2,4,6-三氯酚纯品原料纯度定值方法研究

对用于溶液标准物质制备的纯品原料2,4,6-三氯酚纯度定值方法进行了探讨。采用气相色谱质谱法(GC–MS)对主成分和杂质进行定性鉴定。用高效液相色谱法(HPLC–DAD)、气相色谱法(GC–FID)和差示扫描量热法(DSC)3种不同原理的方法对主成分定值。卡尔费休法测量水分,电感耦合等离子体质谱(ICP–MS)测量无机杂质。2,4,6-三氯酚纯度定值结果为99.3%,扩展不确定度为0.6%(k=2)。     

辛基二茂铁同分异构体纯度标准物质的定值技术研究

(2-辛基)-二茂铁、(3-辛基)-二茂铁和(4-辛基)-二茂铁是辛基二茂铁主要的3种同分异构体,由分离工业品辛基二茂铁制备而来。目前国内外金属有机化合物的标准物质有限,对这3种异构体进行高精度定值比较困难。该文首先考察标准物质候选物的均匀性和稳定性;再确定其中各杂质种类,用杂质扣除法对各候选物进行定值,重点研究了气相色谱法对各候选物中有机杂质及有机溶剂的定值技术,评定了标准物质的不确定度,为相关物质在高新技术领域的应用奠定了基础。     

无自身标准样品GC-FID法测定标准物质中有机杂质含量

建立了一种标准物质中有机杂质的无自身标准样品准确定值的GC–FID方法。以与待测有机杂质结构相似的物质作为参考物质校准GC–FID响应信号,采用有效碳数法计算待测杂质的质量响应值Si,检测出样品中该有机杂质的准确含量。以癸二酸二正丁酯纯度标准物质为例,用该法对其中有机杂质总量进行定值,定值结果为0.29%,U=0.07%(k=2)。定值不确定度主要来源于Si和检测重复性。     

辛基二茂铁同分异构体标准物质的制备

以辛基二茂铁为原材料,利用常压色谱柱结合环糊精包结分离制得(2-辛基)-二茂铁、(3-辛基)-二茂铁、(4-辛基)-二茂铁3种相对纯度均大于99.5%的辛基二茂铁同分异构体,作为标准物质候选物。利用气相色谱法检测,考察标准物质候选物的均匀性和稳定性,用气相色谱–质谱法、核磁共振法分析候选物中杂质的结构,确定其类型。用内标法和主成分自身对照法对不同的杂质进行定值,并对定值不确定度进行评定。(2-辛基)-二茂铁、(3-辛基)-二茂铁、(4-辛基)-二茂铁的纯度分别为99.5%,99.5%,99.8%,扩展不确定度均为0.2%(k=2)。该标准物质可为相关物质的检测提供量值溯源标准。     

正辛基二茂铁标准物质的制备及定值

烷基取代的二茂铁因其优良的催化性能和制药性能,在国防领域中常被用作固体火箭推进剂的燃速催化剂,而目前正辛基二茂铁没有标准物质,使得相关产品的性能难以得到保证。因此,本研究以工业品正辛基二茂铁为原材料,利用混合溶剂低温重结晶的方法制备了相对纯度大于99.5%的正辛基二茂铁,利用气相色谱法对标准物质候选物进行均匀性和稳定性研究。采用质量平衡法对正辛基二茂铁标准物质定值,主成分自身对照法对其中正辛基二茂铁的同系物杂质进行定值,得到的标准物质纯度为99.6%,对定值结果进行不确定度评估,得到扩展不确定度为0.2%(k=2)。     

磷酸三(2-氯乙基)酯标准物质的研制

研制了有机磷阻燃剂磷酸三(2-氯乙基)酯(TCEP)标准物质。采用硅胶柱层析法对TCEP原料进行纯化,得到纯度大于99%的TCEP纯品。通过红外光谱和气相色谱–质谱准确定性分析后,利用气相色谱法和气相色谱–质谱法结合热重分析法分别对TCEP纯物质进行纯度定值。将制备的50 g TCEP纯品分装到100个小瓶中,每瓶0.5g,从中随机选取10瓶,进行均匀性和稳定性实验,结果表明,研制的TCEP标准物质均匀性良好,在半年内是稳定的。研制的有机磷阻燃剂磷酸三(2-氯乙基)酯标准物质的纯度定值为99.56%,扩展不确定度为1.18%(k=2)。研制的磷酸三(2-氯乙基)酯标准物质满足国家二级标准物质标准的要求。     

