高效液相色谱法测定血清中茶碱浓度

采用高效液相色谱,分析柱：３μｍ,３．３ｃｍ＊４．６ｍｍ,Ｉ．Ｄ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ,ＵＳＡ）;预柱：１０μｍ,１ｃｍ＊２．１ｍｍ,Ｉ．Ｄ（Ｐｅｒｋｉｎ ＥＬｍｅｒ,ＵＳＡ）;以乙酰氨基酚为内标对氯仿－异丙醇（９５：５,Ｖ／Ｖ）提取样品进行了分析,流动相：０．１ｍｏｌ／Ｌ醋酸缓冲液（ＰＨ＝４．５）－甲醇（７０：３０,Ｖ／Ｖ）;检测波长：２７０ｎｍ;流速０．５ｍＬ／ｍｉｎ,３ｍｉｎ即完成一次茶     

高效液相色谱法分析人血清中硫唑嘌呤和巯嘌呤的浓度

建立了用ＨＰＬＣ同时测定人血清中硫唑嘌呤（ＡＺＰ）和６－巯基嘌呤（６－ＭＰ）浓度的方法。血清样品经乙腈除蛋白后在常压和３７℃下用氮气吹干,残余物用１００μＬ洗脱液溶解,离心后上清液直接进样。以ＳｐｈｅｒｉｓｏｒｂＣ１８固定相,采用梯度洗脱,从Ｖ（乙腈）∶Ｖ（０．０１ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾）＝３∶９７经５ｍｉｎ时变为１８∶８２,１５ｍｉｎ后再变为５０∶５０,检测波长开始为３２５ｎｍ,１０ｍｉｎ后为２７８ｎｍ,甲硝唑（ＭＮＺ）为内标。ＡＺＰ和６－ＭＰ平均回收率分别为（１００．６±４．２）％和（１０２．４±４．５ ）%。     

邻苯二甲醛-尿素柱前衍生高效液相色谱法快速检测枸杞中牛磺酸

干枸杞经粉碎、匀浆、离心后,通过阳离子交换柱脱去样品中其它氨基酸,再通过Ｚｏｒｂａｘ－Ｃ８柱进行柱前衍生分离。衍生剂：Ａ．４％ＯＰＡ甲醇溶液;Ｂ．尿素∶磷酸钠盐缓冲液（ｐＨ６．８）＝１∶３（Ｗ／Ｖ）。流动相：甲醇∶０．０１ｍｏｌ／Ｌ乙酸钠溶液（ｐＨ６．８）＝３５∶６５（Ｖ／Ｖ）。紫外检测波长３３０ｎｍ。牛磺酸浓度在０．１～１．０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内可被定量测定。回收率可达１００．３１％±１．９８％,变异系数（ＣＶ）为１．９４％。     

高效液相色谱法测定人脑脊液中γ-氨基丁酸和谷氨酸

研究了丹酰氯柱前衍生反相高效液相色谱法测定人脑脊液中γ－氨基丁酸（Ｇａｂａ）和谷氨酸（Ｇｌｕ）的方法。检测波长为ＵＶ２５４ｎｍ;流动相Ａ：甲醇;流动相Ｂ：四氢呋喃－甲醇－０．０５ｍｏｌ／Ｌ醋酸钠（ｐＨ６．２）（５７５４２０,Ｖ／Ｖ）;流速为１ｍＬ／ｍｉｎ;梯度洗脱。讨论了有关测试条件。方法的线性范围分别为５～１０００μｍｏｌ／Ｌ（Ｇｌｕ）和１～６００μｍｏｌ／Ｌ（Ｇａｂａ）;最低检出限（μｍｏｌ／Ｌ）分别为０．００２（Ｇｌｕ）和０．００１（Ｇａｂａ）。     

