超高效液相色谱-串联质谱法同时测定尿液与血清中23种双酚类化合物

建立了基于吡啶-3-磺酰氯衍生和超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测尿液和血清中23种双酚类化合物(BPs)的方法。尿液样品采用乙酸乙酯提取;血清样品采用乙腈提取,上清液经PRiME HLB柱净化。提取液经吡啶-3-磺酰氯衍生后,以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相,采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱进行分离。质谱离子源为电喷雾电离源,正离子模式检测。23种目标物在0.005～100μg/L范围内线性关系良好,检出限为0.002～0.030μg/L,定量下限为0.005～0.100μg/L,回收率为76.6%～122%,相对标准偏差(RSD)为0.60%～14%。使用建立的方法分别对20份尿液和20份血清样品进行了检测。该方法样品用量少,灵敏度高,可以满足尿液和血清样品中23种BPs的同时测定要求。     

柱前衍生法测定烟叶中的7种生物胺

建立了丹磺酰氯柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)测定烟草基因编辑素材中的7种生物胺的方法。采用0.4 mol/L HClO_4进行样品超声提取,提取液经过pH调整后,利用丹磺酰氯(4 mg/mL)进行柱前衍生;衍生后的样品溶液利用优化的HPLC-DAD色谱方法进行检测;方法在1.0～50μg/mL范围内具有较好的线性(R~2 0.98),检出限在0.01～0.15μg/mL之间,定量限在0.05～0.25μg/mL之间,日间和日内精密度均小于5%,不同加标水平下,平均回收率在86.7%～124.0%之间。     

柱前衍生-液相色谱-串联质谱法测定葡萄和樱桃中单氰胺残留

建立了丹磺酰氯（DNS）柱前衍生-液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定葡萄和樱桃中单氰胺的方法。样品经破壁机匀浆,乙酸乙酯超声提取,无水硫酸钠除水,提取液经减压浓缩,在碱性条件下与丹磺酰氯进行衍生反应。色谱柱为岛津Shim-pack XR-ODS色谱柱（75 mm×2.0 mm,1.6 μm）,流动相为甲醇和含0.05%（体积分数）甲酸的2 mmol/L醋酸铵水溶液,梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子多反应监测模式进行质谱检测。单氰胺在0.01~1.0 mg/L范围内,峰面积与质量浓度之间线性关系良好,相关系数不小于0.9990。在0.01、0.05和1.0 mg/kg的添加水平下,葡萄和樱桃中单氰胺的平均回收率为75%~81%,精密度为6.5%~9.8%,定量限为0.01 mg/kg。该方法简便、快速、可靠,可用于批量检测葡萄和樱桃中单氰胺残留。     

高效液相色谱法测定牙膏中的氨甲环酸

建立了丹磺酰氯柱前衍生/高效液相色谱测定牙膏中氨甲环酸(TA)的方法。牙膏经甲醇提取、氮吹至干,再用丹磺酰氯进行衍生。衍生物通过X-Bridge C18色谱柱(250 mm×4.6 mm×5μm)分离,以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,在紫外波长250 nm条件下进行定量测定。系统考察了缓冲溶液p H值、衍生温度和衍生时间对氨甲环酸衍生效率的影响。结果表明,在优化实验条件下,氨甲环酸衍生物与基体杂质达到有效分离,在1~425 mg/L范围内线性关系良好,相关系数为0.999 5;在20,200,1 600 mg/kg 3个加标浓度下的回收率为98.7%~102%,相对标准偏差为0.85%~2.5%,方法检出限为2.0 mg/kg。该方法准确、可靠、灵敏度高,适用于各类牙膏中氨甲环酸的测定。     

测定2-萘磺酰氯的二丁胺柱前衍生化反相高效液相色谱法

报道了一种测定有机中间体2-萘磺酰氯的方法。2-萘磺酰氯试样先与过量二丁胺在室温下磺酰胺化反应 ,再用反相高效液相色谱法分析 ,以HypersilBDS-C18(4.0mm×200mm ,5μm)为色谱柱 ,以67 % ( φ)乙腈水溶液 ,加1 % ( φ)二丁胺并用磷酸调节 pH至6.5为流动相 ,以224nm为检测波长。在0.006～0.4g/L范围试样质量浓度与峰面积呈线性相关 ,相关系数为0.9993,检出限为0.5ng(S/N=3)。方法简单、快速、灵敏、准确。     

