用清除超氧阴离子自由基法评价竹叶提取物抗氧化能力

通过对邻苯三酚反应体系的吸收光谱,对自氧化速率及邻苯三酚浓度和缓冲液pH值对反应体系产生的超氧阴离子自由基清除率的影响进行了研究.分光光度法测定邻苯三酚反应体系的检测波长为319.5眦,反应体系体积10 mL,反应时间为9 min,3 mmol·L-1邻苯三酚加入量为0.3 mL,Tris-HCl缓冲液pH值为8.2,自氧化速率为0.035;用上述方法研究合成抗氧化剂叔丁基对苯二酚(TBHQ)和竹叶提取物样品浓度和清除率的关系,以IC50值(清除率为50%时的浓度值)作为评价指标,测得TBHQ和效果最好样品的IC50值分别为TBHQ(95.01 mg·L-1)和M40(298.69 mg·L-1),M40等竹叶提取物可以作为天然抗氧化剂进行开发.     

用清除羟自由基法评价竹叶提取物抗氧化能力

进行了Fe2+与邻二氮菲生成红色配合物的吸收光谱,抗氧化剂TBHQ及竹叶提取物样品对清除羟自由基能力的研究。分光光度法测定抗氧化剂清除羟自由基能力的测定波长为509.1 nm。以IC₅₀值(清除率为50%时,抗氧化剂的浓度值)作为评价抗氧化剂清除羟自由基能力的指标,测得合成抗氧化剂和效果最好竹叶提取物样品IC₅₀值分别为0.040(TBHQ),0.378(M20),0.323(M40),0.334(M60),M20, M40, M60等竹叶提取物可以作为天然抗氧化剂进行开发。     

蕨菜醇提取物的抗氧化特性

采用二苯代苦味肼基自由基(DPPH)体系、羟基自由基体系、超氧阴离子自由基体系,对蕨菜醇提取物抗氧化特性进行研究,并同Vc、2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)进行比较.结果表明:蕨菜醇提取物对这几种自由基均有不同程度清除作用,对DPPH自由基清除能力最强,当浓度为0.6mg/mL时,清除能力已超过BHT,当醇提物浓度为0.8mg/mL时,清除率已达83.6％,但一直小于Vc.醇提物浓度为15mg/mL时,对羟基自由基的清除率为82.4％,对超氧阴离子清除率为52.6％,在实验浓度范围内,抗氧化性小于Vc和BHT.     

黄酮配合物抗自由基活性的亚甲基蓝光谱测定体系的研究

亚甲基蓝(MB)可捕获Fenton反应产生的羟自由基生成无色加合物,选用亚甲基蓝为槲皮素(Que)及其配合物抗羟自由基活性测定体系的指示剂。实验优化测试条件为：体系pH 8.0,加入H₂O₂溶液(0.3%) 0.50 mL,FeSO₄溶液(5 mmol·L-1) 0.50 mL和MB溶液(2.56×10-5 mol·L-1)1.0 mL。由此建立了测定槲皮素配合物抗·OH活性的光谱测定方法。方法简便,尤其适合于配合物体系抗自由基活性的分析。测定了槲皮素及Que-Zn(Ⅱ),Que-Cu(Ⅱ),Que-Fe(Ⅲ)配合物的抗·OH活性。结果表明3种槲皮素配合物的抗羟自由基活性均比槲皮素高,配合物活性Que-Cu(Ⅱ) ＞Que-Zn(Ⅱ)＞Que-Fe(Ⅲ),表现出金属离子与有机活性配体协同作用可提高其抗氧化活性的能力。     

动力学分光光度法测定中药对超氧阴离子自由基的清除率

建立了一种利用动力学分光光度法测定中药对超氧阴离子自由基清除率的新方法。研究表明：当波长为520 nm、黄嘌呤氧化酶浓度为4×10-3 μg·mL-1,反应时间在2～7 min时,可得到最佳测定条件。在该条件下测得的抗坏血酸对超氧阴离子自由基的清除率与文献报道值一致。方法用于中药厚朴和杜仲的测定,它们对超氧阴离子自由基的IC₅₀分别为7.580和323.800 mg·L-1。     