肿瘤细胞中长春新碱的高效液相色谱法测定

长春新碱（ＶＣＲ）为重要和常用抗肿瘤药物之一。肿瘤细胞耐药性是导致化疗失败的主要原因。为了筛选耐药细胞的逆转剂,建立了测定肿瘤细胞内ＶＣＲ浓度的高效液相色谱法,色谱条件为：Ｚｏｒｂａｘ－ＯＤＳ反相柱２５ｃｍ×４．６ｍｍｉ．ｄ．,流动相：０．０２ｍｏｌ／ＬＫ２ＨＰＯ４（ｐＨ６．６）∶ＣＨ３ＯＨ（２０∶８０,Ｖ／Ｖ）,流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ,检测波长：２６７ｎｍ。方法简单、快速、选择性好,在１０～２００ｍｇ／Ｌ范围内ＶＣＲ浓度－峰高呈良好的线性关系（ｒ＝０．９９９８）,仪器灵敏度为４ｎｇ。     

反相高效液相色谱法测定牙膏中的甘草次酸

采用反相高效液相色谱法测定了牙膏中的甘草次酸。在ＹＷＧ Ｃ１８（４０ｍｍｉ．ｄ．×２５０ｍｍ,１０μｍ）色谱柱上,以Ｖ（甲醇）∶Ｖ（００１ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４）＝８５∶１５（ｐＨ３０）的溶液为流动相,流速为１０ｍＬ／ｍｉｎ,紫外检测波长为２５４ｎｍ,室温下检测。甘草次酸用甲醇提取。甘草次酸的平均回收率为９９６１％～１０１６７％,样品测试相对标准偏差为１８５％～３１６％。方法操作简便、快速和准确。     

高效液相色谱法测定人血浆中甲磺酸培氟沙星浓度

建立了一种测定人血浆中甲磺酸培氟沙星的匠相液相色谱方法,用的是ＺｏｒｂａｘＯＤＳＣ＿（１８）柱和用三乙醇胺调节成ｐＨ为３．０的甲醇－０．０４ｍｏｌ／ＬＨ＿３ＰＯ＿４溶液（８０：２０,Ｖ／Ｖ）的流动相,检测在２７６ｎｍ处进行,流量为１ｍＬ／ｍｉｎ,线性范围是６．０１×１０￣（－８）～３．０１×１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ（γ＝０．９９９８）,检测极限为６．０１×１０￣（－８）ｍｏｌ／Ｌ,平均回收率为９７．５７±３．０４％,日内与日间的ＣＶ分别为３．２９％和５．０８％。     

丁基罗丹明B—钼酸盐光度法连续测定铈和钪

在聚乙烯醇（ＰＶＡ）存在下，丁基罗丹明Ｂ（ＢＲＢ）分别与铈钼、钪钼杂多酸络阴离子形成离子缔合物，其最大吸收均位于５７０ｎｍ，表面摩尔吸光度分别为εＣｅ＝３．９６×１０＾６Ｌ．ｍｏｌ＾－１．ｃｍ＾－１，εＳｃ＝４．７１×１０＾５Ｌ．ｍｏｌ＾－１．ｃｍ＾－１，服从比耳定律范围分别为０－２４μｇ／Ｌ Ｃｅ和０－６０μｇ／ＬＳｃ，测定极限为Ｃｅ１．０μｇ／Ｌ（ｎ＝１２）和Ｓｃ１．９μｇ／Ｌ（ｎ＝１０），对     

5-磺酸钠间苯二甲酸二甲酯的高效液相色谱法分析

提出了用离子对反相高效液相色谱分析５－磺酸钠间苯二甲酸二甲酯的方法,色谱柱为ＨｙｐｅｒｓｉｌＢＤＳＣ１８,５μｍ,２５０ｍｍ×４．６ｍｍ,流动相为Ｖ（甲醇）∶Ｖ（水）＝６０∶４０（甲醇中含四丁基磷酸二氢铵１０ｍｍｏｌ／Ｌ）,柱温为３０℃,流速为０．８ｍＬ／ｍｉｎ,进样体积为２０μＬ,检测波长为２２０ｎｍ。用外标法进行了定量,相对标准偏差和回收率分别为０．２６％和９８．１％～９９．６％。     

