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采用高压微波辅助提取法提取牛黄上清丸中的黄芩苷, 利用蜜丸的粘性, 将蜜丸涂敷在自制毛玻璃片表面后, 置于高压微波提取装置中进行提取, 同时与直接将蜜丸切块置于微波装置进行了对比. 相似文献
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还原型谷胱甘肽(GSH)的巯基和两个羧基分别与2,4-二硝基氯苯(DNCB)和甲醇反应,合成出半抗原Hp2;通过戊二醛将Hp2连到牛血清白蛋白(BSA)上,合成出全抗原Ag2;吸收光谱法测出Hp2在BSA上的平均连接量为30.2mol/mol.用标准的单克隆抗体(McAb)制备技术,制备出阳性McAb(IgG)-4G3;4G3对GSH和半抗原Hp2的解离常数(K_D)表明,单克隆抗体4G3对GSH具有较强的亲和力.对4G3进行两步化学诱变(Chemical Mutation),诱变后即为具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性的含硒抗体酶(m4G3),m4G3的GPX活力为9337U/μmol,是兔肝GPX(RL-GPX,5780U/μmol)的 1.6倍,曾报道的含硒抗体酶m4A4(1239 U/μmol)的7.5倍,制备出活性高于天然酶的抗体酶,证实了半抗原设计思想.将m4G3拆分成Fab和Fc片段,发现m4G3的活性中心位于Fab片段上,m4G3的硒代半胱氨酸(Se-Cys)含量为1.9 mol/mol. 相似文献
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Perkins等[1]用MALDI/TOF/MS对不同种类蛇毒中神经毒素进行了分析,彭嘉柔等[2,3]对江浙蝮蛇和蛇毒粗组份进行了初步质谱表征.但蛇毒蛋白纯化困难,因此对单一组份的研究较少且不系统.本文以白眉蝮蛇蛇毒(AgkistrodonblomhoffiiUssurensis,ABUV)为原料,纯化得到了精氨酸酯酶(Arginineesterase,AEase)、磷脂酶A2(PhospholipaseA2,PLA2)、纤溶酶(fibrinolyticenzyme)和L-氨基酸氧化酶(L-aminoacidoxidase),并且用MALDI/TOF/MS法对它们和蛇毒粗毒进行了系统研究.1 实验部分1.1 仪器和药品 激光解吸质谱仪为美国Molecular公司L… 相似文献
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白眉蝮蛇蛇毒L-氨基酸氧化酶的纯化与表征 总被引:3,自引:0,他引:3
用离子交换和凝胶过滤层析技术从长白山白眉蝮蛇蛇毒(Agkistrodonblomhoffiusurensis)中分离得到了L氨基酸氧化酶(Laminoacidoxidase),经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDITOFMS)鉴定,发现L氨基酸氧化酶由两个不相等的亚基组成,一个亚基的分子量约为36000,另一个亚基分子量约为57000.以L-亮氨酸作为底物进行L-氨基酸氧化酶活力测定时发现,其反应的适宜pH值为45.5和89,紫外吸收光谱明显表现出核黄素蛋白的特征. 相似文献