乌骨鸡黑色素的体外抗氧化活性及其对人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用

通过测定乌骨鸡黑色素对DPPH自由基、超氧自由基和羟基自由基清除率,研究乌骨鸡黑色素的体外抗氧化能力,同时建立H_2O_2诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞氧化损伤模型,MTT法测定HUVEC细胞存活率,试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力,研究乌骨鸡黑色素对HUVEC细胞氧化损伤的保护作用。结果表明:乌骨鸡黑色素清除DPPH自由基、超氧自由基和羟基自由基的IC50值分别为0.18,0.40,2.37 mg·mL~(-1)。乌骨鸡黑色素可降低H_2O_2诱导损伤的HUVEC细胞LDH漏出量和MDA含量,提高SOD活性,并呈一定浓度依赖性。因此,乌骨鸡黑色素具有一定的体外抗氧化活性,可保护H_2O_2诱导的HUVEC细胞氧化损伤。     

乳酸菌发酵铁皮石斛活性成分与抗氧化功能动态分析

采用植物乳杆菌(植)、嗜酸乳杆菌(嗜)、副干酪乳杆菌(副)进行两两混菌发酵制备清洁标签铁皮石斛发酵汁,比例均为1:1。分析72 h发酵过程中铁皮石斛汁的活菌数、pH、总糖、总酚、抗氧化能力的动态变化以及活性成分与抗氧化能力的相关性。结果表明,3种混菌均能在发酵铁皮石斛汁中良好生长,其中活菌数最高的一组是嗜+副,活菌数为8.72 lg(CFU/mL)。对多糖消耗最少的是嗜+副,比初始值降低了24.89%,其次是植+副40.72%和植+嗜42.31%。总酚在发酵前期随着发酵时间的增加而不断增加,在发酵后期出现下降趋势,其中嗜+副对多酚的增幅最大,提高了23.58%。经过乳酸菌发酵后,铁皮石斛汁对DPPH自由基的清除能力影响最大,嗜+副的增幅达到92.32%;同时对羟基自由基和ABTS自由基的清除能力也有较高的提升,其中植+副对ABTS自由基的清除能力提高最多(达41.42%),嗜+副对羟基自由基的清除能力提高最多(达32.73%)。相关性分析中发酵液的总酚含量与自由基清除率显著正相关,在抗氧化能力中发挥主要作用。研究表明,乳酸菌发酵能进一步提升铁皮石斛品质,提高相关活性成分和抗氧化功能。     

玉竹多糖分离纯化、理化性质及抗氧化功能

采用热水浸提法从玉竹提取获得多糖POA,进一步利用乙醇分级沉淀方法进行分离纯化,获得均一性较好的POA-70P和POA-70S组分,进一步分析了多糖单糖组成、相对分子质量、红外光谱等基本理化性质,并通过DPPH自由基清除能力和羟基自由基清除能力评价其体外抗氧化功能。结果表明,玉竹多糖POA-70P和POA-70S主要由中性糖组成,相对分子质量分别为4.51×10~4 Da和3.89×10~3 Da,单糖组成分析显示,POA-70S中存在大量的果糖,及少量岩藻糖、葡萄糖、甘露糖,POA-70P中主要存在甘露糖,葡萄糖和半乳糖,以及少量的阿拉伯糖和半乳糖醛酸;此外玉竹多糖POA、POA-70P和POA-70S对羟基自由基有较好的清除作用,浓度为4 mg·mL~(-1)清除能力能达到48%,并呈现剂量依赖性;但对于DPPH自由基清除能力较差,浓度从0.5 mg·mL~(-1)增大到4 mg·mL~(-1)的过程中,清除能力始终处于20%左右。     

量子化学计算对4种抗氧化肽清除自由基活性机理判别分析

多肽作为一种极具潜力的功能性食品基料,已经成为食品研究领域的热门之一。本文以大豆蛋白水解产物中的4种抗氧化肽为研究对象,采用半经验AM1和密度泛函理论(DFT)等量子化学计算方法对其清除自由基活性进行理论计算研究,通过计算原子电荷、分子总能量和供氢后的分子结构能量、能量最高占有轨道能(EHOMO)和最低空轨道能(ELUMO)等理论指标,分析了影响多肽清除自由基活性的因素,推断其作用机理。结果表明,通过计算所得理论数据预测的多肽清除自由基活性与实验测定的结果基本一致。更多还原     

