色谱法在糖类化合物分析中的应用

综述了适用气相色谱分析和高效液相色谱分析多糖的降解方法,单糖和寡糖衍生物的制备,色谱条件的选择以及色谱法在糖类分析中的应用。参考文献58篇。     

亲水作用色谱在糖类化合物分析中的应用

糖类化合物的结构和组成分析对于探究糖的结构与功能的关系具有重要作用。亲水作用色谱(HILIC)对糖类等极性化合物具有良好的分离效果。该文介绍了适合糖类分析的常用HILIC柱固定相及其分离机制,论述了强洗脱溶剂比例、流动相p H值、缓冲盐浓度和色谱柱温度对HILIC分离效果的影响,并举例说明了HILIC法在单糖组成、糖胺聚糖二糖组成、寡糖聚合度、糖苷、糖脂、糖醇以及N-/O-糖链分析中的应用。     

高效液相色谱在生物医药研究中的应用第四讲高效液相色谱法在糖类研究中应用

随着科学技术的迅速发展和人们对单糖、双糖、寡糖、尤其是多糖的功能的不断深入了解,糖的研究已成为当今化学家和生物学家的研究“热点”。例如肿瘤的发生与细胞表面的糖类的变化有着密切的关系;人类血型的不同主要由于血红细胞中糖基的不同;以及最近发现的糖链在分子生物学中具有决定性的作用。所有这些发现和发明均有赖于糖类方法学的突飞猛进。高效液相色谱(HPLC)就是糖类研究方法学中的重要组     

使用反相色谱分离甲基化糖

甲基化糖的分析广泛地用于研究寡糖和多糖分子中单糖残基的键合位置及各种键合位置的相对数量。实现这种研究的可靠手段是气相色谱-质谱仪。与气相色谱法相比较,高效液相色谱法的优点是样品无需乙酰基化处理,同时又适于分析各种糖类及衍生物。但液相色谱法存在两个困难:甲基化糖的分析需用示差折光检测器,因此,无法采用梯度洗脱法分离保留时间     

电喷雾质谱在寡糖序列分析中的应用

选取具有不同结构特征的N-糖链、硫酸软骨素寡糖、人乳寡糖以及海洋来源的壳寡糖、褐藻胶寡糖、卡拉胶寡糖和硫酸岩藻寡糖等,对电喷雾质谱在寡糖的主链序列、分支位点、硫酸基取代位置确定、单糖组成和聚合度分析等方面的应用技术及碎片离子的断裂规律进行了总结.根据相邻同类碎片离子之间的质荷比差值可初步判断寡糖的单糖组成类型;通过与色谱分离技术联用或衍生化方法可提高寡糖的分辨率和离子化效率,并测得寡糖的分子量及聚合度;借助串联质谱及对寡糖还原端的特异性标记,可获得寡糖的还原端残基和部分序列信息;根据寡糖产生的特征碎片离子及其丰度大小可判断残基的特定位置和类型.另外,寡糖的分支通常作为一个整体发生糖苷键断裂或产生D离子,据此可判断分支点的位置;根据硫酸寡糖产生的特异性跨环断裂碎片,可以确定硫酸基的连接位置.这些规律和方法的总结为未知寡糖的结构和序列的分析提供了启发和指导.     

糖类化合物的构型和标记法

糖类化合物的构型和标记法林宝凤（广西农业大学基础部南宁５３０００５）糖类化合物是在自然界中分布最广的一类有机化合物，与人类和动植物的生命活动息息相关。因此，对于糖类化合物的结构识别是十分重要的基础知识。单糖是糖类化合物的结构基础，其中单糖构型的判断是...     

糖的基质辅助激光解吸/电离质谱(MALDI-MS)研究

通过糖类化合物3种常用基质MALDI-MS分析效果的比较以及寡糖和多糖正、负离子MALDI-MS谱的对比,找到了适合糖分析的基质2,5-DHB,探讨了糖类化合物激光解吸/电离条件下形成离子的过程,指出了Na⁺、K⁺离子在寡糖分子量测定中的重要作用,借助柱层析分离手段,成功地测出了分子量大于10000的葡聚糖的分子量。     

1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生中药寡糖的毛细管区带电泳分离

建立了一种可用于中药寡糖分离的毛细管区带电泳(CZE)分析方法。分离条件: 未涂层熔融石英毛细管柱(48 cm×50 μm,有效长度38 cm),紫外检测波长245 nm,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)为寡糖衍生试剂,50 mmol/L磷酸盐溶液(pH 2.5)为运行缓冲液,电压15 kV,重力进样10 cm×2 s。针对中药寡糖实际样品的复杂性,通过添加多种常见单糖进行方法的实用性验证,并且将方法用于板蓝根多糖的控制降解产物的分离。结果表明,板蓝根寡糖组分可按相对分子质量从小到大的顺序分离,分离效果令人满意。该分离方法操作简单、高效,可用于中药寡糖实际样品分析。另外,还对单糖、寡糖PMP衍生物的电泳迁移行为进行了初步的理论探讨。     

