高效液相色谱法测定菌肥中赤霉素和吲哚乙酸含量方法研究

建立了一种高效液相色谱法分离测定赤霉素(GA3)和吲哚乙酸(IAA)的方法.采用Agilent ZORBA×300SB-C18(4.6 mm×250 mm)色谱柱,以甲醇∶水=35∶65,(V/V,含2%冰醋酸)为流动相,柱温为25℃,流速为0.5 mL/min.系统讨论了流动相组成及pH对分离的影响.本法测定GA3和IAA的线性范围分别为25.0~1 000μg/mL、2.5~50.0μg/mL.方法回收率分别为85.63%、90.21%.并将该方法成功应用于菌肥中GA3和IAA的含量测定,为该类产品的质量控制提供了快速有效的方法.     

高效液相色谱手性流动相添加剂分离西孟坦对映体

以 β 环糊精作为手性流动相添加剂 ,研究了DL 西孟坦在反相HPLC系统中的拆分。考察了缓冲盐的浓度、pH、β 环糊精的浓度、流动相中甲醇的比例、流动相流速和温度对手性分离的影响 ,建立了 β 环糊精动态手性固定相法分离西孟坦对映体的方法。色谱条件为 :ZirchromKromasilODS 1(5 μm ,15 0mm× 4 .6mm)色谱柱 ,流动相为 2 0mmol/L磷酸盐缓冲液 (pH 6 .0 )含 12mmol/Lβ 环糊精∶甲醇 (70∶30 ,V/V) ,流速为 0 .8mL/min ,温度为 17℃。DL 西孟坦对映体的保留时间分别为 2 2 .5和 2 4 .5min ,分离度为 1.5 7。     

加压毛细管电色谱测定葛根中三种异黄酮类化合物

建立了加压毛细管电色谱(pCEC)检测葛根中异黄酮类化合物葛根素、大豆苷、大豆苷元的方法。采用C18毛细管色谱柱,以NaH2PO4缓冲盐水溶液和甲醇为流动相,优化流动相比例、流动相流速、NaH2PO4缓冲盐水溶液浓度和pH、分离电压等色谱条件。结果表明,在流动相为17.5 mmol/L NaH2PO4缓冲盐水溶液(pH 4.0):甲醇=55:45(V/V),分离电压3 kV,流动相流速80μL/min,检测波长250 nm的条件下,葛根素、大豆苷、大豆苷元质量浓度在200～1000μg/mL范围内线性关系良好,相关系数在0.9960～0.9982之间,平均回收率在98.6%～100.9%之间,RSD为3.1%～3.5%之间。该方法已用于葛根中异黄酮类物质的分离检测。     

反相高效液相色谱法测定杨树中噻虫嗪的残留量

建立了一种高效液相色谱法测定杨树中噻虫嗪(Thiamethoxa) 含量的方法.采用C18柱 (250×4.6 mm),流动相为V(甲醇)∶V(乙腈)∶V(水)＝10∶10∶80 (pH≈3),流速0.8 mL/min,UV检测波长为270 nm,检测限为0.01 mg/L,线性方程为Y=2.15e+006X+1.35e+006,相关系数r=0.9991,方法回收率为91.6%,标准偏差为0.38% (n=6).     

HPLC法测定人房水中氧氟沙星的含量

建立人房水中氧氟沙星的高效液相色谱测定法.取房水100 μL,加甲醇去蛋白后,进高效液相色谱分析.色谱条件:色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(4.6× 150 mm,5μm),柱温25℃,流动相为乙腈-0.4%磷酸(三乙胺调pH 3.5)(13:87),流速1.0 mL/min,检测波长295 nm.氧氟沙星和内标的保留时间分别为7.98和9.55 min,氧氟沙星的线性范围为0.1～2.5μg/mL,回归方程为Y=2.47X+0.08,r=0.9996.低中高三个质控样品的日内精密度(RSD)分别为1.89%,1.71%,1.48%,日间精密度(RSD)分别为3.74%,2.40%,1.75%,方法回收率分别为99.43%,101.4%,101.4%,最低检测浓度为0.01μg/mL.本法操作简单,方法准确,可用于房水中氧氟沙星的含量测定.     