葫芦巴碱标准物质的研制

研制葫芦巴碱标准物质。分别采用质量平衡法和定量核磁法两种不同原理方法对葫芦巴碱标准物质的纯度进行定值。利用高效液相色谱法对葫芦巴碱标准物质的均匀性和稳定性进行考察。对葫芦巴碱标准物质纯度定值结果的不确定度进行评定。结果表明,葫芦巴碱标准物质的纯度定值结果为99.31%,扩展不确定度为0.4%(k=2)。研制的葫芦巴碱标准物质量值准确,均匀性和稳定性符合二级标准物质技术要求。     

肌酐纯度标准物质的定值方法及其不确定度评定研究

通过定性及定量分析,研究了肌酐纯度标准物质的定值方法,并进行了定值分析的不确定度评定。首先使用三重四极杆质谱仪及核磁共振谱仪(氢谱)对肌酐样品进行定性分析,然后采用质量平衡法(包括液相色谱法、水分、灰分、挥发性物质和无机元素分析)与定量核磁共振法共同对肌酐纯度标准物质进行准确定值,最后对定值结果进行不确定度评定。肌酐的定值结果为99.7%,扩展不确定度为0.4%。该研究对于实际检测中肌酐的准确测定及临床上相关疾病的正确诊断治疗具有重要意义,且经过定值的肌酐纯品还可做定量核磁共振法的定量内标使用。定量分析后的肌酐经过均匀性检验和稳定性考察后可申报为国家标准物质。     

亚硝酸盐氮溶液标准物质的研制

建立了水中亚硝酸盐氮标准物质的研制方法.采用亚硝酸钠作为原料,采用重量–容量法配制水中亚硝酸盐氮溶液标准物质,将配制值作为标准值.亚硝酸钠纯度采用氧化还原滴定法测定,扣除还原性杂质对滴定结果的影响,并进行了不确定度评定,最终得到亚硝酸钠的纯度(质量分数)为99.48％,纯度的相对标准不确定度为0.2％.制备的亚硝酸盐氮...     

NTO纯度标准物质定值研究

为了对纯度标准物质3-硝基-1,2,4-三唑-5-酮(NTO)定值,获得其纯度值和不确定度,采用"杂质扣除法"对标准物质进行定值,用化学分析法对定值结果进行验证.通过对定值过程的A、B类不确定度评定,获得定值结果的不确定度.NTO纯度标准物质的纯度值为99.57%,扩展不确定度U=0.02%(k=2).     

氨基己酸为配基的新型弱阳离子交换/疏水双功能色谱固定相对蛋白质的分离纯化

以硅胶为基质、氨基己酸为配基制备了一种新型弱阳离子交换/疏水（WCX/HIC）双功能混合模式色谱固定相。该固定相配基具有一定的疏水性且含有羧基,在高盐浓度下表现为HIC的性质,可作为HIC固定相使用;在低盐浓度条件下表现为离子交换的性质,可作为WCX固定相使用。分别考察了该介质在WCX和HIC两种模式下对标准蛋白质的分离性能,并与商品柱进行比较。结果表明,所合成的WCX/HIC双功能固定相在WCX和HIC两种模式下对蛋白质均有较高的分离度和选择性,且分离能力与商品柱相当,两种模式下标准蛋白质的质量和活性回收率均大于93%,表明该柱具有“一柱二用”的功能,适于生物大分子的分离纯化。基于此双功能色谱柱构建的在线单柱二维液相色谱（2DLC-1C）可在60 min内实现8种蛋白质的快速分离。在70 min内完成了对蛋清中溶菌酶的二维纯化,纯度可达到98.3%。该技术中一根色谱柱可当作两根色谱柱使用,对蛋白质组学研究和重组蛋白药物的生产具有重要的应用价值。     

气相色谱近年的发展

简要阐述了近几年气相色谱(GC)的发展和特点。GC是一个成熟的技术,广泛地应用于各个领域,近几年GC的发展除了继续研究新的固定相和高性能的毛细管色谱柱之外,主要在全二维气相色谱(GC×GC)、快速GC、便携式GC仪和微型GC仪几个方面。近几年新研究的GC固定相主要集中在常温离子液体和各种环糊精的衍生物。现在GC研究者趋向于使用商品化的GC毛细管柱,而商品化的GC毛细管柱应用最多的是以含5%苯基的聚甲基硅氧烷为固定相的色谱柱。GC×GC发展迅猛,特别是关于调制器的研究,已开发出十多种调制模式,并广泛地应用于各个领域。为了适应大量样品的分析和现场分析,研究和开发了多种快速GC方法和仪器以及便携式GC仪。为了仪器的小型化和专属性检测,μGC仪的研究也稳步地发展起来。     