高效液相色谱法测定啤酒、发酵液和麦汁中的糖类和乙醇

Cheethan和Rajkyla提出以十八烷基修饰的硅胶作为固定相,以纯水作洗脱液,来分离单糖和寡糖,类似方法应用于啤酒工业分析的国内报道,仅见一篇文章,国外文献报道、美国酿造化学家协会(ASBC)和欧洲酿造协会(EBC)推荐的高效液相色谱法(HPLC),多采用阳离子交换柱分析酿造用辅料,麦汁,发酵液,啤酒中的糖类.目前国内大啤酒厂多采用啤酒分析仪测定乙醇,很少采用气相色谱法(GC)和液相色谱法(HPLC).采用GC直接测定乙醇含量,由于啤酒中乙醇含量远高于其它杂醇油,GC法测定杂醇油时,难以定量测定乙醇,除非采用填充柱,单独测定乙醇.本文方法采用Nucleosil C18柱,测定啤酒,发酵液和麦汁中的糖类时,同时测定乙醇.     

超高效液相色谱-轨道阱高分辨质谱法对人参寡糖提取物与蓖麻凝集素120相互作用的研究

利用超高效液相色谱-轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Orbitrap-MS)结合链霉亲和素包被的96孔板的方法筛选人参复杂体系中蓖麻凝集素120 (RCA 120)的寡糖结合剂。将RCA 120修饰的96孔板与溶菌酶修饰的96孔板分别与寡糖标准品孵育,对未结合的寡糖利用UHPLC-Orbitrap-MS进行分析,利用峰面积的变化表征寡糖是否与RCA 120发生相互作用。对影响亲和力的因素包括孵育时间、孵育温度和缓冲液等进行了优化。在优化条件下,对生晒参、红参和西洋参的寡糖提取物进行RCA 120结合剂的筛选,从生晒参中筛选出3种二糖化合物和2种三糖化合物,从西洋参中筛选出2种二糖化合物和2种三糖化合物,发现生晒参和西洋参中具有相同单糖残基的寡糖与RCA 120的结合强度均具有显著性差异。但是,从红参中未筛选到RCA 120结合剂,推测这是由红参炮制工艺导致的差异。本方法简单、快速、准确,可高通量地识别和筛选复杂体系中多个糖类组分与蛋白质的相互作用,为糖和蛋白质相互作用的研究提供了新方法。     

糖聚肽高分子的合成、自组装及生物医学应用

糖聚肽高分子是一类由聚肽(也称聚氨基酸)和糖类化合物(包括单糖、寡糖和多糖)构成的生物可降解高分子.糖聚肽高分子具有与天然糖蛋白分子类似的化学组成,能够在一定程度上模拟天然糖蛋白的结构和性能,近年来引起了学术界的广泛研究兴趣.本文总结了糖聚肽高分子的合成方法及其在水溶液中的自组装行为,并着重评述了糖聚肽高分子在生物分子识别、靶向基因/药物传输和组织工程支架等生物医学领域中的应用.     

糖的基质辅助激光解吸／电离质谱（MALDI—MS）研究

通过糖类化合物３种常用基质ＭＡＬＤＩ－ＭＳ分析效果的比较以及寡糖和多糖正，负离子ＭＡＬＤＩ－ＭＳ谱的对比，找到了适合糖分析的基础２，５－ＤＨＢ，探讨了糖类化合物激光解吸／电离条件下形成离子的过程，指出了Ｎａ＾＋，Ｋ＾＋离子在寡糖分子量测定的重要作用，借助柱层析分离手段，成功地测出分子量大于１００００的葡聚糖的分子量。     

单糖衍生物的电喷雾质谱裂解规律研究

以1-(2-萘基)-3-甲基-5-吡唑啉酮(NMP)作单糖标识剂, 经在线串联的LC-ESI-MS建立了单糖衍生物的电喷雾质谱裂解方法.衍生物在质谱裂解中糖类化合物特有的规范信息.借助糖类化合物在ESI-MS条件下表现出的分子离子峰m/z [M H] , 及在ESI-MS/MS条件下呈现出的特征碎片离子峰m/z 473, 可有效地确定出单糖类化合物的组成. 尽管一些脂肪醛和芳香醛也能同时被标识, 然而在质谱条件下不产生m/z 473的特征碎片离子峰, 且它们的洗脱远在糖类组分之后, 因此不干扰糖类化合物的分离和结构确定.通过建立的LC-ESI-MS方法, 对水解蜂花粉中的单糖进行了分析.结果表明: 水解的蜂花粉中含甘露糖(Man)、半乳糖醛酸(GalUA)、葡萄糖醛酸(GlcUA)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖 (Glc)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xyl)和岩藻糖(Fuc).本方法为环境样品中单糖类化合物的确定提供了准确、可靠的技术手段.     