HPLC法测定脂质体松萝酸中松萝酸的含量

建立了HPLC测定脂质体松萝酸中药物松萝酸的方法。以Kromasil C18反相色谱柱(250 mmⅹ4.6 mm,5μm)为分离柱,流动相组成为V(甲醇)∶V(磷酸盐缓冲液(pH 5.0))=7∶3,流速1 mL/min,紫外检测,波长284 nm。松萝酸在10~50μg/mL的范围内有很好的线性关系(r=0.9994)。加样回收率为100.1%±0.6%,RSD为0.54%±0.07%。本方法适用于脂质体松萝酸中药物松萝酸的测定。     

高效液相色谱法同时分离测定仁用杏花芽中8种植物激素

采用Shim-Park C18 VP-ODS色谱柱(150mm×4.6mm,5μm)、岛津SPD-10A VP UV-检测器,以V(甲醇)∶V(0.075%冰乙酸水溶液)=45∶55为流动相,在流速0.7mL/min、柱温30℃、检测波长254nm的条件下,同时分离测定了仁用杏花芽中的腺素、玉米素、赤霉素、生长素、6-苄氨基嘌呤、秋水仙素、脱落酸和吲哚-3-丁酸8种植物激素。各峰的分离效果理想,加标回收率达到95.41%~103.48%;测量灵敏度达0.0001volt;精密度RSD%<0.1。     

高效液相色谱法同时测定鸭梨种子中3种内源激素

建立了高效液相色谱同时测定鸭梨种子中3种内源激素赤霉素(GA3)、生长素(IAA)和脱落酸(ABA)含量的方法.采用C18反相色谱柱,柱温35 ℃,以甲醇-水(含1%乙酸)(4∶ 6, V/V)为流动相,流速为1 mL/min, 检测器波长开始用254 nm, 2.5 min时将波长切换至210 nm,至3.8 min,GA3出峰结束后,再次将波长切换回254 nm测定IAA和ABA.GA3、IAA和ABA的平均回收率分别为92.8%、91.6%和94.7%.为快速、准确分离和测定鸭梨种子内源激素提供了一种可靠方法.     

手性流动相添加剂法拆分安妥沙星对映体

采用L-苯丙氨酸和CuSO_4作为手性流动相添加剂,建立液相色谱法拆分安妥沙星对映体的方法。考察了手性添加剂的种类、浓度及流动相pH等对安妥沙星对映体分离的影响。采用Welch Ultimate XBC_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),优化流动相为8 mmol/L L-苯丙氨酸溶液(含4 mmol/L的CuSO_4,pH 3.5)-甲醇(80∶20,V∶V),流速:1.0 mL/min,检测波长:302 nm,结果左、右旋安妥沙星峰达到基线分离,分离度为6.6。     

磺丁基醚-β-环糊精手性流动相添加剂法拆分佐匹克隆对映体

采用磺丁基醚-β-环糊精(SBE-β-CD)为手性流动相添加剂,建立了反相高效液相色谱手性流动相添加剂法拆分分离佐匹克隆对映体的方法。在普通C18色谱柱(250 mm×4.6 mm×5.0μm)上,考察了水相pH、磺丁基醚-β-环糊精浓度、磷酸盐缓冲液浓度、甲醇含量、柱温等对佐匹克隆对映体拆分效果的影响。确定最适用的色谱条件:流动相为水相(5 mmol/L NaH2PO4,含磺丁基醚-β-环糊精5 mmo/L,以H3PO4调pH为3):甲醇=78:22(V/V),检测波长305nm,流速为1 mL/min,柱温为30℃,此条件下佐匹克隆对映体的保留时间分别为23.0和25.6 min,分离度为1.81。两对对映体质量浓度在0.04~0.36g/L范围内线性关系良好(r≥0.9990),保留时间的RSD分别为0.73%和0.80%,峰面积的RSD分别为1.2%和1.1%。     

等度反相高压液相色谱法同时测定艾叶中四种黄酮化合物的含量

建立艾叶中槲皮素、山萘酚、木犀草素、芹菜素含量测定方法。反相高效液相色谱法,色谱柱ZORBAX SB-C18(150×4.6 mm,5μm);检测波长360 nm;V(甲醇)∶V(0.2%H3PO4)=45∶55为流动相;柱温30℃;流速1.0 mL/min。槲皮素、山萘酚、木犀草素、芹菜素理论板数分别为槲皮素:大于5000山萘酚:大于6000木犀草素:大于6000芹菜素:大于7000;4种化合物的分离度均大于1.5。槲皮素、山萘酚、木犀草素、芹菜素回归曲线分别为:Y=1504.412X 9.9756,Y=1991.745X 8.6051,Y=567.591X 2.5397,Y=1811.803X 0.3074,在5.5216×10-2~19.3256×10-2μg/mL、4.608×10-2~16.128×10-2μg/mL、12.5504×10-2~43.9264×10-2μg/mL、6.0288×10-2~21.1008×10-2μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r为0.99992~0.99998,加样回收率分别为102.0%、100.2%、100.1%、100.4%,RSD分别为2.97%、2.61%、2.66%、3.45%。样品分别含槲皮素、山萘酚、木犀草素、芹菜素0.754、0.841、1.629、0.79 mg/g。本法为艾叶提供了分析4种黄酮化合物方法,该法简便可行,重复性好,数据及结果可靠。     

