脂肪胺荧光衍生物的高效液相色谱分离及质谱鉴定

采用新型荧光衍生试剂2-(9-吖啶酮)-乙酸(AAA)进行柱前衍生并经荧光检测对脂肪胺进行了高效液相色谱(HPLC)分离和在线质谱定性.衍生物荧光激发和发射波长为λex=404nm,λem=440nm.30℃下在乙腈溶剂中用N-乙基-N′-[(3-二甲氨基)丙基]碳二亚胺盐酸盐(EDC)做催化剂,衍生反应20min后获得稳定的荧光产物.在HypersilBDSC18(4.6mm×100mm,5μm)色谱柱上,采用梯度洗脱对12种脂肪胺衍生物进行了优化分离.采用大气压化学电离源(APCISource)正离子模式进行在线柱后质谱定性,实现了各种脂肪胺衍生物的快速、准确测定.该方法具有良好的重现性,多数脂肪胺的线性回归系数大于0.9996,检测限为12.09~25.52fmol.     

1-(2-萘基)-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生试剂的制备及其在高效液相色谱-质谱法测定糖类化合物中的应用

以1-(2-萘基)-3-甲基-5-吡唑啉酮(NMP)作为柱前衍生试剂,建立了简单、灵敏的糖类组分的反相高效液相色谱测定方法。NMP与糖在氨为催化剂的条件下,于70 ℃下反应可获得稳定的衍生产物。在Hypersil ODS 2反相色谱柱上,实现了8种单糖的基线分离。衍生物线性相关系数均大于0.9985,检出限为0.58～1.1 pmol。利用柱后在线串联质谱的电喷雾电离正离子模式监测,获得了各组分的质谱定性及裂解规律,特别是m/z 473的特征碎片离子可作为单糖NMP衍生物的判定依据。与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)相比,NMP对糖的衍生化具有灵敏、简单、质谱裂解规律性强、重现性好等优点。该方法用于测定油菜花粉多糖中的单糖组成,结果令人满意。     

EASC荧光标记和LC-APCI-MS检测环境水样中游离脂肪胺

采用新型荧光标记试剂10-乙基吖啶酮-2-磺酰氯(EASC)作为柱前衍生试剂, 在Hypersil BDS C18反相色谱柱上(4.6 mm×200 mm, 10 μm i.d.), 采用梯度洗脱在20 min内实现了12种EASC-脂肪胺衍生物的快速基线分离. 最佳检测波长为λex/λem=270 nm/430 nm. EASC与常用的Dansyl-Cl相比具有更强的光致发光特性(紫外和荧光): 紫外吸收强度之比为3.2∶1, 相对荧光强度之比为30.0∶1~105.4∶1, 荧光量子效率之比为43.0∶1. 通过荧光检测及离子阱大气压化学电离源的正离子模式获得了胺类组分的准确定量和相应的柱后质谱鉴定. 质谱灵敏度之比为1.6∶1~6.2∶1. 建立的方法对环境水样中脂肪胺类化合物的测定具有快速、准确和重现性良好等优点, 回归系数大于0.9995, 检出限为4.0~12.7 fmol.     

新型衍生化试剂雌激素衍生物的大气压化学电离质谱增敏研究

合成了用于酚羟基化合物衍生化试剂10-乙基吖啶酮-2-磺酰氯(EASC),EASC与雌二醇和雌三醇, 在pH=10.5 的NaHCO3缓冲溶液中、60 ℃下反应3 min可获得稳定的衍生产物. EASC与丹磺酰氯(Dansyl-Cl)相比:最大摩尔吸光系数之比UVEASC/UVDansyl-Cl = 6.67;荧光量子效率之比Φf(EASC)/Φf(Dansyl-Cl)=43,对雌二醇和雌三醇标记后的质谱离子流强度比为:ICEASC/ICDansyl-Cl = 4.98(雌二醇) 和 ICEASC/ICDansyl-Cl = 4.51(雌三醇).在LC-MS-APCI (MRM)模式下,能够高灵敏地实现雌二醇和雌三醇的快速质谱测定.建立的方法具有良好的重现性,回归系数大于0.9995;检出限分别为4.3 ng/L(雌二醇)和14 ng/L(雌三醇).对实际样品中藏羚羊粪便、根田鼠尿样和狼血清中痕量游离的雌二醇和雌三醇进行了测定,结果满意.     

