用薄层-植物酶抑制技术测定甲胺磷残留量

利用酶抑制技术检测微量有机磷农药,一般均采用牛、鼠、羊、兔、猴、鸡、猪等动物酶源,鉴于植物种子、根、茎、叶、花、果实中含有的水解酶,同动物酯酶一样,其活力亦能被有机磷所抑制,作者摸索了面粉等植物酶在薄层板上进行酶化学反应来检测甲胺磷残留量的可行性,结果令人满意。 1.方法原理:甲胺磷在薄层板上被展开后,喷洒植物酶溶液,在斑点部位植物酶被农药抑制,而在斑点之外,酶的活性未被抑制,生成了基质水解产物,与特定试剂呈现有色反应,因此,在喷洒基质溶液后,斑点是白色,而背景显玫瑰红色。     

植物酯酶法检测有机磷农药残留量研究

对植物酯酶作为抑制剂检测有机磷农药的体系进行了研究，采用均匀设计法优化了检测条件；对可能影响酶活的干扰因素进行了分析；比较了7种有机磷农药对酶的抑制作用；建立了利用植物酯酶检测有机磷农药的方法，并应用于蔬菜样品中有机磷残留量检测。     

乙酰胆硷在猕猴额叶神经元认知功能中的作用

本文为研究乙酰胆硷在大脑额叶认知功能中的作用,在4只猕猴进行作业操作时,在额叶弓状沟上支周围皮层区记录了作业相关神经元的电活动,观察了微量电泳乙酰胆硷和阿托品的效应。在辨别反应作业的延缓期和辨别期,和在延缓辨别作业的暗示期和延缓期放电增多的神经元,绝大多数在电泳乙酰胆硷时自发放电增多,作业相关反应增强。电泳阿托品则出现相反的效应。实验结果提示,大脑额叶弓状沟上支周围区神经元在实现其注意、辨别和短期记忆等认知功能中,乙酰胆硷可能起着重要作用,而且主要参与神经活动的兴奋过程。     

电动流动分析和酶抑制法测定池塘水中农药残留折合总量

用电动流动分析和酶抑制法测定池塘水中有机磷和氨基甲酸酯农药残留折合总量。电动流动分析系统由一台自制电渗泵和4个电磁切换阀组成,由计算机编程控制。酶抑制法用面粉酯酶,有机磷和氨基甲酸酯农药作酶抑制剂,底物的酶解产物与显色剂反应,用分光光度计在524 nm检测。有机磷和氨基甲酸酯农药的折合浓度对数线性范围为0.02~0.20 mg/L乐果,检出限为0.01 mg/L乐果,每小时可测24个样品。氨基甲酸酯在80℃完全水解,而有机磷部分水解,据此可判断农药类别。     

猪肝DFP酸催化水解反应产物的等速电泳分析

DFP酸可催化水解二异丙基氟磷酸酯（DFP）分子中的P－F键,使其断裂产生磷酸二异丙基酯和HF。根据电位滴定法和离子选择电极法对猪肝中发现的两种DFP水解酶活力测定的结果,利用毛细管等速电泳分析仪对这两种酶催化DFP水解的产物进行了定性分析。结果表明,猪肝中小分子质量的酸催化DFP水解反应时,并非水解P－F键．而是水解P－OR键,说明该酶是一种催化DFP分子中磷酯健水解的磷酯酶。     

虫草素的合成

以腺苷为原料经原酸酯环化和乙酰溴水解原酸酯、自由基还原脱溴及水解乙酰基等3步反应合成了虫草素——3'-脱氧腺苷,总收率29.8%,纯度95%,其结构经1H NMR和MS确证。     

希夫碱型大环多胺锌配合物对α-吡啶甲酸对硝基苯酚酯催化水解的研究

酶是具有催化活性中心的复杂蛋白质,酶催化反应以其高效性、专一性及反应条件温和而引起人们的极大兴趣.自然界中存在着多种水解金属酶如羧肽酶、碱性磷酸酯酶、碳酸酯酶等,它们能水解蛋白质、磷酯、DNA、RNA等生命物质,是生命过程中不可缺少的重要物质,其催化活性中心由金属离子和若干有机功能团构成.     