DPPH自由基清除活性的光度微量滴定模型及应用

传统的DPPH自由基清除活性评价方法以半数清除浓度EC₅₀为评价指标,但EC₅₀随DPPH初始加入量增加而增加,随分析体积增加而减小,因此,不同条件EC₅₀值不具有可比性。提出以DPPH与抗氧化剂相互反应的化学计量数比(R)作为评价DPPH清除活性的指标,该指标只与DPPH与抗氧化剂相互反应的化学计量关系有关,与DPPH初始加入量和分析体积等因素无关,解决了EC₅₀可比性差的问题。提出了测定化学计量数比(R)的光度微量滴定法,建立了利用滴定过程吸光度差(ΔA)与抗氧化剂加入量之间的滴定方程计算R值、以R计算EC₅₀的光度微量滴定模型,并利用芦丁对模型进行验证。结果：芦丁与DPPH反应R值在1.817～1.846之间,当DPPH加入量为1.12×10-7,2.24×10-7,4.48×10-7和6.72×10-7 mol时,分别计算得EC₅₀值分别为1.196×10-3,2.392×10-3,4.819×10-3和7.292×10-3 mg·mL-1。在此基础上,基于文献报道的芦丁清除DPPH条件,利用得到的芦丁R值计算出相应EC₅₀,结果与文献报道EC₅₀值相当。方法可比性好,样品消耗量明显降低,简单、成本低,结果可靠,为自由基清除活性评价提出了一种新的思路。     

竹秆提取物的抑菌及抗氧化活性

采用滤纸片法比较研究了17种竹子竹秆提取物对水稻白叶枯菌、金黄色葡萄球菌、番茄青枯和菌大肠杆菌的抑菌性能;并以IC50值作为评价抗氧化剂清除DPPH·自由基能力的指标评价提取物的抗氧化能力.结果表明:竹秆提取物具有广谱的抑菌活性,不同竹种对于供试细菌抑制活性不同;竹秆提取物具有较好的抗氧化活性,其中乌哺鸡竹提取物清除自由基效果突出,IC50为96.0mg/L,略强于同质量浓度的人工合成抗氧化剂TBHQ.     

硒杂环化合物SPO清除DPPH和ABTS自由基的光谱学研究

研究了一种新型硒杂环化合物1,2,5-硒二唑并[3,4-d]嘧啶-5,7- (4H,6H)-二酮(SPO)清除DPPH和ABTS自由基的能力及其光谱学特征。采用分光光度法进行检测,DPPH自由基体系的测定波长为515 nm,稳定时间为30 min,而ABTS自由基的测定波长为734 nm,体系在6 min内达到稳定。SPO具有良好的抗氧化活性,能有效、快速地抑制溶液中DPPH和ABTS自由基的形成及其特征吸收峰。在优化的反应体系中,SPO对DPPH和ABTS自由基的半数抑制浓度(IC50)分别为85.2和36.5 μmol·L-1,该活性可与标准抗氧化剂Trolox相比拟,且明显优于作为阳性对照的BHA和BHT。实验的结果显示硒杂环化合物在抗氧化方面的广阔应用前景和潜力。     

同步荧光光谱比率法检测过氧亚硝酸根及其清除剂的研究

利用同步荧光光谱建立了一种新的荧光比率法检测过氧亚硝酸根(ONOO－)及评价其清除剂的方法。酪氨酸自身有荧光,在pH 8.5的磷酸缓冲溶液中,酪氨酸与CO₂和ONOO－反应生成强 荧光的酪氨酸二聚体,利用同步荧光光谱技术, 在荧光发射光谱中能同时获得酪氨酸单体(λ_em=364 nm)与二聚体的荧光峰(λ_em=406 nm),且两峰的荧光强度的比值与ONOO－的浓度呈计量相 关。结果表明荧光强度的比值不受实验参数改变的影响,与传统的荧光法相比,有利于扩大检测的线性范围,提高灵敏度。荧光强度的比值与ONOO－的浓度在1.60×10－7 mol·L-1～6.00× 10－6 mol·L-1范围内呈线性关系,线性相关系数为0.999,检测限为1.84×10－8 mol·L-1。对浓度为1.00×10－6 mol·L-1 ONOO－ 平行测定8次,其相对标准偏差为2.4％。利用该法测得抗癌药米托蒽醌的IC₅₀为0.065 μg·mL-1。方法简便易行,试剂廉价易得,体系稳定,可作为一种检测ONOO-及筛选其清除剂的方法。     

微波辅助提取壶瓶枣多糖及其抗氧化性

采用微波辅助法提取了壶瓶枣多糖,并对壶瓶枣粗多糖(CP)、脱蛋白多糖(DP)对·OH、O-2·和DPPH·3种自由基的清除作用进行了研究.结果表明:壶瓶枣CP和DP对3种自由基都有明显的清除作用,清除率与多糖浓度存在明显的量效关系.壶瓶枣CP和DP对·OH、O-2·和DPPH·的半清除率(IC50)值分别为0.2312、0.9326、0.1830mg/mL和0.5049、0.2016、0.0694mg/mL.CP清除能力为DPPH·＞· OH＞O-2·,DP清除能力为DPPH· ＞O-2·＞·OH.     