2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑)-乙氧基]-乙基氯甲酸酯对脂肪胺类化合物的荧光标记及质谱鉴定

利用新型荧光标记试剂2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑-乙氧基)-乙基氯甲酸酯作为柱前衍生化试剂, 在Eclipse XDB-C8反相色谱柱上,采用梯度洗脱,实现了12种脂肪胺类化合物完全基线分离.检测最佳激发和发射波长分别为300和400 nm.通过荧光检测及离子阱大气压化学电离源(APCI Source)正离子模式实现了在线的柱后质谱鉴定.对土壤中脂肪胺类化合物的测定快速、准确,具有良好的重现性.荧光定量检测的回归系数大于0.9991; 检出限为10.1～0.3 fmol.     

藏羚粪便中雌激素的提取及高效液相色谱含量测定

以CHCl3为萃取剂,从藏羚粪样中提取雌二醇、雌三醇两种雌激素.以丹磺酰氯为柱前衍生试剂,60 ℃下在加入NaHCO3缓冲液的乙腈溶液中反应3 min,得到稳定的衍生产物.在HypersiL BDS C18 (4.6 mm×200 mm,5 μm)色谱柱上,采用梯度洗脱对雌二醇和雌三醇衍生物进行了基线分离,紫外检测波长为220 nm.衍生物线性相关系数均大于0.9994,检出限为0.16～0.64 pmol.本实验建立了粪样中激素的提取和含量测定的方法,为极端环境下藏羚繁殖生物学的研究奠定基础.     

污水中脂肪胺荧光衍生物的高效液相色谱分离及质谱鉴定

利用新型荧光试剂1,2-苯并-3,4-二氢咔唑-9-异丙基氯甲酸酯(BCIC)作为柱前衍生化试剂,在乙腈中,以硼酸钠缓冲液(pH 9)为催化剂,40 ℃下衍生反应10 min后获得稳定的荧光产物.在Eclipse XDB-C8色谱柱上,通过梯度洗脱对12种游离脂肪胺进行了分离和在线质谱定性.激发和发射波长分别为λex=333 nm,λem=390 nm.采用大气压化学电离源(APCI)正离子模式,实现了污水中脂肪胺的定性及相应含量测定.脂肪胺的线性回归系数大于0.9996,检出限在10.57～37.83 fmol.     

高效液相色谱检测反—2—苯基—邻—硝基肉桂酸

初探了反－２－苯基－－肖基肉桂酸（ＰＮＣＡ）的高效液相色谱分离。优选出了最佳分离条件。所建立的方法简单、快速，适用于工业生产中的控制及分析。     

9-(2-羟乙基)-吖啶酮柱前衍生胆汁酸高效液相色谱分析

采用一种新型紫外、荧光衍生试剂 9 ( 2 羟乙基 ) 吖啶酮 (HEA) ,在缩合剂 1 乙基 3 ( 3 二甲氨丙基 ) 碳酰二亚胺 (EDC·HCl)及碱性催化剂 4 二甲氨基吡啶 (DMAP)的存在下 ,对 1 0种胆汁酸进行柱前衍生 ,并通过荧光检测的方法进行高效液相色谱 (HPLC)分析。在HypersilBDSC18柱上 ,采用梯度洗脱 ,1 0种胆汁酸衍生物获得了基线分离 ,衍生物的激发和发射波长为λex/λem=40 4/44 0nm。衍生产物稳定性好 ,检测灵敏度高 ,按信噪比S/N =3∶1 ,平均检出限可达 8.3fmol。     

氨基酸柱前衍生化的3种新荧光试剂的光谱特性及高效液相色谱研究

合成了３种新的荧光标记试剂：吖啶－Ｎ－乙酰氯，咔唑－９－乙酰氯和咔唑－９－丙酰氯。它们的最大发射降激发波长分别为４３０ｎｍ，３６８ｎｍ，和３６５ｎｍ。３种衍生化试剂与氨基酸形成的衍生物在ｐＨ６．５的条件下结合梯度洗脱程序在Ｃ１８反相柱上对色谱条件进行了优化。