固相萃取/超高效液相色谱-串联质谱法测定尿液中6种双酚类及烷基酚类物质

建立了超高效液相色谱-串联质谱测定人体尿液中双酚A(BPA)、双酚F(BPF)、四氯双酚A(TCBPA)、四溴双酚A(TBBPA)、壬基酚(NP)、4-正辛基苯酚(4-n-OP)的检测方法。尿液样品通过酶解和固相萃取法进行前处理,采用Acquity UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)分离,负离子电喷雾多反应监测模式检测,同位素内标法定量。6种待测物在0.5~50μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.995,检出限为0.05~0.60μg/L,定量下限为0.17~2.00μg/L,2、10、50μg/L加标水平下的回收率为81.4%~112%,相对标准偏差(RSD,n=6)为6.8%~30%。应用此方法测定160份人体尿液样品,双酚A的检出率为93.8%,检出范围为0.24~29.54μg/L,其余目标物未检出。该方法操作简便、重现性好、定量准确,适用于人体尿液中双酚类及烷基酚类物质的测定。     

固相萃取液相色谱串联质谱法检测尿中双酚类和卤代双酚类物质

建立了高效液相色谱串联质谱法同时检测人尿液中4种双酚类和卤代双酚类物质的方法。尿液样品经酶解后,采用PLEXA(亲水亲脂聚合物小柱)固相萃取柱净化,在AtlantisT3柱(150 mm×3.0mm,3μm)上,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速250μL/min,串联质谱负离子电喷雾多反应监测模式检测,基质匹配内标法定量分析。结果表明,4种物质平均回收率为86%~118.0%,日内精密度为2.6%~17.0%,日间精密度3.2%~18%,检出限为0.01~0.25μg/L。应用本方法测定200份人尿液样品,双酚A检出率为75%,检出浓度在0.58~50.5μg/L之间。本方法操作简单、灵敏、快速、可靠。     

高效液相色谱-串联质谱法测定茶叶、三七中胺苯磺隆和甲基胺苯磺隆的残留量北大核心CSCD

建立了测定茶叶、三七中胺苯磺隆和甲基胺苯磺隆残留量的高效液相色谱-串联质谱法。样品经超纯水浸泡,乙腈提取,QuEChERS净化,Phenomenex Kinetex C 18色谱柱(50×2.1 mm,2.6μm)分离,液相色谱-串联质谱法检测,基质匹配外标法定量。胺苯磺隆和甲基胺苯磺隆在1.0 ng/mL~100 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数R均大于0.999,方法的检出限(S/N=3)为0.07μg/kg~0.20μg/kg,定量限(S/N=10)为0.21μg/kg~0.60μg/kg。在5μg/kg~100μg/kg范围的回收实验中,胺苯磺隆平均回收率为70.8%~108.1%,相对标准偏差(RSD,n=6)为3.3%~11.4%;甲基胺苯磺隆平均回收率为70.2%~105.5%,RSD(n=6)为2.9%~10.6%。本方法前处理简单、稳定、灵敏,适用于茶叶、三七中胺苯磺隆和甲基胺苯磺隆残留量的同时测定。     

