶,已被广泛证实为除草剂的靶标.ZJ0777是一种新型的除草剂,具有与传统商业除草剂相当的除草活性,且具有低毒、低残留、高选择性等优点.使用分子对接方法研究了AHAS-ZJ0777复合物体系的作用模式,并与AHAS-CIE复合物晶体结构的作用模式作比较,发现二者的作用模式相似,对结合起关键作用的氨基酸均为Arg377,Trp574和Ser653.AHAS-CIE体系小分子蛋白质之间主要通过氢键相互作用,AHAS-ZJ0777体系中小分子蛋白质之间主要通过π-π堆积相互作用.对分子对接得到的复合物AHAS-ZJ0777及AHAS-CIE使用Amber程序进行1 135ps的MD模拟实验,随后使用MM-GBSA方法计算了抑制剂与蛋白质的结合能.结果表明,真空中的范德华力、静电作用和非极性溶剂化作用有利于抑制剂与AHAS的结合.本研究从理论上解释了新型ZJ0777分子的高效生物活性,为进一步设计和开发嘧啶苄胺类抑制剂提供了一定的理论指导.     

基于离子液体氧化-萃取一步脱除二苯并噻吩的研究

以自制的硅胶表面担载树状钒配合物SG2.0-[VⅤO2-PAMAM-MSA]为催化剂,研究了离子液体耦合过氧化叔丁醇(TBHP)形成氧化-萃取体系一步脱除二苯并噻吩(DBT)的反应.研究结果表明,离子液体[Omim]PF6与氧化剂TBHP耦合使用时,在催化剂的催化作用下,DBT脱除率明显提高,且油品中的氧化产物二苯并噻吩亚砜(DBTO)和二苯并噻吩砜(DBTO2)迅速减少.当TBHP与DBT的摩尔比为3∶1,离子液体[Omim]PF6与模拟油的体积比为1∶3,温度90℃,反应时间60min时,DBT的脱除率可达95.0%.该氧化-萃取体系重复使用6次后,其性能没有明显降低.     

等温滴定量热法研究牛血清白蛋白与十二烷基二羟乙基甲基溴化铵的相互作用

用等温滴定热量计测定了牛血清白蛋白（BSA）与十二烷基二羟乙基甲基溴化铵（DDHAB）的相互作用焓,探讨了表面活性剂浓度、温度和盐浓度等对相互作用焓的影响.BSA与表面活性剂相互作用焓是静电作用、去水化作用、疏水作用和表面活性剂胶束化等协同作用的结果,在其他条件保持不变时,相互作用焓随表面活性剂浓度改变,在临界胶束浓度（CMC）前后区域分别出现吸热峰.加入NaCl可引起相互作用焓峰值及其位置的变化.     

pH对阿霉素与人血清白蛋白相互作用的影响

应用荧光光潜的方法研究了阿霉素与人血清白蛋白的相互作用．基于荧光猝灭现象和Firster理论，求出了5个不同pH下，两者结合的动力学猝火常数、能节转移效率和结合距离等参数．发现：在实验的酸度条件下，阿霉素对人血清白蛋门的荧光都有猝火作用；与中性、弱酸和弱碱性环境相比，存pH4．00的强酸性环境中，两者的猝灭常数明显偏低，结合距离叫显偏大．结果表明：阿霉素与人血清白蛋白的结合过程中，非辐射能量转移是导致人血清白蟹自荧光猝灭的原因之一；中性、弱酸和弱碱性环境对两者的结合不会产生太大的影响，静电作用小早两者相互作用的主要作用力。     

化合物膜水分配系数的QSPR研究和分子三维参数表征

利用多元线性回归和偏最小二乘分析方法,研究分子表面静电势参数,VolSurf参数与双十四酰基磷脂酰基胆碱(DMPC)-水分配系数之间的定量结构-性质关系(QSPR),均得到较好的结果.分子表面静电势参数分析表明化合物分子表面上负的静电势越分散,越倾向于分配在水相中;与水分子的作用越强,越有利于分配在水相中.此外,具有较大体积和偶极密度的分子倾向于分配在弱极性相中.VolSurf参数分析表明大体积的分子易于分配在DMPC中;分子表面亲水区域较大的分子则倾向于分配在水相中.两个方程中的重要参数之间有较高的相关性,且与DMPC-水分配系数相关性一致.