糖类化合物PMP衍生分析进展

糖类物质的结构与组成分析在揭示其生物学功能方面发挥着重要作用,糖类化合物的衍生化分析是实现其高灵敏度定性和定量检测的有效方法。该文对一种条件温和、灵敏度高、选择性好的1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)的衍生化分析方法在糖类化合物的单糖组成、聚合度、取代度、异构体分析以及在N/O-糖链的释放和定量分析等方面的应用进展进行了综述。     

高效液相色谱法测定寡糖链结构

以葡聚寡糖为模型分子，经甲基化，乙酰氯／盐酸裂解，( )-MNB甲酸荧光衍生化及高效液相色谱分析，建立一种新的寡糖链结构分析方法。该方法可以同时获得组成单糖种类、糖链分支位点及组成单糖的D，L-陶型3种结构信息。操作简单，分析灵敏度为0．2pmol，分析周期在5h以内。     

痕量糖-8-氨基芘-1,3,6-三磺酸衍生物的毛细管电泳-激光诱导荧光分析

以芘为原料经磺化、氨化合成了８－氨基芘－１,３,６－三磺酸钠盐（ＡＰＴＳ）,建立了相应的纯化方法,考察了多种条件对还原单糖衍生效率的影响,研究单糖及葡聚糖水解寡糖－ＡＰＴＳ衍生物的毛细管电泳－激光诱导荧光分离与检测,单糖的检测限在ａｍｏｌ（１０＾－１８）水平。     

单糖类化合物改性聚乳酸的研究进展

聚乳酸（PLA）作为一种性能良好的生物可降解材料,在生物医用高分子等方面有着广泛的应用。单糖类小分子对多肽、蛋白质等具有较好的亲和性,对组织细胞也有较好的相容性。为了改善PLA的亲水性、细胞相容性等性能,利用单糖类化合物改性聚乳酸日益受到关注。按照单糖种类的不同,本文综述了近年来各类单糖及其衍生物等改性聚乳酸的研究进展...     

阿拉伯、半乳和果呋喃寡糖的生物来源及合成进展

由呋喃型阿拉伯糖、半乳糖和果糖构成的寡糖及其糖缀合物广泛分布于自然界,主要存在于植物和低等生物,如细菌、原生动物、真菌,是细胞壁糖肽、糖脂和核苷酸糖类的重要组成部分,具有广泛的生物学意义,其合成和化学生物学研究一直备受关注.综述了近年这些呋喃寡糖的生物来源及合成研究进展.     

海带褐藻多糖硫酸酯的降解与岩藻寡糖的制备

采用稀酸水解的方法降解粗褐藻多糖硫酸酯(FPS)制备了硫酸化岩藻寡糖.通过考察降解及沉降条件研究了FPS的水解及沉降规律.通过理化性质分析发现,沉降所得上层清液为杂合硫酸化岩藻寡糖[岩藻糖(Fuc)含量55%].进一步采用Bio-Gel P4低压凝胶渗透色谱分离纯化,得到4种以岩藻糖为主的低聚合度硫酸化寡糖.单糖组成分析和电喷雾质谱(ESI-MS)分析结果表明,各组分主要为系列低聚合度硫酸化岩藻寡糖或硫酸化岩藻糖,包括Fuc_(1~3)S_(1~3),Fuc_(1~2)S_(1~2),Fuc_(1~2)S_1及FucGlcAS.     

杂合褐藻糖胶寡糖的制备及结构分析

采用热水提取法从海蒿子(Sargassum pallidum)中得到一个杂合的褐藻糖胶(SPF); 采用稀酸水解和低压凝胶渗透色谱(LPGPC)分离得到一系列杂合硫酸寡糖. 结合单糖组成、 甲基化和电喷雾碰撞诱导串联质谱(ES-CID-MS/MS)分析表明, 所得21个寡糖属于杂化岩藻寡糖硫酸酯, 主要由α1→3连接的Fuc及少量β1→4连接的Xyl和β1→6连接的Gal组成; 硫酸基取代位点主要存在于Fuc的C4或C2位、 Xyl的C2位和Gal的C4位; Fuc主要存在于寡糖的非还原端. 实验结果表明, ES-CID-MS/MS 技术可用于各种杂合褐藻糖胶寡糖的结构序列分析. 这些结构多样的硫酸寡糖可进一步点印到糖芯片上, 研究其与蛋白相互作用.