制备温度对硫辛酸脂质纳米粒的影响

通过脂质和乳化剂筛选实验得到适合于硫辛酸(ALA)负载的脂质基体和乳化剂,在此基础上分别在55℃和65℃下用高压均质法(HPH)制备了硫辛酸脂质纳米粒(ALA-NLC)。通过高效液相色谱(HPLC)、动态光散射(DLS)、原子力显微镜(AFM)、微差示扫描量热(micro-DSC)研究制备温度和保存时间对ALA-NLC性质如ALA的负载量、粒径、稳定性及形貌的影响。结果表明,制备温度和保存时间对粒径、zeta电位及ALA负载量均有较大影响。Micro-DSC结果表明,55℃和65℃下制备的ALA-NLC都可能存在过冷态现象,但是55℃制备的样品更稳定,所得配方在ALA膳食补给上具有潜在的应用价值。     

可生物降解固体脂质纳米粒的制备、表征及药物的体外释放

以可生物降解材料硬脂酸为载体, 以葛根总黄酮为模型药物, 采用乳化蒸发-低温固化法制备固体脂质纳米粒. 采用透射电镜研究载药纳米粒形态, 激光粒度分析仪测定其粒径, X射线衍射仪进行物相鉴别, 并对纳米粒的包封率及体外释药特性等进行了研究. 分析结果表明, 所制备硬脂酸固态脂质纳米粒为类球实体, 粒径分布比较均匀, 平均粒径为(263.82±3.6) nm, 包封率为(67.53±0.12)%. X射线衍射分析证明药物以分子或细小粒子分散于脂质骨架中. 体外释药研究结果表明, 纳米粒体外释药先快后慢, 12 h累积释药50%, 包封于降解材料骨架内的药物通过骨架溶蚀缓慢释放. 药物的体外释放符合Higuchi方程.     

固体脂质纳米粒作为药物载体

固体脂质纳米粒是一种新型的纳米给药系统.本文综述了固体脂质纳米粒作为药物载体的研究进展,包括固体脂质纳米粒的组分选择、制备方法、表面修饰,并且对物化性质分析、给药途径以及载药和释放进行了讨论.     

高效液相色谱法测定紫杉醇及其脂质纳米粒包封率的方法学研究

建立了一种对本实验室研制的新型载带紫杉醇脂质纳米载体(nanostructured lipid carriers,NLC)进行定性定量分析的新方法,并计算紫杉醇的包封率.用反相高效液相色谱法进行测定.采用C18柱对未纯化的紫杉醇脂质纳米粒进行分离检测,梯度法分离,流动相为水和乙腈,紫外检测器波长为227 nm,荧光检测器激发波长为428 nm,发射波长为515 nm.结果表明梯度法对紫杉醇脂质纳米粒和游离紫杉醇的分离效果良好,辅料和试剂无干扰,紫杉醇在3.0～80.0 mg/L之间有良好的线性关系,线性方程为:Y=42100ρ 8250,r=0.9999,日内RSD为0.15%(n=5),日间RSD为0.25%(n=4),平均回收率为109.09%,RSD为0.12%,通过本方法,测定的紫杉醇纳米粒平均包封率为68.78%.本法可对紫杉醇进行定量分析,也可对紫杉醇脂质纳米粒制剂进行定性和定量分析,可以直接测量计算其包封率.     