量子化学计算研究4种黄酮类天然抗氧化物清除自由基活性的构效关系

黄酮类化合物是一种具有广泛生物活性的多酚物质,其显著的抗氧化活性常被应用于食品保健和医疗等方面。为从化学反应活性层面研究黄酮类化合物的构效关系。以柚皮素、柚皮苷、橙皮素及橙皮苷4种黄酮类分子作为研究对象,使用量子化学密度泛函DFT方法 B3LYP和6-31g(d,p)基组计算得出4种分子的原子电荷分布情况、分子前线轨道分布(HOMO&LUMO)、能级差△E,以及各羟基位O-H键解离焓△BDE等理论参数,同时实测4种化合物对DPPH自由基的清除活性。结果表明,前线分子轨道能级差能有效的表征4种黄酮类清除自由能力的活性顺序,各羟基位O-H键解离焓BDE则能有效表征同一分子中各羟基位O-H的活性顺序,柚皮苷及其糖苷(柚皮素)与橙皮苷及其糖苷(橙皮素)抗氧化活性最大的位点分别为4’-OH、5’-OH基团。通过计算所得理论数据预测的黄酮类化合物清除自由基活性与实验测定结果一致,提示今后可利用理论计算方法对高活性的黄酮类化合物进行高通量筛选和分子结构设计。 更多还原     

水液相环境下羟自由基诱导的苯丙氨酸分子损伤机理

在MP2/ SMD/6-311++g(3df, 2pd)//WB97X-D/SMD/6-311++G(d, p)理论水平上,研究了水液相环境下羟自由基诱导的苯丙氨酸分子的损伤机理。研究发现,羟自由基（水分子簇）抽取α-氢、β-氢、苯环-氢以及羟自由基与苯环加成均可致苯丙氨酸分子损伤。势能面计算表明,羟自由基（水分子簇）抽取α-氢和β-氢的最低能垒分别为68.4和89.3 kJ·mol^-1,羟自由基抽取苯环-氢的最低能垒为111.6 kJ·mol^-1,羟自由基加成到苯环不同位点碳的能垒大约在106.5~110.2 kJ·mol^-1,羟自由基（水分子簇）抽α-氢和β-氢是显著的放热反应。结果表明,羟自由基（水分子簇）抽取α-氢是苯丙氨酸分子损伤的主要途径。     

水液相环境下羟自由基诱导的苯丙氨酸分子损伤机理

在MP2/ SMD/6-311++g(3df, 2pd)//WB97X-D/SMD/6-311++G(d, p)理论水平上,研究了水液相环境下羟自由基诱导的苯丙氨酸分子的损伤机理。研究发现,羟自由基（水分子簇）抽取α-氢、β-氢、苯环-氢以及羟自由基与苯环加成均可致苯丙氨酸分子损伤。势能面计算表明,羟自由基（水分子簇）抽取α-氢和β-氢的最低能垒分别为68.4和89.3 kJ·mol^-1,羟自由基抽取苯环-氢的最低能垒为111.6 kJ·mol^-1,羟自由基加成到苯环不同位点碳的能垒大约在106.5~110.2 kJ·mol^-1,羟自由基（水分子簇）抽α-氢和β-氢是显著的放热反应。结果表明,羟自由基（水分子簇）抽取α-氢是苯丙氨酸分子损伤的主要途径。     

新疆圆柏总黄酮的抗氧化活性及在食品保鲜中的应用

为探究新疆圆柏总黄酮(Flavonoids from Sabina vulgalis Ant.,SVFDs)的抗氧化活性,以及在食品保鲜中的应用;将20 mg/ml SVFDs梯度稀释为100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL浓度,抗坏血酸Vc为阳性对照,同时设置空白对照,阴性对照.FRAP法测定SVFDs总抗氧化活性,铁氰化钾法测定总还原力;检测不同浓度SVFDs对ABTS自由基、DPPH自由基、羟基自由基的清除作用;以小番茄果(Lycopersivon esculentum Mill.)和草莓(Fragaria×ananassa Duch.)为实验材料,检测SVFDs对超氧化物歧化酶SOD活性、丙二醛MDA含量的影响.结果显示,SVFDs具有显著的抗氧化活性,且随着浓度升高,抗氧化活性能力增强;虽然低浓度SVFDs还原能力不显著,但随着SVFDs浓度的升高,还原能力逐渐增强;同时SVFDs能够不同程度的清除ABTS自由基、DPPH自由基、羟基自由基活性;半抑制浓度IC50值分别是188.4μg/mL、2.251μg/mL、1 428.57μg/mL.保鲜实验结果显示,SVFDs可提高小番茄果、草莓中SOD的活性,显著降低MDA的含量.研究表明新疆圆柏总黄酮具有较强的抗氧化活性,选择性清除自由基能力,延长食品贮藏时间,作为果蔬保鲜剂,具有一定的开发潜力.     

