微量pH电位滴定测定氨基酸、二肽和三肽与锌(Ⅱ)、镉(Ⅱ)配合物的稳定常数

His、Gly-His、Ala-His、Gly-Gly和Gly-Gly-Gly与锌、镉的配合物的稳定常数已有报道,由于不同作者的实验方法和数据处理方法不同,测定结果也不尽一致.有些数据是用手算方法进行数据处理的,求得的稳定常数可能不够精确.本工作采用文献推荐的微量pH电位滴定技术,对上述配体与Zn(Ⅱ)、Cd(Ⅱ)配合物稳定常数进行了测定.     

酶解鲐鱼蛋白制取低分子肽的进一步研究

确定了用胰蛋白酶－木瓜蛋白酶混合酶法水解鲐鱼蛋白制取低分子肽的最适工艺条件为：胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶量比为１：４（Ｗ／Ｗ），肉水比为１：１，温度５５℃，ｐＨ７．０。在加酶量为鱼糜中蛋白质含量的１．２５％，反应时间６ｈ的条件下，制得的低分子肽无苦味，氮利用率可达７８．５％，平均链长为２．８０，游离氨基酸含量为２６．５７％，必需氨基酸含量占总氨基酸的４１．８％，且比例合理，富含镁，是一种很有开发前途的功能食品原料。     

基于次血红素六肽的过氧化氢和葡萄糖灵敏比色方法

采用次血红素六肽(DhHP-6)催化H₂O₂氧化4-氨基安替吡啉-氯代苯酚显色体系,建立了测定H₂O₂和葡萄糖的方法。 研究了pH值、底物浓度和DhHP-6浓度对实验的影响,检测了比色方法的反应线性、稳定性、相关性和回收率。 在最佳反应条件下,DhHP-6在不同时间及温度条件下,活性要优于过氧化物酶(POD);DhHP-6催化H₂O₂ 的米氏常数(K_m)和最大反应速率(v_max)分别为0.171 mmo/L和4.22×10^-6 mol/s;H₂O₂响应的线性范围为0.39~25.0 mmol/L;高、中、低 3水平测定的变异系数(CV)和加标回收率分别在1.29%~2.16%和94.5%~101.1%之间;与葡萄糖商品试剂盒比较相关系数R²=0.9946;36例血液样品中的葡萄糖浓度在4.26~17.48 mmol/L之间。 与葡萄糖检测商品试剂盒之间的两组数据经统计差异不显著(P>0.05)。 该方法是一种简单、廉价、方便、灵敏的比色测定方法。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中蘑菇毒肽的含量

提出了用超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中6种蘑菇毒肽含量的方法。取人血浆样品1.0mL,先后用乙腈-甲醇(1+1)混合溶液(每次用3mL)超声提取10min,离心5min,合并2次上层提取液,于50℃吹氮至近干,加入甲醇和5%(体积分数)氨水(1+4)的混合溶液溶解残渣,并定容至1.0mL,此溶液经0.22μm滤膜过滤,取滤液进行色谱分离和质谱测定。选用BEH C_(18)色谱柱作为固定相,并用不同比例的(A)甲醇和(B)5%(体积分数)氨水的混合液作为流动相进行梯度洗脱。质谱分析时,选择电喷雾离子源正离子(ESI+)模式在弱碱性条件下,用多反应监测(MRM)模式测定6种蘑菇毒肽(α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟基鬼笔毒肽、羧基二羟基鬼笔毒肽和羧基三羟基鬼笔毒肽)的含量。上述6种蘑菇毒肽标准曲线的线性范围均在3.12～125μg·L~(-1)之间,其测定下限(10S/N)在2.0～5.0μg·L~(-1)之间。回收试验测得回收率在78.4%～106%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在2.3%～14%之间。