基于HPLC-MS技术的黄颡鱼中不同部位脂质成分分析

利用超高效液相色谱-飞行时间质谱技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析了黄颡鱼不同部位的脂质成分。采用甲醇-氯仿(1∶1,体积比)对血清、肌肉和肝脏进行脂质成分提取。液相色谱采用C8色谱柱,柱温40℃,流动相A为乙腈-甲醇-异丙醇(1∶1∶1),流动相B为乙腈-水(0.1%甲酸,0.01%氯化锂)。根据高分辨质谱获得精确分子量,推测出元素组成,并结合脂质成分的二级质谱裂解规律,在血清、肌肉和肝脏中共鉴定出85个脂质成分,主要有PC,Lyso-PC,PE,Lyso-PE,PI,PS,DAG,TAG,SM和Cer。在这3个部位中有19个共有脂质成分,包括Lyso-PC 16∶0,9个PC,3个PI,4个TAG和2个SM。此外PS和Lyso-PE仅在肌肉中鉴定出,分别为PS 18∶0/22∶6,Lyso-PE 16∶0和Lyso-PE 18∶1;神经酰胺仅在肝脏中观察到,为Cer(d18∶1/24∶1);而PE和DAG只在肌肉和肝脏中存在,在血清中未发现。该方法操作简单、灵敏、高效,为快速、全面了解黄颡鱼中的脂质分布提供了科学依据。     

提取脂质的改良干柱法

报道了一种提取脂质的改良干柱法。用低毒溶剂正己烷/异丙醇(3∶2,V/V)作洗脱剂代替干柱法中毒性较强的二氯甲烷/甲醇,通过对重要提取条件的考察,建立了改良干柱法提取脂质的最佳条件,并对干柱法提取机理进行了探讨。使用7.5cm×27mmi.d.玻璃层析柱,内装2.0gCaHPO4·2H2O/Celite545(1∶9),再装入样品、无水Na2SO4、Celite545混合物制备干柱。用40mL正己烷/异丙醇(3∶2,V/V)进行洗脱,可在40min内洗脱完毕。测定了6种肉制品的脂质含量,并做了脂肪酸分析,结果与传统的氯仿/甲醇法一致,统计检验表明,两方法间不存在显著性差异,但改良干柱法洗脱剂毒性更低、试剂用量更少。     

蟾毒灵纳米结构脂质载体的制备及性质研究

本文采用高压均质法成功将脂溶性药物蟾毒灵(BUF)负载于纳米结构脂质载体(NLC)中,并对其物理化学性质、体外释放性质及体外肿瘤细胞毒性等进行了研究。结果表明,制备获得的蟾毒灵纳米结构脂质载体(BUF-NLC)粒径小、分散度和稳定性好,具有明显的药物缓释作用。MTT实验表明,将BUF负载于NLC后,作用初期对肿瘤细胞的毒性作用低于原药,作用时间延长,毒性与原药达到一致,说明NLC的包裹并未降低蟾毒灵的药效,而是逐步释放出来,这对克服临床应用中蟾毒灵的高毒副作用有非常重要的意义。     

脂质组学分析中样品前处理技术的研究进展

脂质不仅是细胞膜的主要组成部分,还参与一些生命活动如能量存储、信号传导等,在生命体中发挥着重要作用。近年来,越来越多的研究表明脂质的变化与一些重大疾病的发生发展密切相关,脂质组学研究对理解疾病的发生机制及过程具有重要意义。在脂质分析过程中,由于样品基质的干扰或被分析物浓度的限制,通常需要对样品进行前处理,以得到最佳的分析性能。该文综述了脂质组学分析中的样品前处理技术,包括脂质的提取方法（如液液萃取、固相萃取等）和针对不同类脂质的化学衍生化技术在各领域,尤其是生命分析和代谢组学中的应用,并对脂质组学分析中的样品前处理技术的发展进行了展望。     

脂质组学血清样品处理方法及其快速高分辨液相色谱-质谱分析

通过系统考察血清样本前处理方法、优化液相色谱条件及质谱检测参数,建立了脂质组学血清样本前处理及其快速高分辨液相色谱-质谱(RRLC-MS)分析方法。血清样本中加入二氯甲烷-甲醇(CH2Cl2-CH3OH,2∶1,V/V)混合溶剂进行脂质提取,采用ACQUITY UPLC CSH C18色谱柱(100 mm×2.1mm,1.7μm),以10 mmol/L甲酸铵溶液(含0.1%甲酸)为流动相A,乙腈-异丙醇(1∶1,V/V)为流动相B,梯度洗脱,采用正负离子检测模式电喷雾电离(±)ESI、正离子检测模式大气压化学电离(+)APCI方式进行质谱检测。对血清中脂肪酸、甘油脂、鞘磷脂、甘油磷脂和胆固醇(酯)5类14种代表性脂质类成分进行了方法学考察。结果表明,方法灵敏度高、精密度及稳定性良好。对穿插在检测序列中的质控样本检测结果进行主成分分析(PCA),证明了本方法获得数据的可靠性良好,适用于脂质组学研究。     