万古霉素手性固定相分离曼尼希碱类化合物对映体

采用大环抗生素类万古霉素手性固定相高效液相色谱法研究了一系列曼尼希碱类化合物的手性分离情况,并讨论了流动相中有机相的种类和比例、缓冲盐的种类和浓度、pH和柱温对该类化合物手性分离的影响。最佳实验条件为:乙腈:硝酸铵(35mmol/L,pH3.8)=15∶85(V/V),柱温15℃,流速0.6mL/min,检测波长300nm;四氢呋喃:硝酸铵(20mmol/L,pH4)=15∶85(V/V),柱温15℃,流速0.6mL/min,检测波长350nm。通过对比研究8种曼尼希碱类化合物的色谱行为,从结构上讨论了化合物中各种官能团对手性分离的影响,并探讨了手性分离的内在机制。     

高效液相色谱手性流动相添加剂法拆分氯噻酮对映体

应用反向高效液相色谱,以羟丙基-β-环糊精(HP--βCD)作为手性流动相添加剂,拆分了氯噻酮(Chlorthalidone)对映体。对主要的影响因素如羟丙基-β-环糊精浓度、流动相pH值、三乙胺(TEA)、甲醇、柱温、流速等进行了系统研究,建立了羟丙基-β-环糊精流动相添加剂法拆分氯噻酮对映体的方法。使用HarbonLichrospher-C18色谱柱(5μm,150 mm×4.6 mm),流动相为V(甲醇)∶V(水相)=20∶80(水相含30 mmol/L HP--βCD0、.1 mol/L Na2HPO4、体积分数2%的TEA、pH5),流速为0.8 mL/min,室温下拆分,氯噻酮对映体可得到良好分离。     

全自动在线固相萃取-二维高效液相色谱与质谱联用测定辣椒油中苏丹红

建立了全自动在线固相萃取-二维高效液相色谱与质谱联用快速测定辣椒油中的苏丹红Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ的方法。样品经乙腈和二氯甲烷萃取后,在一维色谱柱(Acclaim PAⅡ,150 mm×3.0 mm×3μm)上分离出苏丹红,通过阀的分段切换,依次富集在SPE柱(Acclaim 120 C18,10 mm×4.6 mm×5μm)上,在线完成净化和萃取富集;再通过阀切换将它们转移至二维色谱流路,在Acclaim 120 C18色谱柱(100 mm×2.1 mm×2.2μm)上分离检测。一维色谱以水-乙腈-甲醇/四氢呋喃(1∶1,V/V)为流动相,进样体积20μL,0.6 mL/min流速梯度洗脱和紫外-可见检测器(λ=254 nm)监测分离状况;二维色谱以水-乙腈-甲酸/乙腈(1∶1000,V/V)为流动相,0.3 mL/min流速梯度洗脱,采用单四极质谱仪,选择离子方式检测。整个分析流程27 min即可完成。4种苏丹红的保留时间的相对标准偏差均小于0.1%,色谱峰面积的相对标准偏差均小于2%(n=7);在0.6～60μg/L范围内峰面积与进样质量浓度的线性相关系数均大于0.9958;加标回收率为50%～97%;方法检出限均小于0.2μg/L(S/N=3)。测定结果令人满意。     

离子对色谱法测定生产己内酰胺中副产环己酸磺酸

建立了反相离子对色谱内标法测定甲苯法生产己内酰胺中副产环己烷羧酸磺酸含量.色谱条件为:色谱柱Agilent Hypersil ODS (4.0 mm×250 mm,5μm),内标物甲苯-4-磺酸,流动相为37.5%甲醇(V/V),10 mmol/L四丁基溴化铵,25 mmol/L KH2PO4,H3PO4调节pH 2.5～3.5,柱温30 ℃,流速1.2 mL/min,检测波长230 nm.结果表明:线性范围0.1006～3.0192 mg/mL,相关系数为0.9994,回收率99.51%～102.34%,RSD为0.4950%～0.5270% (n=6).     

