手性酰氯探针对于盐酸兰地洛尔及其立体异构体识别的质谱研究

采用质谱技术,利用手性探针酰氯对盐酸兰地洛尔及其3个立体异构体进行了区分识别研究。本研究采用了两个手性酰氯探针N-对甲苯磺酰基-L-苯丙氨酰氯(TSPC)和(-)-莰烷酰氯与盐酸兰地洛尔反应产生共价结合产物,放大了盐酸兰地洛尔与其立体异构体的结构差异。在二级串联质谱实验中,与手性酰氯探针结合的产物容易丢失羟基产生碎片离子m/z 793和672,在不同构型的产物离子所产生的丢失水分子的碎片离子的丰度具有一定差异,(-)-莰烷酰氯衍生化产物的碎片离子m/z 603由于立体结构差异,导致稳定性不同,使得不同构型的碎片离子丰度产生差异,可通过比较药物和异构体杂质在二级质谱中特征碎片离子丰度的差异,实现盐酸兰地洛尔及其立体异构体的有效区分识别。所有碎片的元素组成都经过高分辨质谱进行确证。本研究通过质谱法对于盐酸兰地洛尔及其立体异构体进行快速、简单的区分识别,为盐酸兰地洛尔立体异构体杂质的质谱分析相关研究提供数据支持。     

超高效合相色谱法同时测定复合维生素片中11种脂溶性维生素及其衍生物

建立了超高效合相色谱法(Ultra performance convergence chromatography,UPC2)分离和测定复合维生素片中11种脂溶性维生素(A,D,E,K)及其衍生物的方法。超高效合相色谱(UPC2)技术集合超临界流体色谱(Supercritical fluid chromatography,SFC)和超高效液相色谱(Ultra performance liquid chromatography,UPLCTM)的技术优点,流动相以CO2为主体,乙腈为助溶剂梯度洗脱。选用Waters Acquity UPC2HSS C18SB色谱柱(100 mm×3.0 mm 1.8μm),流速1 m L/min,检测波长为284 nm。方法检出限在1.5~2.0 mg/L之间;VK1,VK2,VK3和VD3的线性范围分别为3~300 mg/L;VA、VA棕榈酸酯、VA甲酸、VE、VE醋酸酯、VE琥珀酸酯和VD2的线性范围分别为5~300 mg/L;加标回收率范围为97.31%~98.76%;相对标准偏差为0.41%~0.96%,可以满足复合维生素片中11种脂溶性维生素(A,D,E,K)及其衍生物的方法要求。     

高效液相色谱法测定小鼠尿中的盐酸戊乙奎醚S型异构体

建立了测定动物体液中S型盐酸戊乙奎醚异构体的高效液相色谱法,研究了S型异构体在小鼠体内的排泄。以Spherisorb SiO2色谱柱(150 mm×4.6 mm i.d.,5 μm)分离S型异构体,外标法定量。S型盐酸戊乙奎醚异构体的线性范围为0.5-100.0 mg/L, 最低检测质量浓度为0.1 mg/L。肌注给药后不同时间内,S型异构体在小鼠尿中的比值(S-1/S-2)存在显著性差异。48 h内各异构体在尿中的排泄量明显不同,说明S型异构体在小鼠体内可能呈现立体选择性排泄。此法简便、经济,可用于动物     