色谱分析中离子液体的应用及其测定

离子液体作为一种优良的溶剂越来越受到人们的关注。由于离子液体特殊的物理化学性质使其在色谱分析中也得到了较广泛的应用。本文综述了离子液体在气相色谱、高效液相色谱和毛细管电泳中的应用,其中包括离子液体作为气相色谱的固定相、高效液相色谱的固定相及流动相添加剂和毛细管电泳的电解质添加剂等,并对离子液体的色谱分离检测作了详细介绍。     

Enantiomer separation by counter-current chromatography. Optimisation and drawbacks in the use of L-proline derivatives as chiral selectors

Several L-proline and (4R)-hydroxy-L-proline derivatives were evaluated as chiral selectors (CSs) in the separation of enantiomers by counter-current chromatography (CCC). A variety of biphasic solvent systems, all of organic/aqueous nature, were tested in order to determine the appropriate distribution for CSs and racemates (N-(3,5-dinitrobenzoyl)-(+/-)-leucine and (+/-)-ketoprofen). Successful separations of DNB-(+/-)-leucine in analogous experimental conditions allow the comparative study of the enantioselectivity displayed by the considered CSs. The low solubility of certain CSs limits their applicability for preparative purposes even for improved enantioselectivity. The effect that the nature and pH of the buffer solutions used as a component of the solvent system have on the separation was also studied.     

Liquid chromatography at the critical condition: Thermodynamic significance and influence of pore size

Liquid chromatography at the critical condition (LCCC) is a high performance liquid chromatography (HPLC) technique that lies between size exclusion chromatography and adsorption-based interaction chromatography, where the elution of polymers becomes independent of polymer molecular weight. At LCCC, the balance between the entropic exclusion and the enthalpic adsorption interactions between polymers and stationary phases results in the simultaneous HPLC elution of polymers regardless of molecular weight. Using C18-bonded silica chromatographic columns with 5 μm particle size and different average pore size (diameter = 300 Å, 120 Å, 100 Å, and 50 Å), we report (1) the thermodynamic significance of LCCC conditions and (2) the influence of column pore size on the determination of critical conditions for linear polymer chains. Specifically, we used mixtures of monodisperse polystyrene samples ranging in molecular weight from 162 to 371,100 g/mol and controlled the temperature of the HPLC columns at a fixed composition of a mobile phase consisting of 57(v/v)% methylene chloride and 43(v/v)% acetonitrile. It was found that, at the fixed mobile phase composition, the temperature of LCCC (T_LCCC) is higher for C18-bonded chromatographic columns with larger average pore size. © 2009 Wiley Periodicals, Inc. J Polym Sci Part B: Polym Phys 47: 2533–2540, 2009     

三酰甘油氧化聚合物的制备型快速柱层析-体积排阻色谱测定法

建立了一种简便、灵敏、无需内标的检测油脂中三酰甘油氧化聚合物(TGP)的分析方法。以制备型快速层析柱(PFC)(flash硅胶柱,20 g,40～60μm,6 nm)分离1 g油脂样品中极性组分(PC),经高效体积排阻色谱(HPSEC)(GPC柱,Ф7.8 mm×300 mm,粒径5μm,孔径10 nm)将PC细分为氧化三酰甘油寡聚物(TGO)、氧化三酰甘油二聚物(TGD)、氧化三酰甘油单体(ox-TGM)、二酰甘油(DG)、游离脂肪酸(FFA)。结合重量法测定油脂中PC、面积归一法测定PC中TGP,可准确定量油脂中的TGP含量。结果表明,TGO、TGD分别在28～1 800、11～2 800 mg/L范围内线性关系良好,相关系数(r2)分别为0.998 2、0.998 7,TGO及TGD的检出限(LOD)分别为28、11 mg/L,定量下限(LOQ)分别为113、44 mg/L;相当于油脂中TGP的LOD为0.01%。PFC-HPSEC法检测油脂TGP的相对标准偏差(RSD)均小于10%。PFC对3个PC加标水平(2.27%、8.47%、30.94%)的平均回收率为95%～98%,相对标准偏差(RSD)均低于4%。PFC-HPSEC方法与经典的硅胶柱-HPSEC方法定量油脂TGP的结果吻合度高,相对误差为0～8.9%。该方法能够在2 h内实现各种油脂中TGP含量的定量检测,包括使用过的废弃油脂与未使用的食用油脂,尤其适用于低含量TGP的初榨油和精炼油脂。     