ABTS法和DPPH法测定类胡萝卜素清除自由基能力的适用性

类胡萝卜素是一大类天然抗氧化剂,但目前对于其清除自由基活性的研究还不系统,所报道结果也不统一。本实验对常用的两种清除自由基活性的测定方法,DPPH和ABTS法,进行了类胡萝卜素适用性的研究。采用7种类胡萝卜素与槲皮素作为研究对象,分别考察了其清除DPPH和ABTS自由基的能力及其光谱学特征,并优化活性测定条件。结果表明,采用DPPH测定法时,部分有色类胡萝卜素由于其最大吸收峰在450～550 nm之间,与DPPH溶液最大吸收峰接近,会对实验结果产生干扰;而采用ABTS测定法时,最佳测定波长为734 nm,体系在180 min内保持稳定。7种类胡萝卜素在734 nm处吸光值随样品浓度的增加而降低,具有显著量效关系。经测定获得了7种类胡萝卜素与槲皮素清除ABTS自由基的半数抑制浓度(IC50)分别为β-胡萝卜素1 251,番茄红素1 280,虾青素141,槲皮素22.21,叶黄素386,玉米黄素476,藏红花素596,杜鹃红素42μg·mL~(-1)。清除ABTS自由基的能力由大到小排列为:槲皮素杜鹃红素虾青素叶黄素玉米黄素藏红花素β-胡萝卜素番茄红素。ABTS清除实验避免了有色抗氧化剂本身的光谱干扰,相比DPPH自由基清除测定而言,更可靠、方便,更适合作为类胡萝卜素清除自由基性测定方法之一。     

不同柑橘品种果汁中抗氧化成分比较

以11种柑橘品种为材料,研究不同柑橘品种果汁中的总酚、总黄酮、Vc含量及其抗氧化活性的差异性,探讨抗氧化主导作用成分.研究结果表明:血橙的总酚、Vc含量最高,分别为0.76 mg·m L-1和65.48 mg·100g-1,对DPPH自由基清除率与羟基自由基清除率效果最好,分别为45.87%和89.51%.相关分析和通径分析发现,柑橘果汁中总酚、总黄酮、Vc含量均与DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率呈正相关,其中Vc含量与DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率呈显著正相关.柑橘果汁的抗氧化作用主要通过Vc直接正效应表现,而总酚、总黄酮均通过Vc的间接效应表现.     

铅对背角无齿蚌抗超氧阴离子与抑制羟自由基的影响以及可溶性蛋白分析

采用浓度为0.2,0.3,0.5 mg.L-1的铅溶液对背角无齿蚌(Anodonta woodiana)进行处理,研究铅离子对蚌的抗超氧阴离子(O2-)、抑制羟自由基(OH-)以及可溶性蛋白的影响。结果发现,随着铅离子的浓度升高,蚌血清的抗超氧阴离子及抑制羟自由基活性均有明显升高。肝胰腺中抗超氧阴离子活     

5株细菌产L-多巴黑色素的比较研究

对5株细菌所产黑色素的物理和化学性质及发酵进行了比较研究。结果表明：尽管这些不同来源的黑色素在理化性质上存在一定差异，但它们的基本框架结构及主要基团是一致的，且在发酵过程中都检测到L-多巴，说明它们都属于多巴类黑色素；不同菌株在同一条件下和同一菌株在不同条件下发酵黑色素的产量差别很大。其中WS和H2的黑色素产量可分别达到1720mg／L和1040mg／L，有进一步开发成为工业发酵生产黑色素应用菌株的潜力。     