在线固相萃取-液相色谱串联质谱法测定阿姆西汀异构体的药代动力学差异

建立了在线固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法(On-line SPE HPLC-MS/MS)测定大鼠血浆中S/R-阿姆西汀手性异构体的方法。血浆样品经过以下预处理步骤:采用甲醇-乙腈(50∶50,V/V)沉淀蛋白;应用On-line SPE将血浆样品中的其它杂质去除;将保留在SPE柱上的阿姆西汀和内标洗脱后用分析柱进一步分离。分离后再用串联质谱法分别测定大鼠血浆中S/R-阿姆西汀的含量。SPE柱为Retain PEP Javelin(10 mm×2.1 mm);分析柱为ZORBAX SB-C18(50 mm×2.1 mm×3.5μm)。质谱采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)模式,检测离子为正离子,分别选择m/z 292.1/154.0和260.4/116.2作为S/R-阿姆西汀和内标(普萘洛尔)的检测离子对。结果表明,S/R-阿姆西汀的线性范围为0.2~1000μg/L,相关系数R分别为0.9903和0.9951,批内精密度RSD分别为1.2%~12.0%和0.4%~11.2%,回收率分别为94.2%~101.6%和94.3%~109.4%之间。本方法显著提高了阿姆西汀的检测灵敏度,可以满足大鼠灌胃给予阿姆西汀两种异构体的药代动力学研究要求。     

UPC~2-MS法快速检测蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖

建立了蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的超高效合相色谱-质谱(UPC2-MS)快速检测的方法。样品先用少量的水溶解,再用正己烷/异丙醇(1:1,V/V)溶解,经ACQUITY UPC2BEH(100 mm×3.0 mm,1.7μm)色谱柱分离,以超临界CO2-甲醇(含0.1%NH3·H2O,V/V)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.8 m L/min,通过质谱检测器在负离子电喷雾模式下对目标化合物进行分析,外标法定量。检测结果表明:果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖在2~150 mg/L范围线性关系良好,R20.9990,定量限(LOQ,S/N≥10)为0.22~0.42 mg/L,高、中、低3个浓度水平的加标平均回收率在90.0%~107.5%范围,相对标准偏差(RSD,n=6)均小于4.0%。该方法简单快速,分离效果好,为蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的分离测定提供了新的色谱技术平台。     

毛细管电泳安培法用于尿样中β-阻断剂类兴奋剂药物的研究

利用毛细管电泳-安培法检测联用技术,建立了一种简单、灵敏、快速同时分离检测人体尿液中两种β-阻断剂类兴奋剂药物索他洛尔和塞利洛尔的新方法。以直径300μm的铂圆盘电极为检测电极(铂丝为辅助电极,Ag/AgCl为参比电极),在0.950 V的检测电位下,30 mmol/L Clark-Lubs缓冲体系(pH9.60)中,两种分析物在8 min内达到基线分离。在最佳条件下,其峰电流与0.15~60 mg/L索他洛尔与0.30~60 mg/L塞利洛尔呈现良好的线性关系,检出限分别为0.05 mg/L和0.09 mg/L,并将建立的方法成功地应用于人体尿样的分析。进一步研究了人体尿液中索他洛尔36 h内的排泄曲线及索他洛尔在尿液中的排泄规律,对奥运会中的兴奋剂快速检测具有一定的应用价值。     

超高效合相色谱-质谱法快速检测工业油酸中5种常见的脂肪酸

采用超高效合相色谱-质谱(UPC2-MS)技术,建立了工业油酸中5种常见的脂肪酸(软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸)的快速检测方法。样品用正己烷溶解,采用超临界CO2-甲醇/乙腈(1∶1,V/V)梯度洗脱,经Acquity UPC2BEH 2-EP色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,通过质谱检测器在负离子电喷雾模式下对目标化合物进行分析,外标法定量。通过对UPC2-MS条件的优化,5种脂肪酸在3 min内实现有效分离,目标物在0.5~100 mg/L范围内具有良好的线性(相关系数大于0.9985);在3个添加水平下,5种脂肪酸的回收率在89.3%~106.7%之间,相对标准偏差为0.8%~3.0%;方法检出限(S/N≥3)为0.07~0.26 mg/L。实际样品分析结果表明,本方法不但简单快速,分离效果好,而且无需对脂肪酸样品进行衍生化,同时为UPC2在油脂类相关领域的研究与开发提供一种快速有效的检测方法。     