乙酰水扬酸在CTAB胶束溶液中的水解反应

乙酰水扬酸(阿斯匹林)具有较高的药用价值,对它的性质有较多的研究,如在水中的稳定性和水解等。乙酰水扬酸有一个脂键和一个羰基。脂键易水解,水解后药用价值虽未降低,但有很大的副作用,因而研究抑制乙酰水扬酸水解是很有意义的。本文用RD—Ⅲ型热导式自动量热计研究了在十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)胶束溶液中乙酰水扬酸的水解反应热动力学。     

双环多胺锌（Ⅱ）配合物对水解酶的模拟研究

双环多胺锌（Ⅱ）配合物对水解酶的模拟研究陈万东，朱守荣，林华宽，陈荣悌（南开大学化学系，天津３０００７１）自然界中有很多具有水解功能的金属酶。它们能水解蛋白质、磷脂、ＤＮＡ等重要的生命物质，在生物过程中起着极为重要的作用。由于此类酶结构复杂，稳定性较...     

毛白杨环氧水解酶的异源表达及其在催化拆分手性环氧化物中的应用

对已公布的全基因组进行检索发现,杨树(Populus tomentosa)至少含有24个预测为可溶性环氧水解酶的基因.从中选取了7个可能的环氧水解酶基因进行克隆,通过扩增得到其中5个毛白杨(Populus tomentosa Carr)环氧水解酶基因.序列分析显示,它们与已克隆的巨大芽胞杆菌环氧水解酶的同源性仅为24%～26%.对该系列基因进行了在E.coli中的异源表达,并将得到的5个环氧水解酶(PTEH1～5)用于缩水甘油苯基醚和对硝基苯乙烯氧化物的酶促水解反应.结果发现,其中3个重组酶具有显著的环氧水解酶活性.进一步研究表明,PTEH1和PTEH2对于缩水甘油苯基醚显示了一定的反常规的(R)-选择性,而PTEH5则优先水解(S)-构型的缩水甘油苯基醚.因此,毛白杨中环氧水解酶表现出多样性.     

植物酯酶应用于有机磷农药残留分析技术的研究进展

有机磷农药残留在食品中,进入人体危害人类健康.因此,快速而灵敏的检测技术是预防农药残留危害的前提条件.而酶抑制技术正是一项快速检验技术.本文作者介绍了农药残留分析的现状,详细分析了植物酯酶应用于农药残留分析技术的研究进展.     

用于农药残留检测的酶生物传感器

酶生物传感器在农药残留检测方面具有传统检测方法不可比拟的优势.本文介绍了胆碱酯酶和有机磷水解酶在生物传感器中的应用,重点介绍了用于有机磷等农药残留分析的酶生物传感器的种类和研究现状,讨论了几种酶固定化方法存在的优势和局限,指出了目前研究需解决的问题并展望了未来的发展方向.     

钯-四氧化三铁纳米复合物生物传感器的制备及检测有机磷农药的研究

合成钯-四氧化三铁纳米粒子(Pd-Fe3O4NPs)并制备了乙酰胆碱酯酶(AChE)电流型生物传感器用于检测有机磷杀虫剂。Pd-Fe3O4NPs在电极与乙酰胆碱酯酶之间提供了一个具有较高电子传导性、较好生物相容性和较强催化活性的微环境,有效地提高了乙酰胆碱酯酶的生物活性和有机磷杀虫剂对乙酰胆碱酯酶的抑制作用。以对硫磷为有机磷杀虫剂模型分子,乙酰胆碱酶的抑制率与对硫磷浓度在5×10-12～1×10-9mol/L之间呈现良好的线性关系,检测限为2.5×10-12mol/L。     

乙酰化酶动力学拆分N-乙酰色氨酸

在应用Donald方法的基础上，通过选择性水解合成了DL－N－乙酰色氨酸，在酰基水解酶的作用下，可将DL－N－乙酰色氨酸拆分成L－和D－色氨酸，两种对映体的光学纯度都在98％以上。     

氨基酸及多肽合成的研究Ⅰ 脯氨酸的合成

本文报告一脯氨酸合成新法,此法基于(γ-鄰苯二甲酰亚氨基丙基)-乙酰亚氨基丙二酸乙酯的水解环化。粗品借四硫氰根二苯胺络铬酸铵纯化。另报导二种脯氨酸改良合成法,第一法是以1,3-二氯丙烷代替赤堀四郎法的二溴丙烷直接与乙酰亚氨基丙二酸乙酯缩合。第二法是(γ-溴代丙基)-乙酰亚氨基丙二酸乙酯的水解环化。这中间体是由丙烯基乙酰亚氨基丙二酸乙酯经溴化氢加成反应而得。作者较为详细研究了这类加成反应的条件。     