核壳Fenton催化剂CuFe_2O_4@PDA-Cu的制备、表征及其活化H_2O_2降解染料的性能

为得到新型高效多相催化剂,有效去除废水中的染料,以Cu(Ac)_2与CuFe_2O_4@PDA为原料制备了催化剂CuFe_2O_4@PDA-Cu.通过IR、XRD、XPS、UV-Vis、DRS技术对催化剂的性能进行了表征,考察了温度、H_2O_2用量、催化剂用量、pH值、盐等对催化活性的影响.利用HPLC测定降解产物,采用自由基捕获和抑制实验进行机理验证,发现催化剂是核壳结构.温度升高、pH值升高、H_2O_2和催化剂用量的增加均有利于提高催化活性;氯化物、硫酸盐、硝酸盐和磷酸盐不影响催化效果,溴化物和亚硝酸盐降低了催化效果.得到的最优降解条件为:T=30℃,催化剂用量10mg·L~(-1),pH=9,过氧化氢用量10mmol·L~(-1),染料浓度30mg·L~(-1).最优条件下催化剂可循环使用4次以上;甲基橙、茜素红和罗丹明B的去除率为100%;染料R0213、O0118和B0115的去除率大于60%.降解产物有草酸、马来酸和CO_2.甲基橙、茜素红和罗丹明B降解后COD_(Mn)=2~4mg·L~(-1).水杨酸捕获·OH生成2.5-二羟基苯甲酸,叔丁醇抑制染料降解.结果表明,催化剂可活化H_2O_2产生·OH,·OH攻击染料分子开环降解直至矿化.该研究为开发高效多相催化剂,有效去除废水中的染料提供了科学依据.     

水环境下羧基与氨基间为单氢键的α-Ala旋光异构及羟自由基和氢氧根的作用

采用密度泛函理论的B3LYP方法、微扰理论的MP2方法和自洽反应场（SCRF）理论的SMD模型方法,研究了水环境下羧基与氨基间为单氢键的α-Ala旋光异构及羟自由基和氢氧根作用的反应。研究发现：α-Ala的旋光异构可在a和b两个通道实现,a通道为羧基顺反异构后,水分子簇作媒介质子以氨基为桥从α碳的一侧向另一侧迁移;b通道为水分子簇作媒介,质子从α碳向氨基氮的迁移与羧基顺反异构协同进行。在a通道,羟自由基水分子簇可致α-Ala损伤。势能面计算表明：水环境下,在a通道3个水分子簇作氢迁移媒介,决速步能垒为113.37 kJ·mol^-1,氢氧根水分子簇的催化使该能垒降到64.45 kJ·mol^-1;在b通道2个水分子簇作氢迁移媒介,决速步能垒为135.00 kJ·mol^-1。羟自由基水分子簇致α-Ala损伤的能垒在水分子抽氢和羟自由基抽氢时分别为24.47和 80.60 kJ·mol^-1。     

微波萃取法提取紫心甘薯总黄酮及其抗氧化活性研究

研究了紫心甘薯总黄酮的微波提取工艺及其抗氧化活性．以芦丁为标准品,通过选用L9（3^4）正交表设计实验,确立提取总黄酮的最佳条件并以Vc为对照品,采用DPPH·（二苯代苦味酰自由基）法研究提取物的抗氧化活性．紫心甘薯总黄酮的最佳提取条件为：乙醇浓度70％,提取温度80℃,料液比1：20,提取时间35min;测得紫心甘薯薯肉和薯皮中总黄酮含量分别为1．55％和3．30％,二者抗氧化活性以半数抑制浓度（IC50）表示分别为0．0204,0．0192mg·mL^-1．微波提取紫心甘薯薯皮总黄酮的含量是薯肉的2．13倍,紫心甘薯薯皮的抗氧化性高于薯肉．     

生物体系中自由基检测方法评述

检测生物体系中自由基的方法是一种开展自由基生物学和自由基医学研究的重要实验手段.生物体 中自由基的检测方法有很多,但各种检测方法在不同的实验中都有各自的优缺点.近年来应用较多的实 验方法是电子自旋共振法( ESR 法) 、脂质过氧化法、自由基清除酶法等.     

泰和乌骨鸡及其黑素对小鼠红细胞过氧化氢酶及血浆过氧化脂质的影响

以泰和乌骨鸡及其黑素为药物直接喂养小鼠,测定实验鼠红细胞过氧化氢酶的活性及血浆过氧化脂质的含量,以探讨乌骨鸡是否具有抗衰老作用。实验结果表明：１）泰和乌骨鸡及其黑素有提高小鼠红细胞过氧化氢酶活性的趋势,但其提高的幅度尚未达到显著水平;２）泰和乌骨鸡及其黑     

产黑色素B.thuringiensis重组菌株的构建及其培养条件的优化

将嗜麦芽假单胞菌中产生黑色素的基因(mel gene)克隆到穿梭载体pHT3101中，并将它处于表达系统cry3A的控制下，构建得到重组质粒pHTAM．将此重组质粒用电脉冲的方法转入苏云金芽胞杆菌受体菌株BMB171中，得到重组菌株RSA．研究结果表明，处于cry3A控制下nel基因在BMBl71菌株中得到了成功的表达．本研究进一步采用红外光谱扫描法检测RSA所产黑色素的性质，并通过改变培养条件来提高黑色素的产量．