长白山白眉蝮蛇蛇毒精氨酸酯酶1的研究Ⅱ.酶学性质和荧光光谱研究(续Ⅰ)

测得了长白山白眉蝮蛇毒精氨酸酯酶 1的最适反应的pH范围为 7.0～ 8.0 ,且与酶反应底物对甲苯磺酰-L -精氨酸甲酯 (TAME)的反应无明显的最适应反应温度 .荧光光谱的研究结果表明 :该酶的酪氨酸残基的荧光被色氨酸残基的荧光所掩盖 ;同步荧光光谱结果表明 :当发射波长与激发波长差Δλ分别为 2 0nm和 75nm时 ,精氨酸酯酶 1的荧光光谱分别由酪氨酸 (Tyr)和色氨酸 (Trp)残基所贡献 ,且处于亲水性环境中 ;精氨酸酯酶 1的荧光发射强度受溶液酸度变化的影响 .I- ,Acr和NBS对精氨酸酯酶 1的荧光淬灭结果表明这种酶中含有多个色氨酸残基 ,且处于不同的微环境中。     

H_2分子在Ni(110)表面吸附的位能面研究

本文采用改进的LEPS方法计算了H_2分子在Ni(110)表面的吸附位能面,结果表明H_2分子在表面吸附过程形成的吸附形态与分子接近表面的方式有关。分子垂直接近于表面时,仅有分子形态的吸附发生;而分子平行接近于表面时,可以形成分子吸附态和原子吸附态,表面吸附态的转变需要克服一个活化能为0.9～1.3eV的势垒。     

Ca2+离子对PLA2结构和功能的影响

从旅顺产白眉蝮蛇(Glyodius blomhoffi Brevicaudaus,GBB)蛇毒(GBBSV)中首次纯化得到了电泳纯和质谱纯磷脂酶A2(GBB-PLA2). 采用电泳、质谱、等离子体发射光谱、紫外、荧光光谱测试技术对GBB-PLA2进行了系统表征. HPLC-ESI-MS法测得的精确分子量为13 965.07 amu,HPLC-ESI-MS/MS法鉴定GBB-PLA2为江浙蝮蛇和尖吻蝮蛇蛇毒PLA2的同源性蛋白,分别得到4个和1个同源性肽段. 凝胶过滤、质谱和SDS-PAGE测试技术结果表明,GBB-PLA2以稳定的单体形式存在. 电感耦合等离子体发射光谱分析法(ICP-AES)测得每1个磷脂酶A2含有1个Ca2+离子,Ca2+是PLA2活性所必需的. Ca2+的除去使PLA2活性降低90%,外加Ca2+明显加速PLA2水解底物DPPC的速度. Ca2+起稳定PLA2结构的作用,可使GBB-PLA2的热变性温度提高3 ℃.     

四(4－N-吡啶基)卟啉衍生物的合成及表征

阳离子卟啉配体;配合物;还原电位;四(4－N-吡啶基)卟啉衍生物的合成及表征     

中波紫外线与化学致癌物诱导下HaCaT细胞的蛋白表达应答

对角质形成细胞HaCaT分别进行中波紫外线(UVB)照射、2,4-二硝基苯磺酸(DNBS)刺激及UVB+DNBS(UD)共同刺激, 利用二维荧光差异胶内凝胶电泳(2D DIGE)、DeCyder定量分析软件和HPLC-nESI-MS/MS分析技术, 对HaCaT细胞产生的差异表达蛋白进行了鉴定. 有65个蛋白质点发生了明显表达差异(P<0.05), 与UVB或DNBS单独处理细胞相比, 有41个蛋白点表现为UVB和DNBS的正协同效应, 13个蛋白点表现为负协同效应, 5个蛋白点与UVB单独处理相近, 6个蛋白点与DNBS单独处理相近. HPLC-nESI-MS/MS从65个差异表达蛋白质点中共鉴定出60种单一(Unique)蛋白. 采用生物信息学方法对这些鉴定蛋白所涉及的分子功能、参与的生物学过程及信号通路进行了系统分析. 实验得到了与紫外辐射和化学诱导损伤的直接相关蛋白, 有助于研究不同环境条件下皮肤癌的形成及皮肤疾病的有效防护与治疗.     