柱前衍生/高效液相色谱-荧光检测器测定面粉制品中的偶氮甲酰胺

建立了面粉制品中偶氮甲酰胺(ADA)残留量的丹磺酰氯柱前衍生结合高效液相色谱-荧光检测器的分析方法。面粉制品中的ADA经湿热处理后,转变成氨基脲(SEM),加入丹磺酰氯(DNS-Cl)进行衍生。采用Aglient TC C18(250 mm×4.6 mm,5μm)对衍生产物进行分离,流动相为乙腈-水(65∶35),流速1.0m L/min,柱温30℃,激发波长330 nm,发射波长530 nm,高效液相色谱-荧光检测器检测,外标法定量。偶氮甲酰胺在0.1~50 mg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数(r)大于0.998,检出限(LOD)和定量下限(LOQ)分别为0.03 mg/L和0.10 mg/L。在0.1,0.3,1.0 mg/kg 3个加标水平下的平均回收率为78.4%~96.6%,相对标准偏差(RSD,n=6)为7.1%~9.4%。该方法具有简便、快速、灵敏等特点,可用于面粉制品中偶氮甲酰胺的检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法快速测定人体尿液中3种甜味剂

建立了超高效液相色谱-串联质谱法快速测定人体尿液中甜蜜素、糖精钠和安赛蜜3种甜味剂的方法。样品经过冷冻、解冻和高速离心后上清液用水直接稀释测定。目标化合物采用Waters ACQUITY UPLCHSS T3色谱柱(50×2.1mm,1.8μm)分离,以甲醇和含0.002mol/L乙酸铵的水溶液为流动相进行梯度洗脱,质谱采用电喷雾离子源电离、负离子多反应监测模式检测。甜蜜素、糖精钠和安赛蜜的平均回收率分别为101%、99.8%和108%,相对标准偏差分别为1.25%、2.00%和1.78%,检出限(S/N=3)分别为0.015μg/L、0.10μg/L和0.01μg/L。应用本方法测定200份尿液样品,甜味剂总检出率为97%。     

液相色谱-电喷雾串联质谱同时检测尿液和胃液中12种有毒生物碱

建立了高效液相色谱-电喷雾串联质谱同时检测尿液和胃液中12种有毒生物碱的方法.优化了提取条件及色谱-质谱条件,并考察了基质效应的影响,探讨了质谱碎裂机理.尿液和预先调节至中性的胃液经硼砂-NaOH缓冲液(pH 9.6)碱化,乙酸乙酯液液萃取,采用电喷雾电离(ESI+)、多反应监测(MRM)方式,可同时对黄华碱、倒千里光碱、山莨菪碱、钩吻碱、芦竹碱、哈尔碱、吐根碱、血根碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、雷公藤吉碱和雷公藤次碱12种有毒生物碱进行定性和定量分析.在优化的条件下,12种成分分别在0.5～200 μg/L、1～200 μg/L和5～200μg/L范围内线性关系良好,尿液中除黄华碱和山莨菪碱外,各生物碱的回收率为61.9％～119.1％,胃液中各生物碱回收率为61,0％～1102％,精密度RSD＜ 15％.检出限(LOD)为0.1～0 Sμμg/L,定量限(LOQ)为0.5～5.0 μg/L,时回收率不高的生物碱可通过空白基质配制标样校正,满足定量分析的要求.本方法操作简便、快捷、灵敏度高,适用于中毒患者尿液和胃液中有毒生物碱成分的检测.     

高效液相色谱-离子阱质谱法测定生物体液中的痕量敌鼠和氯敌鼠

建立了中毒应急检测样品生物体液内痕量敌鼠和氯敌鼠的高效液相色谱-离子阱质谱定性定量检测方法。全血样品由甲醇/乙腈(50/50, v/v)沉淀蛋白后再经Oasis HLB固相萃取小柱净化富集,尿液样品直接经同类小柱净化富集。采用Extend C18柱分离,以乙酸铵-乙酸(0.02 mol/L, pH 5.5)缓冲溶液和甲醇(15/85, v/v)溶液为流动相,使用电喷雾电离负离子多反应监测模式检测敌鼠和氯敌鼠。对全血样品,敌鼠和氯敌鼠分别在1.0～200.0 μg/L和0.5～100.0 μg/L范围内呈良好的线性关系,回收率分别在90.1%～92.2%和87.6%～93.4%范围内,日内相对标准偏差(RSD)分别小于6.8%和7.1%,日间RSD分别小于9.9%和10.9%,定量限分别为1.0 μg/L和0.5 μg/L。对尿液样品,敌鼠和氯敌鼠分别在0.2～ 40.0 μg/L和0.1～20.0 μg/L范围内呈良好的线性关系,回收率分别在90.1%～94.5%和90.0%～ 98.0%范围内,日内RSD分别小于6.1%和7.3%,日间RSD分别小于8.9%和11.2%,定量限分别为0.2 μg/L和0.1 μg/L。本方法简便、灵敏,能满足敌鼠和氯敌鼠中毒病人的临床快速诊断要求。     

