虎杖和大黄中α-葡葡萄糖苷酶抑制剂的超滤质谱研究

通过体外酶活性实验结合离心超滤LC-ESI-MSn技术从富含蒽醌类成分的中药虎杖和大黄提取物中筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂。首先,以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,对虎杖和大黄提取物的体外酶抑制活性进行了初步评价,结果表明,虎杖和大黄提取物对α-葡葡萄糖苷酶的半抑制浓度分别为0.027和0.050 g/L。其次,利用离心超滤技术对虎杖和大黄提取物种的潜在的α-葡葡萄糖苷酶抑制剂进行了筛选,并通过LC-ESI-MSn对筛选得到的潜在抑制剂结构进行了鉴定,结果显示,虎杖和大黄中各鉴定得到12和7种,共计16种活性小分子成分。其中大黄素等7种化合物属于蒽醌类;虎杖苷等5种化合物属于多元酚类;莲花掌甘等4种化合物都具有没食子酰基取代基。结果表明,蒽醌类化合物具有较好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,可以为开发新的安全有效的富含蒽醌类成分的中药降糖药物奠定基础。     

微透析/液相色谱-质谱联用筛选黄芩中α-葡萄糖苷酶抑制剂

应用微透析/液相色谱-质谱联用法筛选黄芩中α-葡萄糖苷酶抑制剂,并对筛选出的具有酶抑制活性的化合物进行结构鉴定。实验采用迪马C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以0.5%醋酸水-乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.5 mL/min,柱温30℃,以正离子电喷雾质谱模式采集数据,从黄芩中筛选出10种潜在的α-葡萄糖苷酶抑制剂,10种化合物与α-葡萄糖苷酶的结合率为36.18%~52.71%。该方法可快速、有效地筛选黄芩中的α-葡萄糖苷酶的抑制剂,同时可为从其他中药中筛选酶抑制剂提供方法学借鉴。     

银杏叶中α-葡萄糖苷酶抑制剂的超滤质谱筛选

采用体外酶抑制活性检测方法结合超滤质谱(UF-LC/MS)筛选方法对中药提取物中的α-葡萄糖苷酶抑制剂进行了筛选.以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,阿卡波糖为阳性对照药,对5种富含黄酮类化合物的中药提取物进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性的初步测定.结果表明,银杏叶具有最强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,可作为进一步复筛的对象.利用超滤质谱技术对银杏叶中潜在的α-葡萄糖苷酶抑制剂进行了筛选,从中筛选出4种潜在的α-葡萄糖苷酶抑制剂,并利用液相色谱-串联质谱技术(LC-MSn)对其结构进行了鉴定.本文结果为开发新一代安全有效的降糖药物奠定了基础.     

超滤亲和结合液相色谱-质谱联用和分子对接技术筛选毛菊苣种子中高亲和性α-葡萄糖苷酶抑制剂

采用超滤亲和结合液相色谱-质谱联用(UF-LC-MS) 和分子对接技术筛选毛菊苣种子中高亲和α-葡萄糖苷酶抑制剂.以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,阿卡波糖为阳性对照,评价毛菊苣种子提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,其中阿卡波糖IC50为0.003 mg/mL,毛菊苣种子IC50为0.447 mg/mL.利用UF-LC-MS技术对毛菊苣种子提取物进行筛选鉴定,获得4种化合物;通过Autodock软件筛选出2种与α-葡萄糖苷酶有较高亲和力的化合物,分别是绿原酸和异绿原酸A.结合体外酶活实验,验证了绿原酸、异绿原酸A对α-葡萄糖苷酶的抑制活性.结果表明,各化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性由大到小依次是:阿卡波糖>异绿原酸A>绿原酸,其中异绿原酸A与阿卡波糖抑制率相近.     

三种抗坏血酸糖苷的合成及其α-糖苷酶抑制活性

2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2βG)是从枸杞中分离得到的一种天然抗坏血酸糖苷化合物,通过化学方法合成了AA-2βG及其两种类似物,并用商品化的阿卡波糖作为阳性对照,研究了三种抗坏血酸糖苷对酿酒酵母α-葡萄糖苷酶和猪胰腺α-淀粉酶的活性影响.结果显示,三种抗坏血酸糖苷对α-葡萄糖苷酶有显著的抑制作用,对α-淀粉酶抑制作用不明显,说明这三种抗坏血酸糖苷具有作为α-糖苷酶抑制剂开发的潜质.     