卟啉-金属氧簇超分子化合物的光谱及电催化氧还原

应用紫外可见吸收光谱研究了meso 四(4 N 苄基吡啶基)卟啉(MTBPyP4＋,M=H2,Zn)阳离子与金属氧簇阴离子(SiW12O4－40)在水溶液中的光谱行为. 光谱演变及Job图表明MTBPyP4＋与SiW12O4－40在水溶液中可形成稳定的1∶1的超分子化合物. 同时本文还考察了化学计量为1∶1的[CoTBPyP][SiW12O40]超分子化合物的电催化分子氧还原行为, 表明该类超分子化合物有望成为一类新的催化氧还原的修饰电极材料.     

胶内差异双向电泳-电喷雾串联质谱筛选UVB损伤皮肤细胞潜在的蛋白质靶标

联用胶内差异双向电泳(2D-DIGE)和高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-nESI MS/MS)鉴定人角质形成细胞HaCaT应答中波紫外线(UVB)损伤的差异表达蛋白,筛选UVB影响皮肤细胞正常生理功能潜在的靶标蛋白.结果表明:UVB辐射明显影响HaCaT细胞的蛋白质表达谱,DeCyder软件在每块DIGE凝胶上...     

烷烃的取代反应——戊烷、己烷和庚烷的溴化

本文用元素溴、N-溴代二乙胺和N-溴代丁二酰亚胺,对戊烷、已烷和庚烷进行光溴化,发现这三种溴化剂所得的溴戊烷、溴已烷和溴庚烷,它们所含异构体的比例都各不相同.其中以2-位异构体含量最多,1-位异构体几乎没有.作者等以溴分子的活性与烷基自由基移位进行解释,并与光照氯化结果相比较,氯化由于氯比较活泼,自由基来不及转位,即与氯反应,因而1-位异构体含量多。     

金属离子对蛇毒蛋白生物活性及结构效应的影响

从旅顺产白眉蝮蛇(Gloydius blomhoffii brevicaudus, GBB) 蛇毒中纯化得到了3种电泳和质谱纯蛋白活性组分, 其酶解肽段采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-nESI-MS/MS)进行序列测定, 与其它同源性蛇毒蛋白氨基酸序列比对发现, 3种蛋白为新的蛇毒磷脂酶A₂、类凝血酶和金属蛋白酶, 分别将其命名为GBB-bPLA₂, GBB-TLE和GBB-MP. 电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES) 测得每个GBB-bPLA₂和GBB-MP中含有一个Ca²⁺; 每个GBB-TLE中含有2个Zn²⁺. Ca²⁺可分别使GBB-bPLA₂和GBB-MP的荧光发射波长向短波方向移动2.0和1.6 nm, 使二者的荧光发射强度提高14.0%和11.0%; Ca²⁺的存在可显著提高二者的热稳定性, 使GBB-bPLA₂和GBB-MP的热变性温度分别提高1.5和2.0 ℃. Zn²⁺使GBB-TLE的荧光发射强度增高4.3%, 但对GBB-TLE的酯酶水解活性、荧光发射波长和热变性温度无显著影响. 金属离子的存在能够不同程度地影响蛇毒蛋白结构热稳定性, 但对蛇毒蛋白生物活性的作用则不同.     

meso-四(4-N-甲基吡啶基)卟啉-金属-氧簇超分子化合物的光谱及电催化氧还原行为研究

采用紫外可见吸收光谱研究了meso -四 ( 4 -N -甲基吡啶基 )卟啉 (M1 TMPyP ,M1 =H2 ,Zn)阳离子与金属-氧簇阴离子 (SiW1 2 O40 4 - )在水溶液中的光谱行为 .光谱演变及Job′s图表明M1 TMPyP与SiW1 2 O40 4 - 在水溶液中可形成相对稳定的 1∶1的超分子化合物。溶液的紫外可见吸收谱图明显不同于未相互作用的反应物吸收谱图的加和 ,表明有新化合物生成 ,且卟啉的发色团与SiW1 2 O40 4 - 通过静电发生强相互作用 ,同时考察了化学计量为1∶1的 [CoTMPyP][SiW1 2 O40 ]超分子化合物的电催化氧还原活性及其稳定性 ,表明该类超分子化合物有望成为新一类的催化氧还原的修饰电极材料。