大麻二酚纳米结构脂质载体的制备及其性质研究

通过高压均质法制备包载大麻二酚(CBD)的纳米结构脂质载体(CBD-NLC),并考察其载药量、包封率、平均粒径、Zeta电位、长期储存稳定性等物理化学性质,筛选获得CBD-NLC最佳配方。在优化条件下制备的CBD-NLC平均粒径为163.7±1.3nm,多分散性指数(PDI)为0.14±0.02,包封率和载药量分别为95.5±1.0%和9.8±0.1%。通过透射电镜、傅里叶变换红外光谱、差示量热扫描、X射线衍射对CBD-NLC进行表征,结果表明,CBD被很好地负载在NLC中,CBD-NLC主要为球形结构。与文献报道相比,纳米结构脂质载体能够包载CBD,具有较好的载药量和包封率,可解决CBD的溶解性及稳定性问题,提高CBD的有效利用度。制备的CBD-NLC可用去离子水以任意比例稀释,具有良好的稳定性,便于其在医药产品中的应用。     

基于脂质代谢组学研究褐藻糖胶对黄颡鱼幼鱼的影响

采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱 (UPLC-Q-TOF-MS) 技术,结合多元变量数据分析方法,研究0.1%褐藻糖胶喂养黄颡鱼幼鱼1~8周的脂质代谢组学.通过不同喂养时间的黄颡鱼脂质成分的重要性(VIP)值和差异性(P)值,筛选出98个差异性代谢物,其中鉴定出与褐藻糖胶对黄颡鱼随喂养时间变化的影响有重要作用的11种脂质生物标志物,包括Lyso-PC 16∶0、PC 22∶6/16∶0、PE 22∶6/16∶0、PI 18∶0/22∶6、DAG 16∶0/16∶0、DAG 16∶0/18∶1、DAG 18∶1/18∶1、TAG 20∶5/16∶0/18∶3、TAG 20∶4/16∶1/18∶2、TAG 16∶0/18∶2/20∶5 和TAG 18∶2/14∶0/18∶1.研究表明,经0.1%褐藻糖胶喂养不同时期的黄颡鱼中Lyso-PC、PC、PE和PI的含量在第8周时达到最大值;DAG的含量呈现出先减少后增加的变化规律,而TAG的变化不定,TAG 18∶2/14∶0/18∶1、TAG 20∶5/16∶0/18∶3和TAG 20∶4/16∶1/18∶2的含量随着喂养褐藻糖胶时间的延长而增加,而TAG 16∶0/18∶2/20∶5呈减少的趋势.根据上述实验结果,推测褐藻糖胶可能通过调节脂质成分的含量来增加黄颡鱼幼鱼的免疫力.本研究结果为褐藻糖胶对黄颡鱼脂质代谢响应机理的影响的研究提供理论依据.     

醋酸曲安奈德固脂纳米粒载药量及包封率的反相液相色谱法测定

建立了醋酸曲安奈德固脂纳米粒药载药量及包封率测定的反相高效液相色谱法; 采用Hypersil ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm), 甲醇-水-乙醚(体积比68∶32∶4)为流动相, 流速为1.0 mL·min-1, 紫外检测波长240 nm,柱温30℃,进样量为20μL,炔诺酮作内标;通过调节纳米粒表面Zeta电位使纳米粒凝聚,离心分离游离药物和纳米粒; 该方法结果准确、简便、重复性好, 可用于醋酸曲安奈德固脂纳米粒包封率及载药量的测定。     