烟草中5种糖苷类化合物的液相色谱-质谱联用分析

采用反相高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)联用技术分析了烟草提取液中的5种糖苷类化合物.将烟叶烘干、磨碎后用95%乙醇提取,提取液用正己烷-乙醚(体积比1∶1)除去油脂,水层经大孔树脂分离除杂后,进HPLC-MS分析,获得了5种糖苷类化合物的结构信息.通过对相对分子质量及碎片离子结构信息的解析,推测5种糖苷类化合物分别为:α-紫罗兰醇-β-D-葡萄糖苷、3-氧代-α-紫罗兰醇-β-D-葡萄糖苷、4-羟基-α-紫罗兰醇-β-D-葡萄糖苷、3-羟基-β-大马酮-β-D-葡萄糖苷和地黄普内酯-β-D-葡萄糖苷.     

FAAS法分析当归、黄芪及当归补血汤中金属元素的形态

采用正辛醇-水分配体系模拟中药水煎液在人体肠胃中的分配情况,应用火焰原子吸收光谱法测定了当归、黄芪及当归补血汤中锌、铁、锰、铜、镁、钙、镍7种金属元素在药材中的总含量,以及水煎液中各金属元素的水溶态、醇溶态含量,探讨了配伍和酸度对水煎液中金属元素含量的影响。实验结果表明,中药中金属元素的形态与中药成分、配伍情况及作用靶位(肠胃)的酸度有关,配伍及酸度对中药中金属元素的溶出率及水煎液中金属元素的形态影响较大。     

PM_(2.5)中金属元素提取方法的对比研究

对各金属含量已知的国家标准土样经PM2.5悬浮箱再悬浮并用Teflon滤膜和石英纤维滤膜对其进行采集,采用6种方法对滤膜上PM2.5中金属元素Ca,Mg,Na,K进行提取并计算其提取率,将实验室获得的最佳提取方法应用到大气环境以检验提取方法的适用性。结果显示:石英纤维膜上PM2.5中金属元素较Teflon滤膜更易提取;各种酸提法的提取效果优于水提法;HClO4法是Teflon滤膜上PM2.5中金属元素提取率最高的提取方法;除文献法提取Ca外,HF法对石英纤维膜上PM2.5中其它金属元素的提取效果最好;实验室获得的PM2.5中水溶性金属离子的最佳提取方法同样适用于大气环境。     

肉桂挥发油的超临界CO2萃取法与水蒸气蒸馏法提取的比较分析

采用超临界CO2萃取法与水蒸气蒸馏法从肉桂中提取挥发油,用GC-MS法测定其化学成分和相对含量,对两种提取方法所得的挥发油进行比较,水蒸气蒸馏提取肉桂挥发油的产率为1％(ω),主要成分为肉桂醛、α-芹子烯、α-（王古）Ba烯、δ-杜松烯;超临界CO2萃取法提取的产率为1．5％(W),主要成分为肉桂醛、α-玷圯烯、α-依兰油烯、δ-杜松烯等。     

葛花中异黄酮类活性成分的分离及鉴定

建立了快速分离及鉴定葛花中活性化合物的方法。采用70%乙醇加热回流提取得到葛花提取物,以α-葡萄糖苷酶和乳酸脱氢酶作为生物靶分子,以超滤质谱技术筛选酶抑制剂。运用高速逆流色谱分离纯化所得酶抑制剂,以乙酸乙酯-乙醇-水(4.0∶0.5∶3.0,V/V/V)组成三元溶剂体系,从200 mg葛花粗提物中,一次性分离制备得到2.36 mg葛根素、8.57 mg鸢尾苷、5.34 mg染料木苷,经高效液相色谱分析其纯度均达到90.0%以上。该三个化合物均可与α-葡萄糖苷酶及乳酸脱氢酶亲和,具有潜在的抗糖尿病及抗脑卒中的活性。通过液-质联用技术及核磁共振波谱技术确定了每个化合物的结构。该方法简单、快速、高效,分离样品纯度高,适用于葛花中异黄酮类活性化合物的分离纯化及鉴定研究。     