微流控芯片非接触电导法测定感冒药中盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙芬

研究了用微流控芯片非接触式电导法分离检测感冒药日夜百服咛片中的两种主要成分盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙芬的方法。优化条件为:缓冲液20 mmol/L Tris 20 mmol/L H3BO3(pH=8.0);进样电压300 V;进样时间10.0 s;分离电压3.0 kV。非接触电导检测器激发电压60 V(Vp-p),频率60 kHz。两种成分的线性范围分别为20~1000 mg/L和10~1000 mg/L;检出限分别为10和5.0 mg/L;样品回收率分别为99.3%和97.6%。     

超高效合相色谱-质谱法分析研究单甘酯乳化剂中单甘酯的主要组成

建立了超高效合相色谱-质谱(UPC2-MS)快速分析3种单甘酯乳化剂(单油酸甘油酯、单亚油酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯)中单棕榈酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、单油酸甘油酯和单亚油酸甘油酯等4种主要的单甘酯的方法,并比较了这3种不同类别的乳化剂中此4种单甘酯的含量差异.采用正己烷/异丙醇(7∶3,V/V)直接溶解样品,以ACQUITY UPC2 BEH 2-EP色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)为分析柱,以超临界CO2-甲醇/乙腈(1∶1,V/V)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min.在电喷雾正离子模式下进行分析,外标法定量.结果表明:单棕榈酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、单亚油酸甘油酯在0.20 ～ 50 mg/L范围内具有良好线性,单油酸甘油酯在0.25 ～ 62.5 mg/L范围内具有良好的线性(相关系数不小于0.9983);定量限(S/N≥10)为0.018～0.046 mg/L;在3个加标水平下,样品的回收率在88.0％～110.5％,相对标准偏差为1.1％ ～4.1％.本方法简单、快速、分离效果好,无需对单甘酯样品进行衍生化,为乳化剂中单甘酯的含量分析提供了一种新的色谱技术手段.     

流动注射纳米微反应器化学发光法测定盐酸二氧丙嗪

在酸性条件下,盐酸二氧丙嗪分子中氮原子被质子化后与阴离子AuCl-4形成离子缔合物,缔合物又被二氯甲烷带入鲁米诺的氯化十六烷基三甲基铵反胶束纳米微反应器中,离解出的AuCl-4立即与鲁米诺产生化学发光.在一定浓度范围内,发光强度与盐酸二氧丙嗪的含量呈线性关系,可间接测定盐酸二氧丙嗪的含量.在HCI、AuCl-4、鲁米诺、碳酸钠分别为0.05 mol/L、20 mg/L、0.4×10-4mol/L和0/3 mol/L(pH=11.5),R([H2O]/[CTAC])值为11,泵速均为3.6 mL/min(单管),聚四氟乙烯管的内径为0.8 mm,进样体积为120 μL,e至流通池间的距离为8 cm,反应盘管的长度为120 mm,直径为2 mm,负高压为-650 V,二氯甲烷为萃取剂的条件下.线性范围为0.001-20 mg/L,检出限(3σ)为0.06μg/L,对质量浓度为1.0 mg/L的盐酸二氧丙嗪进行11次平行测定,RSD为1.4％.方法可用于片剂和生物体液中盐酸二氧丙嗪的测定.     

超高效合相色谱-四极杆飞行时间质谱法测定水果和茶叶中手性农药顺式-氟环唑对映体残留

利用超高效合相色谱-四极杆飞行时间质谱( UPC2-QTOF/MS),建立了顺式-氟环唑在苹果、葡萄和茶叶中的手性对映体拆分与残留分析方法。对合相色谱条件(流动相改性剂及比例、色谱柱温度、背压、辅助溶剂等)进行了优化。样品采用乙腈提取, Cleanert TPT或Pesti-Carb柱净化, Chromega Chrial CCA柱进行分离,以CO2/异丙醇(95：5, V/V)为流动相,流速2.0 mL/min,动态背压13.79 MPa,柱温30℃,离子化辅助溶剂为2 mmol/L甲酸铵的甲醇-水(1：1, V/V),采用超高效合相色谱-四极杆飞行时间质谱分析测定,基质外标法定量。结果表明,本方法的线性范围为0.01 mg/L ~1.00 mg/L,相关系数大于0.99;在0.005,0.025和0.25 mg/kg添加浓度水平下,苹果和葡萄中顺式-氟环唑手性对映体平均回收率(n=6)为67.9%~92.8%,相对标准偏差小于10%,方法定量限为0.005 mg/kg;在0.01,0.05和0.5 mg/kg添加浓度水平下,茶叶中顺式-氟环唑手性对映体平均回收率( n=6)为74.1%~84.0%,相对标准偏差小于8%,方法定量限为0.01 mg/kg。本方法准确、简便、可靠,可以满足残留分析的要求。     