表面修饰探针纳升电喷雾质谱脂质组学对大型溞和蚤状溞的快速鉴别

采用表面修饰探针敞开式纳升电喷雾质谱技术建立了脂质组学方法, 以实现溞属(Daphnia)生物大型溞和蚤状溞的快速鉴别. 采用微尺度表面修饰探针直接从Daphnia体内萃取和富集出脂质化合物, 然后在常压敞开条件下进行纳升电喷雾质谱分析, 利用高分辨率质谱仪获得脂质指纹图谱并进行脂质种类和结构鉴定. 采用该方法获得了大型溞和蚤状溞的脂质指纹图谱, 并研究了大型溞和蚤状溞体内的脂质组成特征. 通过结合化学计量学手段实现了大型溞和蚤状溞的快速区分, 并鉴定了相关的生物标志物. 结果表明, 所建立的微萃取探针纳升电喷雾质谱脂质组学方法具有分析速度快、 灵敏度高的优点, 可用于Daphnia属生物的快速鉴定和识别.     

高效液相色谱-质谱法对冠心病患者血清的脂质组学研究及其临床意义

采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)对冠状动脉慢性完全堵塞(CTO)患者在不同患病阶段的血清试样进行了脂质组学研究。试验采集了CTO疑似人群、CTO患者及CTO患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)手术后24h和72h的血清,分别采用氯仿和体积比为25∶75的乙酸乙酯-异辛烷混合溶液提取脂质,离心分离后,上清液用于Shotgun法(MS)和多反应监测(MRM)法(HPLC-MS)分析。样本直接进样电喷雾(ESI)质谱分析,用于Shotgun法进行广谱的脂质组学分析鉴定。通过Analyst 1.6软件提取质谱数据,并通过生物信息学工具"Lipid MS Predict"确认脂质分子,总共得到1 504种脂质分子,并利用MRM法确认其中有临床意义的631个脂质分子。通过生物信息学分析,得到对于CTO具有诊断价值的包括胆固醇酯CE 16∶1和溶血磷脂酰乙醇胺LPE 18∶1在内的9个标志性脂质分子。结合临床回访结果和脂质组学研究数据证实,CTO患者手术治疗后的预后情况和磷脂酸、磷脂酰胆碱、胆固醇酯等3类脂质的含量变化有关。确定的脂质标志物应用于临床诊断早期冠心病和评估手术治疗后的风险,具有显著而明确的临床医学价值。     

功能脂质组质谱分析

近年来,鉴于脂质在疾病发生发展过程中的重要作用,功能脂质组研究受到广泛关注.质谱技术是功能脂质组分析的主要手段,本文将介绍用于功能脂质组分析的质谱技术,概述国内功能脂质组质谱分析的研究进展,并提出问题和展望,以期可以在现有方法上进行改进提高,用以发现更多的功能脂质,进而用于发展疾病生物标志物及治疗靶标以及研究疾病机理等,并期待推进功能脂质组学研究的发展.     

基于色谱-质谱联用的脂质分析样品前处理技术研究进展

脂质作为细胞膜和亚细胞膜的主要结构成分,在能量来源、细胞信号传导等多种生物学过程中发挥着重要作用。近年来,脂质分析受到越来越多的关注,其中色谱-质谱联用技术在脂质分析中占据主导地位。由于样品基质复杂,样品前处理有富集痕量物质和减少基质干扰的作用,成为脂质分析中的一个关键步骤。该文综述了近年来基于色谱-质谱联用技术的脂质分析中样品前处理技术的研究进展和应用,对各种样品前处理技术进行了阐述和总结。基于液相的萃取方法有液-液萃取和单一有机溶剂萃取。基于固相的萃取方法包括固相萃取和固相微萃取。场辅助萃取方法包括超临界流体萃取、加压流体萃取、微波辅助萃取和超声辅助萃取。此外,还介绍了在线联用样品前处理方法和用于活体分析的样品前处理方法。最后,对基于色谱-质谱联用的脂质分析样品前处理技术存在的问题及发展趋势进行了探讨。样品前处理技术的发展将提高脂质分析的灵敏度、选择性和分析速度。     