在线固相萃取-液相色谱-串联质谱法检测蘑菇中毒患者尿液中痕量α -鹅膏毒肽

建立了在线固相萃取-液相色谱-串联质谱（online SPE-LC-MS/MS）测定蘑菇中毒患者尿液中痕量α -鹅膏毒肽的分析方法。样品经甲酸酸化的乙腈-甲醇（5：1,v/v）沉淀蛋白质,反相液液微萃取去除样品提取液中的有机溶剂,毒素经ODS微柱（5 mm×2.1 mm,5 μm）在线SPE净化,XBridge^TM BEH C₁₈ 色谱柱（150 mm×3.0 mm,2.5 μm）分离,MS/MS测定。采用基于定量环的快速阀切换技术作为在线SPE和LC-MS/MS模块的接口,使得两个分离模块互相独立,无论是流动相还是压力,都不会互相干扰,保证了系统的稳定性;在线系统的精准净化,有效消除了后续质谱检测的基质效应,确保了尿液中痕量水平α -鹅膏毒肽的定性定量检测。尿液中α -鹅膏毒肽在0.1~50 μg/L范围内线性关系良好,相关系数（r ² ）为0.9983;检出限（LOD）为0.03 μg/L;α -鹅膏毒肽的加标（0.1、2.0和20 μg/L）平均回收率为84.3%~91.7%,相对标准偏差（RSD）为3.8%~7.2%。体内鹅膏毒肽代谢迅速,生物基质中痕量水平毒素的检测是其中毒实验室鉴定的主要难题,通过实际样品检测,证明该法操作简单,准确、灵敏;溶剂沉淀蛋白质和反相液液微萃取去除有机相和脂溶性基质的简单操作,可以作为水溶性毒素在线SPE-LC-MS/MS检测时快速且有效的配套前处理方法;基于在线SPE精准净化技术,可以实现尿液中α -鹅膏毒肽的高灵敏度测定（LOD为0.03 μg/L）,解决了中毒时患者体内痕量水平α -鹅膏毒肽定性确证的难题,部分患者α -鹅膏毒肽中毒实验室鉴定的时间可以扩展到90 h以上;同时,痕量水平的定量检测技术,可以为中毒后迅速代谢的α -鹅膏毒肽在体内的剂量反应关系研究提供可靠的技术支撑。     

老鼠血清中苯扎贝特的HPLC-MS法测定

建立一种简便、快速、灵敏的高效液相色谱-质谱联用测定老鼠血清中苯扎贝特的方法。 采用Gemini C18色谱柱;流动相：V(乙腈)∶V(甲醇)∶V(水)=60∶15∶25(0.03%甲酸水溶液);柱温35 ℃,流速0.3 mL/min;紫外吸收波长为235 nm;进样量5 μL。 质谱采用电喷雾电离负离子模式,用于定量分析的离子分别为[M-H]- m/z 359.65→273.70(苯扎贝特)和[M-H]- m/z 212.95→127.08(氯贝酸)。 对苯扎贝特检测的线性范围为0.073~7.884 mg/L,r=0.9995。 得到苯扎贝特的平均回收率为94.3%~103.1%;方法的日内和日间的相对标准偏差(RSD)均小于6%;最低检测限(LOD)与定量限(LOQ)分别为9.0和30 μg/L;为临床上人体血清中苯扎贝特的浓度检测提供了一种重现性好、灵敏度高的分析方法。     

A rapid MCM‐41 dispersive micro‐solid phase extraction coupled with LC/MS/MS for quantification of ketoconazole and voriconazole in biological fluids

