利用烟草高效转化功能基因体系的建立

对农杆菌介导的烟草遗传转化条件进行探索,以20 mg/L的潮霉素作为转化苗的筛选压,稀释至OD600为O.2～O.3的农杆菌对外植体浸染15 min,于添加300 mg/L头孢霉素的生根培养基中诱导生根,可稳定获得较高的阳性转化率.经PCR和PCR-Souttlern检测,阳性转基因植株达84.8%以上.通过本研究建立了一种稳定高效的功能基因烟草遗传转化体系.     

基于铜离子（Ⅱ）类过氧化物酶性质可视化比色法检测过氧化氢

过氧化氢（H₂O₂）在食品工业、环境监测分析、燃料电池、临床诊断等领域得到十分广泛的应用。过氧化氢不仅是严重疾病的生物标志物,也是重要的食品添加剂。无论从食品安全还是人类健康考虑,对过氧化氢构建简便、快速、灵敏的检测方法具有重要意义。比色法因具有易操作、成本低及检测结果可视化等优点被广泛关注。比色法普遍使用的酶是辣根过氧化物酶(HRP)。但天然酶存在易失活、生产成本高及稳定性差等不足。纳米酶克服了HRP易失活的缺点。然而部分纳米酶合成复杂、需要表征、水溶性差及催化活性低等。与HRP和纳米酶相比,具有类过氧化物酶性质的铜离子（Ⅱ）,不仅具有灵敏度高的特点,而且不需要复杂的合成、易获得、易储存、不需修饰可直接使用、操作简单及分析成本低廉等优势。铜离子（Ⅱ）类酶能够通过催化过氧化氢生成羟基自由基,氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（TMB）而产生氧化态TMB,使溶液的颜色由无色逐渐转变为蓝色,从而产生光信号,这些光信号可以肉眼识别和通过紫外分光光度计检测。基于上述原理构建过氧化氢的快速比色传感并应用于银耳样品的检测。实验考察了体系中过氧化氢浓度、pH值、温度等因素对吸光度的影响。选择缓冲溶液pH值为3.0,温度40 ℃,TMB和铜离子（Ⅱ）浓度分别为6.0×10-4和8.0×10-3 mol·L-1,反应时间为20 min。在最优条件下,过氧化氢浓度与体系的吸光度值呈良好的线性关系,线性范围是0.08~40 μmol·L-1,检测限为0.14 μmol·L-1。该法可检测银耳中过氧化氢的浓度,加标回收率在97.10%~107.08%之间,相对标准偏差（RSD）小于5%。该研究无需特殊检测设备条件下实现过氧化氢的简单、快速、成本低廉且灵敏的可视化检测,有利于过氧化氢的定量检测在食品领域和临床上的快速推广。     

HPLC测定怀菊花中的总黄酮

建立了HPLC测定怀菊花中总黄酮含量的方法.采用Agilent C18柱(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇(A)-超纯水(0.2％的冰乙酸)(B)(25∶75,V/V)为流动相,流速:0.5mL·min-1;柱温为20℃,检测波长:260nm;进样量:10μL.结果:回归方程为y=33.29x-8.284,r=0.9993(n=6),线性范围0-20μg,平均回收率为102.63％,RSD为5.56％.样品总黄酮含量为7.51mg/g.方法简便、灵敏、快速、准确、重现性好,可用于怀菊花中总黄酮含量的质量控制.     

阿魏菇多糖的提取、纯化及其组成研究

采用热水浸提、Sevag法去蛋白、乙醇沉淀，冷冻干燥，从阿魏菇（pleurotus ferulae Lenzi）子实体及菌丝球中提取阿魏菇粗多糖（PFP）， 苯酚－硫酸法测定多糖含量为PFP147．2％，PFP为41．4％，经过Sephadex200层析柱分离和薄层层析分析，可知阿魏菇多糖是由三种单糖组成的均一杂多糖。     

四爪陆龟生长的研究——Ⅱ.四爪陆龟形体生长的初步分析

本文对野生状态下生活的46只四爪陆龟的背板长度、背板宽度、壳高和腹板长度测量数据的分析研究表明,在四爪陆龟形体生长中,背板长度的增长速率基本上与腹板长度的增长速率相同,并具较高的相关性,背板宽度的增长速率高于壳高的增长速率,因此四爪陆龟龟壳显得较为平坦,计算结果表明,四爪陆龟背板长度与腹板长度的形体生长方程为:y=0.93x′+0.10,背板宽度与腹板长度的形态生长方程为y′=1.08x′-0.14,壳高与腹板长度的形体生长方程为:y′=0.88x′+0.46.     