超高效合相色谱-蒸发光散射检测法测定蜂蜜中4种单、双糖的含量

采用超高效合相色谱-蒸发光散射检测( UPC2-ELSD)技术,建立了测定蜂蜜中4种单、双糖含量的方法。其中单糖为果糖和葡萄糖,双糖为蔗糖和麦芽糖。以ACQUITY UPC2BEH(100 mm×3.0 mm,1.7μm)为色谱柱,超临界CO2和甲醇(含0.2%氨水, V/V)作为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为50℃,ELS为检测器,漂移管温度为50℃,N2压力为260.7 kPa(30 psi)。研究表明,4种单、双糖化合物在线性范围内线性关系良好,线性相关系数(R)均大于0.9983;目标物的检出限(S/N≥3)为2.0~4.7 mg/L;3个加标水平下的回收率为86.6%~103.8%,相对标准偏差为1.8%~4.3%。此方法简单、快速、分离效果好、分析成本低,是一种测定蜂蜜样品中单、双糖的优良方法,且检测结果与国家标准方法保持一致。     

丹参中3种丹参酮的超临界二氧化碳萃取及液相分析

 用超临界CO2 流体及共溶剂乙醇萃取丹参中的 3种丹参酮 ,分别采用正交设计法和系统法考察了萃取中的主要影响因素 ;采用高效液相法 (HPLC) ,在甲醇 水 (体积比为 80∶2 0 )溶液为流动相和检测波长为 2 80nm的条件下 ,以外标法检测了萃取产物中 3种丹参酮的含量。实验得到的最佳条件为 :萃取压力 2 0MPa ;萃取温度 4 5℃ ;分离温度 35℃ ;共溶剂 95 % (体积分数 )乙醇 ;流量 1 0mL/min。建立的HPLC测定方法简便快捷 ,准确度高 ,重现性良好 ,相关系数r为 0 9994～ 0 9998,相对标准偏差RSD为 2 37%～ 3 4 7%。     

双丙酮-D-甘露糖醇—硼酸络合酸手性毛细管电泳法分离盐酸莱克多巴胺立体异构体

采用手性多羟基化合物—硼酸络合酸为手性选择剂,建立了分离盐酸莱克多巴胺4个立体异构体的手性毛细管电泳(NACE)方法。实验考察了手性选择剂的种类、浓度和三乙胺浓度对手性分离效果的影响。结果表明,双丙酮-D-甘露糖醇—硼酸络合酸手性选择剂的分离效果最好,优化的缓冲溶液组成为含100 mmol/L双丙酮-D-甘露糖醇、100 mmol/L硼酸和72 mmol/L三乙胺的甲醇溶液。在优化的实验条件下,盐酸莱克多巴胺的4个立体异构体均可以达到基线分离,质量浓度在6.2~200.0μg/mL范围内与峰面积分别呈现良好的线性关系,检测限和定量限分别为0.6μg/mL和2.0μg/mL,加标回收率为97.5%~102.5%,饲料中的提取回收率为66.4%~72.5%。方法可用于盐酸莱克多巴胺4个立体异构体的手性分离和含量测定。     