A rapid dispersive micro‐solid phase extraction (D‐μ‐SPE) combined with LC/MS/MS method was developed and validated for the determination of ketoconazole and voriconazole in human urine and plasma samples. Synthesized mesoporous silica MCM‐41 was used as sorbent in d ‐μ‐SPE of the azole compounds from biological fluids. Important D‐μ‐SPE parameters, namely type desorption solvent, extraction time, sample pH, salt addition, desorption time, amount of sorbent and sample volume were optimized. Liquid chromatographic separations were carried out on a Zorbax SB‐C₁₈ column (2.1 × 100 mm, 3.5 μm), using a mobile phase of acetonitrile–0.05% formic acid in 5 mm ammonium acetate buffer (70:30, v /v). A triple quadrupole mass spectrometer with positive ionization mode was used for the determination of target analytes. Under the optimized conditions, the calibration curves showed good linearity in the range of 0.1–10,000 μg/L with satisfactory limit of detection (≤0.06 μg/L) and limit of quantitation (≤0.3 μg/L). The proposed method also showed acceptable intra‐ and inter‐day precisions for ketoconazole and voriconazole from urine and human plasma with RSD ≤16.5% and good relative recoveries in the range 84.3–114.8%. The MCM‐41‐D‐μ‐SPE method proved to be rapid and simple and requires a small volume of organic solvent (200 μL); thus it is advantageous for routine drug analysis.     

Development and validation of a hydrophilic interaction ultra‐high‐performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry method for rapid simultaneous determination of 19 free amino acids in rat plasma and urine

Determination of amino acids in biofluids is a challenging task because of difficulties deriving from their high polarity and matrix interference. A simple, reliable and high‐throughput hydrophilic interaction UHPLC–MS/MS method was developed and validated for the rapid simultaneous determination of 19 free amino acids in rat plasma and urine samples in this paper. Hydrophilic method with a Waters Acquity UPLC BEH Amide column (100 × 2.1 mm,1.7 μm) was used with a gradient mobile phase system of acetonitrile and water both containing 0.2% formic acid. The analysis was performed on a positive electrospray ionization mass spectrometer via multiple reaction monitoring. Samples of 10 μL plasma and 50 μL urine were spiked with three deuterated internal standards, pretreated with 250 μL acetonitrile for one‐step protein precipitation and a final dilution of urine samples. Good linearities (r > 0.99) were obtained for all of the analytes with the lower limit of quantification from 0.1 to 1.2 μg/mL. The relative standard deviation of the intra‐day and inter‐day precisions were within 15.0% and the accuracy ranged from ?12.8 to 12.7%. The hydrophilic interaction UHPLC–MS/MS method was rapid, accurate and high‐throughput and exhibited better chromatography behaviors than the regular RPLC methods. It was further successfully applied to detect 19 free amino acids in biological matrix.     

电喷雾萃取电离质谱法检测1-羟基芘

采用电喷雾萃取电离质谱(EESI-MS)分析致癌性环境有机污染物多环芳烃(PAHs)生物标志物1-羟基芘(1-OHP),探究1-OHP在EESI源中电离的可行性,考察ESI溶剂和样品溶液组成对方法灵敏度的影响,初步建立I-OHP的EESI MS半定量分析方法.结果表明,溶液中1-OHP能够在EES1源中有效电离,生成准分子离子[M-H]- (m/z 217),并得到其二级质谱特征碎片离子[M- H- CO]- (m/z 189);水、甲醇、乙醇、正丙醇和正丁醇5种ESI溶剂中,使用甲醇时,离子峰m/z 217信噪比最大.样品溶液中甲醇含量越高,离子峰m/z 217强度越强.离子峰m/z 217强度与1-OHP浓度在10～200 μg/L内的线性相关性相对最好;相关系数(R)0.982;相对标准偏差(RSD)为3.4％～14.0％(n=5);定量下限约为10 μg/L(S/N=10);单次检测时间小于0.5 min.     