计时电位法测定乙酰胆碱酯酶活性

报道了一种采用电化学计时电位法测定乙酰胆碱酯酶活性的方法。以碘化乙酰硫代胆碱作底物,将铂对电极和饱和甘汞参比电极浸入该底物溶液中,向两支铂电极上施加一个合适的恒电流,记录电位E随时间t的变化曲线。该曲线的斜率△E／△t代表酶催化水解的速度,从而反映出酶活性的大小。对固定化乙酰胆碱酯酶片获得了满意的测定结果。     

环氧水解酶在不对称合成中的应用

环氧水解酶是一种普遍存在于生物体内的酶,它能选择性水解环氧生成相应的手性二醇。这种酶在催化反应中通常显示出十分高的对映立体选择性,生成高光学活性的环氧和二醇。近年来国际上采用微生物来源的环氧水解酶对环氧底物进行不对称水解,然后再通过酸处理未开环的环氧化物“一锅法”高产率、高选择性的生成单一构型的手性二醇。这一新发展为这种酶在精细合成工业上的运用开辟了广阔的前景。     

有机磷酸酯类中毒与肟类解毒剂

有机磷进入人体后与乙酰胆碱酯酶结合，形成磷酰化ＣＨＥ，使ＣＨＥ失去水解乙酰胆碱的能力，导致乙酰胆碱在体内的聚集，引起一系列中毒症状，甚至死亡。     

聚丙烯酰胺的水解

本文报告聚丙烯酰胺的硷性水解及酸性水解。用浓酸或浓硷处理,都可接近完全水解,用稀酸或稀硷水解则不完全。在0.6～3.3N氢氧化钠及100°时,水解程度为65—70％,Van Slyke法可用以测定丙烯腈与丙烯酰胺共聚物中酰胺基量。用X-射线衍射法测定聚丙烯酰胺长链的等同周期为5.2A。硷性水解之不完全,主要是由于邻近羧基的负电场对羟基向酰胺基进攻时的屏蔽作用所致。合成丙烯酰胺分别与丙烯酸、丙烯醇、或乙酸乙烯酯的共聚物,从而研究其硷性水解,前者的水解限度为75％,后二者可以接近完全,直接证明邻近非负性基团不能产生负电场因而没有屏蔽作用,故水解接近完全。研究若干N取代聚丙烯酰胺及共聚物的水解,在一定条件下它们的水解程度按下列次序递减:聚丙烯酰胺>聚N-甲基丙烯酰胺>聚N,N-二甲基丙烯酰胺>聚N,N-二乙基丙烯酰胺。除了邻近负电场的屏蔽作用外,N及N,N-取代基在长链中有不容忽视的空间阻碍。     

麦麸酯酶对有机磷及氨基甲酸酯类农药的动力学特性

为探讨有机磷及氨基甲酸酯类农药对麦麸酯酶的抑制作用,以酶活抑制率为指标,通过测定酶动力学常数(Ki、Ka、K2)及半数抑制浓度(IC50)揭示麦麸酯酶的动力学特性。结果显示:麦麸酯酶对3种有机磷农药的敏感性大小顺序依次为:敌敌畏甲基对硫磷乐果,其对麦麸酯酶的IC50分别为0.176、1.754、2.583 mg/L;对3种氨基甲酸酯类农药的敏感性大小依次为:叶蝉散西维因丁硫克百威,其对麦麸酯酶的IC50分别为0.489、0.799、2.035 mg/L;各农药抑制麦麸酯酶的动力学常数(Ki、Ka、K2)及IC50值表明,不同农药对麦麸酯酶的抑制作用存在不同程度的选择性,农药与麦麸酯酶的亲和力强弱是导致麦麸酯酶对农药敏感性差异的主要原因;运用该方法检测蔬菜和水果中农药残留,得出莴笋叶、四季豆和葡萄中含有农药,且确定葡萄中为乐果残留。该研究可为麦麸酯酶应用于农药检测提供一定的理论基础。