HPLC测定人工蛹虫草培养基中的虫草素

建立蛹虫草培养基中虫草素的含量测定方法.采用反相高效液相色谱法,以十八烷基键合相硅胶为固定相,0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液(pH=6.0)-乙腈(93∶7,V/V)为流动相,检测波长260nm,流速1.0mL/min进行分析.结果 虫草素在2.0-40.0μg·mL-1范围内线性良好(r=0.9999);平均加标回收率分别为96.8％、98.1％和100.9％,RSD分别为3.33％,2.88％和1.60％(n=3);方法精密度RSD为0.29％(n=5).该法分析时间短,结果准确,重现性好,适合人工蛹虫草培养基中的虫草素的含量测定.     

利用烟草高效转化功能基因体系的建立

对农杆菌介导的烟草遗传转化条件进行探索,以20 mg/L的潮霉素作为转化苗的筛选压,稀释至OD600为O.2～O.3的农杆菌对外植体浸染15 min,于添加300 mg/L头孢霉素的生根培养基中诱导生根,可稳定获得较高的阳性转化率.经PCR和PCR-Souttlern检测,阳性转基因植株达84.8%以上.通过本研究建立了一种稳定高效的功能基因烟草遗传转化体系.     

马氏珠母贝(Pinctada martenssi Dunker)外套膜组织培养基的设计

分析了培养基中的小牛血清、贝血清、水解乳蛋白等几种天然成分和合成培养基ＴＣ１９９对中国马氏珠母贝外套膜组织细胞在体外的生长情况和珍珠质分泌功能的影响，并确定了它们在组成培养基时的适宜含量．其中，贝组织提取物、鸡胚汁对细胞的生长和珍珠质的分泌具有十分重要的作用；５％的小牛血清和１０％的贝血清共同使用对维持细胞形促进细胞生长有很好的作用，但单独使用则有一定的负作用．     

用可视化方法优化微生物培养基的营养条件

应用可视化方法,对生物发酵培养基的营养条件进行优化.以培养基组成构建多维向量空间,通过降维分析法将多维空间的拓扑结构展现在二维平面上,变成可视化图像,并自动产生目标函数等值线.从中得出同时满足各项指标值的最佳操作区域,并运用逆映射公式将得出最优化区域逆推到原高维空间,进而得到最优培养基组成.以锌酵母为例,介绍可视化方法优化全过程.     

微量元素添加剂促进赤霉素分泌及赤霉素速测技术研究

研究了赤霉素快速分光光度法测定，并首次应用于微量元素添加剂促进赤霉素分泌的研究．结果表明，固体发酵培养基中添加了硼酸、磷酸二氢钾、硫酸镁对促进赤霉素分泌有重要作用．结合使用作者多次筛选得到的高产赤霉素产生菌株等措施，终于研制得含量高达约１５０００×１０－５的固体粉剂，其含量高出一般固体发酵产品的３～５倍．     

X射线照射Hep-2细胞对其培养基吸收光谱的影响

采用分光光度计分别测量了受不同剂量X射线照射后继续培养48h时的人上皮样喉癌细胞株Hep-2的培养基RPMI1640的紫外吸收光谱,分析了该培养基中蛋白质的紫外吸收特性.结果发现:各组培养基的吸收光谱存在明显的差别,新鲜培养基RPMI1640(10%胎牛血清)233nm处的吸收峰在细胞生长过程中位移至235nm,275nm处的吸收峰位移至278nm.反映出各组培养基中芳香族氨基酸中各种氨基酸如色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸的含量的变化,说明癌细胞在生长过程中对这几种氨基酸的改变不是按等量比的.实验还发现细胞培养基的吸收光谱强度与各剂量组细胞数基本成正相关,进而与细胞所受X射线照射的剂量有内在的联系.这些结果将为利用光谱技术研究人喉癌最佳X射线放射剂量奠定基础.     

Molecular dynamics simulation of peeling a DNA molecule on substrate

Molecular dynamics (MD) simulations are performed to study adhesion and peeling of a short fragment of single strand DNA (ssDNA) molecule from a graphite surface. The critical peel-off force is found to depend on both the peeling angle and the elasticity of ssDNA. For the short ssDNA strand under investigation, we show that the simulation results can be explained by a continuum model of an adhesive elastic band on substrate. The analysis suggests that it is often the peak value, rather than the mean value, of adhesion energy which determines the peeling of a nanoscale material.The project supported by the Distinguished Young Scholar Fund of NSFC (10225209) and key project from the Chinese Academy of Sciences (KJCX2-SW-L2)     

枯草杆菌在淀粉液态培养基中生产α-淀粉酶

以枯草杆菌(Bacillus subtilis BF7658)为实验菌株,以淀粉为主要原料,采用液态培养基发酵, 生产α-淀粉酶.结果表明:在23℃至44℃内,培养基起始pH值为自然pH值,产酶最佳培养温度为37℃; 枯草杆菌在淀粉液态培养基中控制温度为37℃,振荡培养,其产酶最适宜淀粉与水组成比例为:75 : 100; 在最佳温度37℃下,淀粉:水为75:100时,最佳培养时间为36h.     

油脂降解培养基优化的遗传算法实验研究

我们运用遗传算法,首次对利用热带假丝酵母降解油脂的培养基优化问题进行了研究。通过5代实验完成了50个实验样本、6种培养基成分、64个浓度水平的优化任务。按照优化后的培养基组成,热带假丝酵母降解油脂的降解率为95．4％,比正交设计法提高了7．63％。实验结果表明：利用遗传算法可优化培养基成分含量,取得更好的效果;遗传算法是一种优于单因素试验法和正交设计法的新型、高效的培养基优化方法。     

细胞培养基的吸收光谱研究

使用日本岛津UV 310 1分光光度计分别测量培养了宫颈癌细胞 (Hela)和鼻咽癌细胞 (CNE)的RP MI 16 4 0培养基和DMEM高糖培养基的紫外吸收光谱 ,分析了培养基中蛋白质的紫外吸收特性。RPMI16 4 0培养基的 2 2 7nm吸收峰在培养细胞生长过程中位移至 2 2 2或 2 18nm ,2 78nm的吸收峰位移至 2 80nm ;而DMEM高糖培养基 2 2 4nm吸收峰在培养细胞生长过程中位移至 2 2 1nm附近 ,2 78nm吸收峰基本没有位移。这些位移说明培养基中芳香族氨基酸中各种氨基酸如色氨酸和酪氨酸的含量有变化。也就是说 ,癌细胞在生长过程中对色氨酸和酪氨酸的消耗不是按等量比的。实验也说明Hela和CNE在生长过程中 ,对RPMI 16 4 0培养基和DMEM高糖培养基中氨基酸的消耗是不同的。实验结果为癌细胞生长过程中所需培养基中氨基酸的含量提供了依据