气相色谱-质谱联用法结合保留指数对高良姜挥发油成分的分析

采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法结合保留指数(RI)对高良姜水蒸气蒸馏法(SD)、超声波辅助溶剂提取法(UAE)和亚临界流体萃取法(SFE)所制备的挥发油进行分析,分别鉴定出51,46和60个挥发性组分,并通过峰面积归一化法确定各组分的相对含量。结果表明,高良姜挥发油的指标性成分1,8-桉叶素含量的大小顺序为SD法≈SFE法UAE法,UAE法虽耗时少、能耗低,但由于所用有机溶剂难去除,所得挥发油品质较差。SFE法可得到部分SD法无法得到的化合物,如2-羟基-1,8-桉叶素、二苯基庚烷类等。另外β-石竹烯、α-石竹烯、α-法尼烯、γ-杜松烯等高沸点组分比例,SFE法所得高于另两种方法;α-蒎烯、莰烯、β-蒎烯、柠檬烯、樟脑和α-松油醇等低沸点组分比例,SD法所得最高。同一批药材不同提取方法所得的挥发油成分大部分相似,但部分成分与组分比例因不同提取方法的原理存在差异,实际生产中可根据功效需求选择不同提取方法加以开发利用。     

电感耦合等离子体原子发射光谱测定当归补血汤中铅、铬、镉、砷

采用电感耦合等离子体原子发射光谱测定了当归、黄芪及两种药材不同配伍形式的水煎液中铅、铬、镉、砷等金属元素含量。比较了不同提取方法及磷脂类化合物对当归补血汤中这些金属元素溶出的影响。实验表明,当归、黄芪生药材及水煎液经硝酸消化,样品消解完全,能满足电感耦合等离子体-原子发射光谱(ICP-AES)检测的要求。方法加标回收率为83.0%~96.0%,相对标准偏差为0.36%~4.67%,且当归∶黄芪配比为1∶5时水煎液中重金属元素溶出率低于1∶1配比,证实了当归补血汤经典配方的合理性,为其临床疗效提供了有效依据。     

4H-3,1-苯并噁嗪-4-酮衍生物的合成及α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

为了探索高效低毒的新型α-葡萄糖苷酶抑制剂,设计并合成了一系列4H-3,1-苯并噁嗪-4-酮衍生物,其结构经过¹H NMR、¹³C NMR和HRMS鉴定。体外α-葡萄糖苷酶抑制活性测定结果表明,化合物3a、4a、5a和4j的IC₅₀值分别为68.3、76.1、99.3和51.9μmol/L,明显优于阳性对照阿卡波糖(IC₅₀=421.7μmol/L)。此外,分子对接研究结果表明化合物3a和4j与α-葡萄糖苷酶存在较强的亲和力。     

两亲嵌段共聚物聚D-亮氨酸-聚乙二醇与非离子表面活性剂C_(12)Glu的相互作用

采用表面张力法和圆二色谱技术研究了两亲嵌段共聚物聚D-亮氨酸-聚乙二醇单甲醚/非离子表面活性剂n-十二烷基β-D-葡萄糖苷(C12Glu)混合体系在水溶液中的相互作用.结果表明二者之间的疏水缔合作用较弱;聚合物中α-螺旋结构的含量随着体系中表面活性剂浓度的增大而增加.     

悬浮液进样-石墨炉原子吸收光谱法测定中药中铜和铅的溶出率

正中药中通常含有一些微量元素~([1]),这些微量元素会在煎药过程中溶入药水中被人体摄入,只考察中药中的微量元素含量并不全面,必须对中药中各元素的含量和其在水煎液中的溶出量~([2])同时考查才有意义。文献[3-6]报道了对中药进行湿法消解后采用火焰原子吸收光谱法对其中金属元素进行测定,文献[2,7]报道了对中药进行湿法消解后采用石墨炉原子吸收光谱法对其中金属元素进行测定,未见通过悬浮液进样采用石墨炉原子吸收光谱法测定     