非水介质毛细管电泳电化学检测日夜百服宁中的有效成分

用非水毛细管电泳电化学检测法分离检测了日夜百服宁中的有效成分，研究了电极电位，不同浓度的甲酰胺（FA），电解液浓度和酸度，电泳电压及进样时间对电泳分离的影响，得到了较为优化的测定条件。实验结果表明，在25mmol/L Tris-25mmol/L H3BO3(表观pH=8.5)运行介质中，日夜百服宁中的4种有效成分即扑热息痛（AP），盐酸伪麻黄碱（PH），氢溴酸右美沙芬（DM）和扑尔敏（CM）在12min内完全分离，检测电位为＋0．9V(vs.SCE)。线性范围分别为AP 0．5－200mg/L;PH 0.8-300mg/L;DM2.5-350mg/L;CM0.5-330mg/L；检测限分别为AP0.1mg/L;PH0.55mg/L;DM1mg/L;CM0.2mg/L。     

反相高效液相色谱法测定盐酸索他洛尔

 建立了用于盐酸索他洛尔的含量测定、有关物质的检查和稳定性考察的 RP-HPL C法。采用 ODS柱、体积分数为 0 .1 %的乙酸水溶液 -乙腈 (体积比为 80∶ 2 0 )为流动相的色谱条件 ,以磺胺二甲基嘧啶为内标物 ,测定的线性范围为 5～ 45 mg/ L(r=0 .9991 ) ,日内精密度为 0 .2 0 % ,日间精密度为 0 .93 %。     

微流控芯片毛细管电泳激光诱导荧光检测法测定片剂中盐酸美西律的含量

建立了微流控芯片毛细管电泳激光诱导荧光检测法测定片剂中盐酸美西律含量的方法,对衍生条件和电泳条件进行了系统的考察。盐酸美西律经异硫氰酸荧光素(FITC)40℃衍生6h,以20 mmol/L硼砂为电泳缓冲溶液,进样30s后,分离电压2000V,可在1 min内完成一次检测。方法的检出限为0.022 mg/L、线性范围0.108～1.079 mg/L、相关系数0.994,加标回收率为99.7%～102.3%,方法适用于盐酸美西律的检测和质量控制。     

微流控芯片测定盐酸金刚烷胺片中的盐酸金刚烷胺

建立了微流控芯片非接触电导检测片剂中盐酸金刚烷胺的分析方法.对缓冲液和添加剂的种类及浓度、分离电压、进样时间等进行了优化.实验采用1 mmol/L HAc+2 mmol/L NaAc(pH 4.5)+0.1 mmol/LSDS的缓冲体系,于2.00kV的分离电压下进样10 s,在1 min内实现了盐酸金刚烷胺的快速检测...     

电流型电化学遥测系统的研制与应用

研制了一种微型嵌入式遥测系统,并利用此系统实现了电化学传感检测。遥测系统的输出电压范围为-0.5~0.5 V,分辨率<1 mV；电流检测范围为-1~1μA,最小分辨率为0.2 nA。此遥测系统是基于ADuCM360微处理器设计的,包括恒电位仪、电流检测模块和无线模块,尺寸大小为24 mm ×13 mm ×11 mm。利用LabVIEW开发上位机软件,用于数据存储和实时显示。为了验证该系统的精度和可靠性,对系统进行了电学性能测试。应用遥测系统检测不同浓度抗坏血酸溶液的电流响应,电极施加的工作电位为30 mV,在浓度范围50~300μmol/L 内,抗坏血酸电极的电流响应与其浓度呈现良好的线性关系,线性方程为I(nA)=2.98CAA(μmol/L)-137.39,线性相关系数R2=0.984。并以脑缺血模型为例,探索了仪器在活体动物研究中的适用性。结果表明,该系统可用于相关动物模型的研究。     

液相色谱/蒸发光散射测定转基因烟草提取液中的海藻糖

 采用乙二胺动态修饰硅胶柱分离、蒸发光散射检测器测定了转基因烟草提取液中的糖。 4种糖的峰面积标准曲线在 10 0mg/L～ 15 0 0mg/L范围内均具有良好的线性关系。所建立的方法对果糖、葡萄糖、蔗糖、海藻糖的检测下限分别为 10mg/L ,2 0mg/L ,10mg/L和 10mg/L。