Pressurized planar electrochromatography

Theoretical backgrounds, development, examples of separations, constructional details and principle of action of devices of pressurized planar electrochromatography (PPEC) are presented. Development of the mode is described in respect of operating variables (composition of the mobile phase, pressure exerted on adsorbent layer, mobile phase flow velocity, temperature of separating system, etc.) influencing separation efficiency (kinetic performance, repeatability, separation time). Advantages of PPEC such as high kinetic performance, short separation time and different separation selectivities, especially relative to conventional thin-layer chromatography, are described. Examples of two-dimensional separations are demonstrated to show high separation potential of the mode when combined with conventional thin-layer chromatography (TLC). The PPEC mode is in infancy stage of development, so its challenges are presented as well.     

固相萃取-超高效液相色谱法测定人参中5种原人参二醇型人参皂苷的含量

建立了固相萃取-超高效液相色谱测定人参中5种原人参二醇型人参皂苷的方法。人参药材经粉碎后通过水饱和正丁醇溶液进行超声提取,经过亲水作用固相萃取柱净化后,在ACQUITY UPLC BEH Shield RP18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）上分离,利用乙腈/水作为流动相进行梯度洗脱,采用光电二极管阵列检测器检测。结果表明,5种原人参二醇型人参皂苷在5~500 μg/mL范围内具有很好的线性关系,相关系数均大于0.999。方法精密度的RSD值在0.95%~2.62%（n=6）之间,22 h内样品稳定性的RSD值在0.90%~2.15%（n=8）之间,日内和日间重复性的RSD值分别为5.35%~6.47%（n=6）和5.56%~6.34%（n=8）。方法的加标回收率在87.16%~101.92%之间,相对标准偏差在1.54%~4.01%（n=6）之间。所建立的方法采用亲水作用色谱模式的固相萃取材料,药材的提取液可直接作为固相萃取的上样溶液进行人参皂苷的富集和净化,并且超高效液相色谱大大缩短了分析时间。该方法简单快速、通量高、重现性好,适用于人参中5种原人参二醇型人参皂苷的定量分析。     

Efficient separation of oxidized cello-oligosaccharides generated by cellulose degrading lytic polysaccharide monooxygenases

We present an evaluation of HPLC-based analytical tools for the simultaneous analysis of native and oxidized cello-oligosaccharides, which are products of enzymatic cellulose degradation. Whereas cello-oligosaccharides arise from cellulose depolymerization by glycoside hydrolases, oxidized cello-oligosaccharides are produced by cellobiose dehydrogenase and the recently identified copper dependent lytic polysaccharide monooxygenases (LPMOs) currently classified as CBM33 and GH61. The latter enzymes are wide-spread and expected to play crucial roles in further development of efficient enzyme technology for biomass conversion. Three HPLC approaches with well documented performance in the field of oligosaccharide analysis have been investigated: high-performance anion-exchange chromatography (HPAEC), hydrophilic interaction chromatography (HILIC) and porous graphitized carbon liquid chromatography (PGC-LC). HPAEC with pulsed amperometric detection (PAD) was superior for analysis of oxidized oligosaccharides, combining the best separation with superior sensitivity for oligosaccharide species with a degree of polymerization (DP) ranging from 1 to 10. Furthermore, the HPAEC method can be optimized for operation in a high-throughput manner (run time 10 min). Both PGC-LC and HILIC allow reasonable run times (41 and 25 min, respectively), with acceptable separation, but suffer from poor sensitivity compared to HPAEC-PAD. On the other hand, PGC-LC and HILIC benefit from being fully compatible with online mass spectrometry. Using an LC–MS setup, these methods will deliver much better sensitivity than what can be obtained with conventional detectors such as ultraviolet-, charged aerosol-, or evaporative light scattering and may reach sensitivities similar to or even better than what is obtained in HPAEC-PAD. Pure oxidized cello-oligosaccharide standards, ranging from DP2 to DP5, were obtained by semi-preparative PGC and characterized by MS and NMR analysis.     

超高效液相色谱法检测土壤中的多环芳烃

采用二极管阵列(PDA)检测器,建立了超高效液相色谱(UPLC)定性定量分析土壤中16种多环芳烃(PAHs)的方法。并将该方法与传统高效液相色谱(HPLC)的分析性能进行了详细的比较。研究结果表明,采用UPLC法分析16种PAHs具有分析速度快(13.5 min)、检出限低(2～20 pg)、灵敏度高等优点。