检测抗冻蛋白生物学活性两种方法的比较

为了比较两种方法测定昆虫抗冻蛋白生物学活性的优劣,通过抗冻蛋白细菌低温保护实验测定菌液OD600和菌落计数两种方法同时研究洛氏脊漠甲抗冻蛋白对大肠杆菌的低温保护效果.实验表明发现这两种方法所得结果相近,相关系数r=0.82~1.0,相关性显著(p<0.05).菌落计数法的误差小于OD值法,适用于菌落数少的情况,OD值法适用于菌落密度大的情况,两种方法都可用于研究抗冻蛋白低温保护活性.     

痕量H2O2的酶催化-阳离子表面活性剂缔合物微粒共振散射光谱测定

在醋酸盐缓冲溶液中, 辣根过氧化物酶(HRP)催化H2O2与过量的I－反应生成 , 分别与阳离子表面活性剂(CS) 十四烷基苄基二甲基氯化铵(TDMAC)、十二烷基苄基二甲基氯化铵(DDAC)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、十八烷基苄基二甲基氯化铵(ODAC)、氯代十六烷基吡啶(CPC)、氯代十二烷基吡啶(DPC)和四丁基碘化铵(TBAI)形成TDMAC-I3, DDAC-I3, CTAB-I3, ODAC-I3, CPC-I3, DPC-I3和TBAI-I3缔合物微粒. 该缔合物微粒均在460 nm处有一个较强的共振散射峰. H2O2浓度在0.17×10－7～173×10－7, 0.43×10－7～173×10－7, 1.73×10－7～259×10－7, 1.73×10－7～86.4×10－7, 1.73×10－7～216×10－7, 0.86×10－7～259×10－7和0.86×10－7～86.4×10－7 mol&#8226;L－1范围内分别与各体系在468 nm处的共振光谱强度呈线性关系, 其检出限分别为0.86×10－8, 2.2×10－8, 8.6×10－8, 4.6×10－8, 3.6×10－8, 4.3×10－8和4.4×10－8 mol&#8226;L－1. 本文将TDMAC体系用于过氧化氢测定, 结果满意.     

䓛与鲱鱼精子DNA相互作用及其影响因素的光谱学分析

利用紫外-可见吸收光谱和共振光散射法研究䓛（chrysene，CHR）与鲱鱼精子DNA的相互作用，通过计算其DNA结合饱和值来评估CHR对DNA的结合能力。此外，还分别考察了温度，pH，氯化钠，氯化钙，维生素C，十二烷基磺酸钠等环境因素对CHR与DNA相互作用的影响，为下一步利用DNA构建消除CHR的方法奠定基础。紫外可见光谱显示, 加入DNA后，CHR的最大吸收峰出现减色效应且伴随有红移现象，这说明CHR与DNA的相互作用属于嵌插结合模式。共振光散射光谱结果表明CHR在468 nm处出现稳定的共振光散射峰。当CHR的浓度为2.59×10-6 mol·L-1时，其饱和DNA浓度为3.08×10-6 mol·L-1，CHR的DNA结合饱和值在25 ℃时为0.84，而当pH=7.40，30 ℃时，CHR的DNA结合饱和值则达到0.94。在此条件下，氯化钠，氯化钙，维生素C，十二烷基磺酸钠对CHR与DNA相互作用的影响也不同，相应CHR的DNA结合饱和值分别为0.84，0.76，1.25和1.07。以30 ℃时CHR的DNA结合饱和值为基准，各环境共存物下的相应DNA结合饱和值变化率分别为-10%，-19%，33%和14%，说明阳离子的存在会抑制CHR与DNA的结合，而一定浓度的维生素C和十二烷基磺酸钠则对CHR与DNA的结合有协同促进作用。本研究结果可为建立新的基于DNA嵌插的CHR去除法提供参考。     

土壤养分对春小麦苗期水分状况的影响

本文初步研究了半干旱农田以肥凋水的水分生理机制．在土壤含水量为１３％－１５％的条件下，氮肥和磷肥均可改善春小麦苗期叶片的水分状况．从而起到提高水分利用率的作用．实验表明磷肥的作用效率大于氮肥．说明磷肥可能是半干旱地区决定作物水分利用率的关键因素．     

"京亚"葡萄种子萌发特性及其卡那霉素抗性的研究

探讨了不同消毒条件下"京亚"葡萄种子在培养瓶中萌发的情况,获得"京亚"葡萄种子最佳消毒条件是70%乙醇15 S,o.1%升汞5 min;通过对"京亚"葡萄种子进行不同浓度GA3 浸种、不同浸种时间、不同培养基质和不同光照条件处理,得到优化的"京亚"葡萄种子萌发条件是GA34 000 mg/L浸种48 h,置于1/2MS培养基中暗光培养,萌发率为79.4%;对"京亚"葡萄种子抗卡那霉察特性的研究得到"京亚"种子抗卡那霉紊的临界浓度为40 mg/L.