离子液体[BMIM]BF_4对甘草酸及其衍生物色谱行为的影响

将离子液体1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([BMIM]BF4)加入到高效液相色谱流动相中,研究其对甘草酸(GL)及其衍生物甘草次酸(GA)和单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)色谱行为的影响。结果显示,加入离子液体后的流动相能够明显改善色谱峰形、减少峰拖尾、增大峰面积和峰高、提高检测灵敏度,并缩短GL,GA及GAMG 3种化合物的同时检测时间,提高检测效率。优化色谱条件为:InertSustain C18(4.6 mm×250 mm i.d.,5μm)反相色谱柱为分离柱,柱温40℃;甲醇-1.0 mmol/L[BMIM]BF4(体积比81∶19,乙酸调至pH 3.0)为流动相,流速0.7 mL/min,进样体积20μL,检测波长251 nm。GL,GA及GAMG在5.00~100 mg/L范围内线性关系良好(r≥0.999 8),检出限分别为0.02,0.04,0.09 mg/L;加标回收率分别为100.1%,98.0%,98.2%,RSD为0.18%~0.43%。同时测定GL生物转化体系中3种组分,结果满意。     

直接进样-液相色谱/串联质谱法测定水中苦味酸

采用液相色谱/串联质谱法测定了水中的苦味酸,对流动相、流速、柱温及进样量等条件进行了优化。结果表明,流动相为甲醇和0.1%甲酸溶液(80∶20,V/V),流速1.0 mL/min,色谱柱柱温40℃,进样量5μL,苦味酸含量在1.0~50μg/L时,校准曲线呈线性关系,相关系数r=0.9999,方法检出限为0.10μg/L。对实际水样进行分析,测量的回收率为76.2%~109%,样品加标平行测定,RSD(n=6)为2.8%~4.7%。     

用制备型高效液相色谱分离石油亚砜的馏分

用经典硅胶柱色谱法对石油亚砜 (PSO)进行预分离。PSO被分成 4个馏分 (分别记为PSO1,PSO2 ,PSO3和PSO4)。所用的流动相及洗脱顺序 :苯、二氯甲烷、甲醇 二氯甲烷 (1∶1体积比 )、甲醇。经预分离后 ,PSO中的亚砜成分主要富集在馏分PSO3和PSO2中。用高效制备液相色谱法对这两馏分作进一步的分离和纯化。PSO2的色谱条件是 :色谱柱 μ BondapakC1 85 7mm× 30 0mm ;流动相为二氯甲烷、环己烷、甲醇混合液 ,收集经纯化后的组分PSO2g2 2 ;PSO3被分离为 7个馏分 ,其色谱条件为 :色谱柱μ BondapakC1 85 7mm× 30 0mm ;流动相为 70 %～ 10 0 %甲醇 水 ;梯度洗脱其流量为 80mL min ;进样量为80mL 次 (PSO3用 70 %甲醇 水稀释 10倍 )。取其中较纯的馏分PSO3c ,PSO3e ,PSO3g作进一步的色谱纯化 ,色谱条件为C1 8半制备色谱柱 7.8mm× 30 0mm ;流速 :2 0mL min ;流动相 :甲醇 水 70∶ 30 ,V/V(PSO3c)″80∶2 0 ,V V(PSO3e) ;85∶15 ,V V(PSO3g) ;检测器UV 2 5 4nm     

高效液相色谱/电喷雾质谱法测定血浆中曲美他嗪浓度

建立了高效液相色谱/电喷雾质谱法(HPLC/ESI-MS)测定人血浆中曲美他嗪浓度。以利多卡因为内标,样品经甲醇沉淀蛋白,取上清液用三氟乙酸酸化后,50℃真空离心,浓缩至干,流动相溶解后进样。色谱柱:Waters Xterra MSC18(150mm×4.6mm,5μm),柱温:40℃,流动相:pH2.00的三氟乙酸溶液-甲醇(60∶40,V/V),流速:0.6mL/min;电喷雾离子源,四级杆质谱检测器,选择离子监控模式,检测离子的质核比分别是235(利多卡因)和267(曲美他嗪)。曲美他嗪的线性范围为2.5~100μg/L,检出限2.5μg/L;日间、日内相对标准差均小于7%;相对回收率96.45%~103.03%,提取回收率72.45%~80.47%。     

荧光检测-高效液相色谱法测定水果、蔬菜中抗蚜威残留量

建立了水果、蔬菜中抗蚜威残留的荧光检测-高效液相色谱法。样品以乙腈提取,固相萃取氨基小柱(LC-NH2)净化,Waterscarbamateanalysis(3.9mm×150mm,4μm),V(甲醇)∶V(水)∶V(乙腈)=16∶68∶16为流动相,柱温30℃,流速为1.5mL/min进行分离,用荧光检测器进行检测,激发波长和发射波长分别为317nm,392nm。回收率在98.5%~105.4%,相对标准偏差为3.0%~4.6%,检出限为0.01mg/kg。