自制混合型小柱净化-高效液相色谱-串联质谱法同时测定尿液中有机磷酸酯代谢物和8-羟基-2'-脱氧鸟苷

建立了基于自制混合型小柱的样品净化-高效液相色谱-串联质谱同时测定7种有机磷酸酯（OPEs）主要代谢产物及生物标志物8-羟基-2'-脱氧鸟苷（8-OHdG）的分析方法。样品经乙腈提取后用自制小柱富集净化,以乙腈-0.2%（v/v）氨水溶液作为流动相进行梯度洗脱,在多反应监测模式下进行定性和定量分析。结果显示,8种目标物在0.1~200 μg/L范围内呈良好的线性关系,7种OPEs代谢物的回收率为52.36%~114.56%,8-OHdG回收率为88.63%~97.72%。将该方法应用于人体尿液实际样品中,7种OPEs代谢物和8-OHdG的检出范围分别为6.24~46.07 μg/L和5.90~16.71 μg/L,8-OHdG与7种OPEs代谢物总含量之间存在显著相关性。该方法操作简单、灵敏度高、准确性好、重现性强,可为更全面地评价人体内OPEs暴露水平及机体损伤提供可靠的技术支持。     

同位素稀释-高效液相色谱-质谱联用技术检测大鼠血浆中的芥子气水解产物

应用同位素稀释-高效液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS),建立了同时定量检测血浆中芥子气水解代谢产物硫二甘醇(TDG)和二羟乙基亚砜(TDGO)的方法.应用甲醇和乙腈混合溶剂沉淀染毒大鼠血浆中蛋白,采用ZORBAX-C18色谱柱(100 mm×3.0 mm,3.5μm),以5 mmol/L甲酸铵-甲醇梯度洗脱分离待测物.以d8-TDG为内标,在正离子多反应监测模式下定性和定量分析TDG和TDGO.方法学验证结果表明,TDG在5～800 μg/L和TDGO在0.5～80.0 μg/L范围内均呈良好的线性关系(r2＞0.991),定量限分别为5和0.5 μg/L,加标回收率在101％～118％之间,方法的日内和日间精密度(RSD)均小于10％.对SD大鼠(n=6)采用皮下注射方式进行染毒后采样测定,代谢动力学参数计算结果显示,TDG和TDGO的达峰时间(tmax)分别为30和60 min,峰值浓度(cmax)为(1724±227)μg/L和(301±115)μg/L,血浆浓度-时间曲线下面积(AUC)为(3286±249) μg· h/L和(1010±363) μg· h/L.     

Determination of azide in gastric fluid and urine by flow-injection electrospray ionization tandem mass spectrometry

A rapid method was developed to identify and quantify the azide ion (N(3)(-)) in gastric fluid and urine. N(3)(-) in diluted biological fluids was reacted with NaAuCl(4) to produce Au(N(3))(2)(-), which was extracted with octanol. Five microliters of the extract were flow-injected into an electrospray ionization tandem mass spectrometric instrument. Quantification of N(3)(-) was performed by selected reaction monitoring of the product ion Au(N)(N(3))(-) at m/z 253, which was derived from the precursor ion Au(N(3))(2)(-) at m/z 281, using 50 μL of aqueous solution within 10 min. This method was found to be linear up to 10(-5) M, to have a limit of quantification of 10(-7) M, a limit of detection of 3.0?×?10(-8) M, and a coefficient of variation of ≦10% at 10(-7) M. In the case of urine, 50 μL of urine were spiked with N(3)(-), this was diluted 10-fold and passed through 1 mL of a resin, and finally diluted to 100-fold of the original. This method was linear up to 10(-3) M, had a limit of quantification of 10(-5) M, a limit of detection of 3.0?×?10(-6) M, and coefficient of variation of ≦8.8% for an original urine concentration of 10(-5) M. The practical applicability of this method was checked by diluting 1 μL of a suspected suicide victim's gastric fluid 20,000-fold and 1 μL of the victim's urine 5,000-fold and then measuring the N(3)(-) levels. These levels were found to be (7.5?±?1.0)?×?10(-2) M and (3.2?±?0.4)?×?10(-3) M, respectively.