PM_(2.5)中金属元素消解方法的优化

本文对5种目前常用于PM_(2.5)中金属元素消解的酸进行6种不同组合,研究各方法对Teflon滤膜上PM_(2.5)中Zn、Cu、Pb 3种金属元素的提取效果,并依据所得结论对最佳方法采用H_2O_2进行进一步优化。结果显示HNO_3+HF+HClO_4是6种消解方法中的最佳方法;HClO_4对上述3种金属元素提取的贡献最显著,HF次之,HCl最差,H_2O_2只对Zn提取效果良好;作用机理不同的酸混合使用对PM_(2.5)中金属元素的提取更加有利;加入H_2O_2得到的优化方法在提高金属元素提取效率的同时,能在一定程度上消除其它酸对仪器检测的干扰,可用于PM_(2.5)金属元素的全量分析。     

乙醇-硫酸铵双水相萃取荧光法测定痕量α-萘乙酸

提出了一种基于有机溶剂-盐-水体系双水相萃取、荧光法测定痕量α-萘乙酸的新颖而简便的方法.研究了包括盐及有机溶剂的种类和用量、α-萘乙酸的荧光光谱和浓度、萃取时间、共存物和pH等的影响.在最佳萃取体系乙醇-(NH4)2SO4-H2O中,测定α-萘乙酸的线性范围2.4×10-7～5.2×10-6 mol/L,检出限7.8×10-9 mol/L.方法用于强化水样和大米样品中痕量α-萘乙酸的测定,回收率95%～103%,相对标准偏差2.2%～4.3%.     

超声提取-改进BCR法测定PM_(2.5)中6种重金属元素的化学形态

应用改进的BCR法对大气微颗粒物(PM2.5)进行分析,用超声法代替原来的机械振荡法,对所采得的微颗粒物样品中6种重金属元素(铜、锌、铅、镉、镍、铬)的4种化学形态(酸可交换态F1,可还原态F2,可氧化态F3及残渣态F4)进行分别提取,所得各形态溶液中的金属元素含量用电感耦合等离子体质谱法测定。结果表明:超声提取法的提取时间仅为30min(对F1及F2)和20min(对F3),而原方法需16h;而且超声提取的效率较高,是原方法的89.5%~133%;6种元素的化学形态测定结果的相对标准偏差(n=8)均小于25%。此外,样品中的元素形态总量(ng·m-3)与元素全量(ng·m-3)之间的偏差在-30.7%~-11.5%之间。     

亲和超滤耦联液相色谱-质谱快速检测山楂叶中的α-淀粉酶抑制剂

建立了用于快速检测山楂叶中α-淀粉酶抑制剂的生物亲和超滤方法。考察了磷酸盐缓冲液的pH值、离子强度、孵育时间、孵育温度、α-淀粉酶浓度等影响亲和超滤的因素,最终选择了10 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.4)作为孵育溶液,在37℃孵育45 min,淀粉酶浓度为10 g/L。在优化条件下,将本法应用于山楂叶总黄酮的α-淀粉酶抑制剂的筛选,得到3个活性成分,分别鉴定为槲皮素-3-o-鼠李糖基-(1→4)-葡萄糖基-(1→4)-鼠李糖苷、牡荆素-2″-葡萄糖苷、牡荆素-2″-鼠李糖苷。这3个化合物的α-淀粉酶抑制活性为首次报道。     

铑在氯化十六烷基吡啶-硫氰化钾-硫酸铵体系中的浮选分离和富集

<正>铑是一种十分稀有的贵金属元素,准确测定组成较复杂样品中痕量的铑,必须要进行分离和富集。分析化学领域中有很多分离和富集金属离子的方法,液-液萃取由于操作方便和使用设备简单,是常优先使用的方法之一。但萃取铑的传统方法是用苯、乙醚、异丁基甲基酮和二甲苯等不溶于水的有机溶剂作萃取剂[1],这些挥发性较强的有机溶剂毒性较大,在萃取过程中将影响操作人员的健康,也会污染环境。另外,这些有机溶剂都不溶于水,萃取时有机溶剂浮在样品溶