鬼臼毒素固体脂质纳米粒的抗肿瘤活性及药代动力学研究

评价鬼臼毒素（PPT）被固体脂质纳米粒（SLN）包裹前、后的抗肿瘤效果以及在动物体内的药代动力学特点.建立昆明小鼠S180肉瘤模型,将PPT-SLN、PPT分别以5mg/kg的等效剂量对小鼠每天腹腔注射,连续3周,每天量取肿瘤体积,并观察小鼠状态、体重的变化.末次给药24h后处死小鼠,剥取瘤块称重,计算抑瘤率.将PPT-SLN、PPT以10mg/kg的等效剂量对小鼠腹腔注射,于不同时间点采血,以HPLC分析血液中PPT的含量,绘制血药浓度-时间曲线,并计算药代动力学参数.研究发现,肿瘤小鼠在连续腹腔注射PPT-SLN后,肿瘤体积与重量比对照组、PPT组明显降低,抑瘤率达58.13%,抑瘤效果显著,且小鼠体重增加量比PPT组多.药代动力学结果显示,在被纳米载体包裹后,PPT在血药中的浓度得到了提升,释放时间有所延长,生物利用度也有较大提高.结果表明SLN包裹PPT能够有效地提高其血药浓度,起到缓释效果,提高其抗肿瘤活性,并降低毒性,具有较好的应用前景.     

基于超高效液相色谱－四极杆－静电场轨道阱质谱的结直肠癌患者血清脂质组学研究

该研究采用超高效液相色谱－四极杆－静电场轨道阱质谱结合主成分分析（PCA）、正交偏最小二乘判别分析（OPLS－DA）对结直肠癌（CRC）患者和健康人的各50例血清样本进行脂质组学分析,通过P < 0.05和倍数变化 > 1.5或 < 0.67筛选组间差异脂质,利用受试者工作特征曲线（ROC）验证其诊断能力,为基于脂质组学的CRC筛查提供参考。结果表明,两组血清脂质谱存在明显差异,发现155种差异脂质,以磷脂酰胆碱（PC）和甘油三酯（TAG）为主,涉及磷脂酰胆碱代谢和甘油三酯代谢。筛选并鉴定9个脂质标志物,包括棕榈酰乙醇胺、棕榈酸、鞘氨醇、鞘磷脂（SM）d40∶3、SM d36∶0、TAG 58∶1、PC 34∶2、PC 36∶6、PC 38∶7,其ROC曲线面积（AUC）均大于0.80,特异性与灵敏度较高,对于CRC筛查具有较高的临床诊断价值和应用潜力。     

试剂加入次序不同造成镉对肝脂质过氧化的诱导或拮抗作用

采用TBA检测方法，体外观察了CaCl2对大鼠线粒体脂质过氧化产物丙二醛(MDA)生成的毒性作用和对半胱氨酸-Fe^2 诱导的线粒体脂质过氧化的影响。结果表明，1 μmol／L～1mol／L CdCl2均能诱导肝线粒体的脂质过氧化，使MDA含量增加，但只有CdCl2浓度高于1 mmol／L时，诱导作用才与对照组有显著性差异。在Fe^2 -Cd^2 半胱氨酸共同对肝线粒体作用时，由于试剂加入顺序的不同，100～1000 mmol／L CdCl2对线粒体脂质过氧化可产生诱导或拮抗作用。结果提示，CdCl2可直接诱导线粒体脂质过氧化，在做几种金属离子体外协同对肝脂质过氧化影响的实验时，应考虑试剂加入顺序所产生的不同影响。     

脂质与健脑

脂质是人类的基本营养物质之一,是最重要的健脑营养素。本文介绍了脑的发育特点与脂代谢的关系;脂质的结构和分类,以及脂质的健脑益智作用。旨在正确认识脂类,科学摄取脂类,提高智力,促进素质教育。