单丛茶水提物清除DPPH和ABTS自由基的光谱学研究

研究了白叶和风凰两种单从茶水提物清除DPPH和ABTS自由基的能力及其光谱学特征.采用分光光度法测定单从茶水提物清除ABTS自由基的测定波长为734 nm,体系稳定时间为6 min;清除DPPH自由基的测定波长为515 nm,体系稳定时间为30 min.单丛茶水提物具有良好的抗氧化活性,能有效、快速地抑制溶液中DPPH和ABTS自由基的形成及其特征吸收峰.在选定的反应体系中,白叶单丛茶(Ⅰ,Ⅱ)、凤凰单丛茶(Ⅲ,Ⅳ)和标准抗氧化剂Trolox对ABTS自由基的半数抑制浓度(IC50)分别为26.9,25.5,28.0,31.7和85.2 μg·mL-1,说明单丛茶水提物的总抗氧化活性明显优于Trolox.对于DPPH自由基,4种单丛茶的IC50值分别为49.8,41.6,47.3和64.5 μg·mL-1.实验结果显示,单丛茶水提物具有优良的抗氧化活性,且对水溶性自由基的抑制率明显高于脂溶性自由基,作为功能食品具有广阔的开发和应用前景.     

土荆芥果实挥发油成分及抗氧化能力

对土荆芥果实挥发油成分及抗氧化能力进行研究。采用质谱技术与Kovats指数相结合对土荆芥果实挥发油化学成分进行分离鉴定;利用清除1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基的方法,评价土荆芥果实挥发油的抗氧化能力。土荆芥果实挥发油中分离鉴定了11种组分,其相对含量占挥发油总质量的98.94%,含量较高组分是α-异松油烯(60.44%),驱蛔素(15.57%),对-聚伞花素(12.76%)和α-松油烯(4.51%)。清除DPPH自由基IC50为6.9053mg.mL-1。土荆芥果实挥发油主要成分是萜烯类化合物;并具有一定的抗氧化能力。     

罗丹明6G缔合微粒光度法检测羟自由基及其在离体筛选抗氧化剂中的应用

在HCl-NaAc缓冲溶液中,Fenton反应产生的羟自由基被过量的KI捕获;生成的I-₃分别与罗丹明B(λ_max=554 nm)、罗丹明6G(λ_max=526 nm)、罗丹明S(λ_max=526 nm)和丁基罗丹明B(λ_max=556 nm)形成缔合微粒,导致其吸收峰降低。羟自由基浓度(以H₂O₂浓度计)分别在0.136～0.68 μg·mL-1,0.064～0.680 μg·mL-1,0.064～0.680 μg·mL-1和0.064～0.680 μg·mL-1范围内与罗丹明B、罗丹明6G、罗丹明S和丁基罗丹明B体系的吸光度降低值成正比。据此建立了一种测定抗氧化剂对羟自由基的清除率的新方法。测试了抗坏血酸等4种抗氧化剂以及6种茶叶提取液的抗氧化活性,所得到的结果较为满意。     

秦岭产荚果蕨中总甾酮含量的测定

研究了超声提取法提取3种荚果蕨属植物中总甾酮的最佳提取工艺。确定最优的提取工艺条件为:60%的乙醇,料液比1:40(g/mL),270W超声50min。比较了秦岭产荚果蕨属3种植物中总甾酮的含量,确定总甾酮含量最高的为荚果蕨,其次为中华荚果蕨和东方荚果蕨。对荚果蕨醇提物对DPPH自由基清除活性进行研究,结果显示其清除活性依次为根状茎>营养叶>BHT>孢子叶。     

荧光法研究山莓叶提取物清除羟自由基的活性

在稀硫酸介质中,荧光染料亮绿(LGSF)在312nm处产生荧光,Fenton反应产生的.OH与亮绿反应,使其荧光猝灭。根据此原理,荧光光度法测定山莓叶不同萃取物清除自由基活性存在很大差异。同时,当提取物浓度达到0.40mg/mL时自由基清除率分别可达到27.34%,38.65%,40.22%,41.68%,其中,山莓叶正丁醇萃取物清除羟自由基活性最强。本研究为山莓叶的合理开发利用提供理论依据。     

芦荟大黄素锌配合物的抗氧化活性

对比研究了芦荟大黄素和芦荟大黄素锌配合物体外抗氧化活性。以Fenton反应产生羟自由基,邻苯三酚自氧化反应产生超氧阴离子自由基,二苯代苦味肼(DPPH.)自由基为实验模型,采用紫外可见分光光度法,首次测定芦荟大黄素锌配合物对超氧阴离子、羟自由基、DPPH.自由基的清除作用。结果表明,金属锌离子与芦荟大黄素具有协同抗氧化作用。