测定大豆和葛根中异黄酮的高效液相色谱法

建立了测定大豆和葛根７种异黄酮成分的高效液相色谱法,采用日本岛ｈｉｍ－ＰａｃｋＣＬＣＯＤＳ柱「１５０ｍｍ＊６．０ｍｍＩＤ;５μｍ）,Ｖ甲醇：Ｖ醋酸：Ｖ水＝３０：３．５：６６．５体系为流动相,０－８．５ｍｉｎ时流动相流速为１．０ｍＬ／ｍｉｎ,８．５－４７ｍｉｎ时流速为１．５ｍＬ／ｍｉｎ,柱温５０℃,检测波长２５４ｎｍ,外标法定量。     

Measurement of reduced and total mercaptamine in urine using liquid chromatography with ultraviolet detection

A simple liquid chromatographic method for the determination of reduced and total mercaptamine in human urine is described. The method is based on derivatization with 2-chloro-1-methylquinolinium tetrafluoroborate followed by ion-pairing reversed-phase liquid chromatography separation and ultraviolet-absorbance detection at 355 nm. Total mercaptamine was determined by reductive conversion of its oxidized fraction to the thiol form before the derivatization step. Baseline separation was achieved on an analytical Zorbax SB C(18) (5 microm, 150 x 4.6 mm) column with a mobile phase consisting of pH 2.0 0.05 mol L(-1) trichloroacetic acid buffer (component A) and acetonitrile (component B) pumped at 1.2 mL min(-1). Gradient elution was used: 0-3 min 12% B, 3-9 min 12-30% B, 9-12 min 30-12% B. The response of the detector was linear within the ranges studied, from 0.1 to 50 micromol L(-1) for reduced mercaptamine and from 0.4 to 400 micromol L(-1) for total mercaptamine. The imprecision ranges for reduced and total mercaptamine were within 1.45-11.71 and 0.73-10.61%, respectively. The analytical accuracy for determined compounds was from 98.79 to 109.77%. The lower limits of detection and quantitation were 0.05 and 0.1 micromol L(-1) of urine for reduced mercaptamine, and 0.2 and 0.4 micromol L(-1) of urine for total mercaptamine, respectively. This method can be used for routine clinical monitoring of the title thiol-drug and its reduced and oxidized fractions. Moreover, cysteine and cysteinylglycine can be measured concurrently, if needed.     

柱前衍生-反相高效液相色谱法测定不同方法煮制的猪肉及其汤汁中的游离氨基酸

建立了反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离检测用不同方法煮制的猪肉及其汤汁中17种游离氨基酸的方法.样品经6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)柱前衍生后,采用Nova- PakTMC18色谱柱分离,以AccQ·Tag Eluent A稀释液、乙腈和超纯水为流动相,梯度洗脱,检测波长为248 nm,在4...     

柱前衍生-反相高效液相色谱法测定人血白蛋白中辛酸钠含量

建立了柱前衍生-反相高效液相色谱法测定人血白蛋白中辛酸钠含量的方法。用正己烷萃取人血白蛋白中的辛酸钠,与ω-溴苯乙酮和18-冠-6醚在50℃反应30min,然后用甲醇-水(75∶25,V/V)于Nova-ParkC18柱(150mm×3.9mm,4μm)上分离,在262nm检测衍生物,流速为1.0mL/min,庚酸为内标。辛酸和庚酸的萃取率可分别达到98.2%和97.9%,RSD小于0.9%。方法的线性范围为9.00×10-4～1.44×10-2mol/L(r=0.9995),平均加样回收率为99.7%,RSD≤0.9%。本方法准确、重现性好,可用于人血白蛋白中辛酸钠含量的测定。     

高效液相色谱法快速测定人血清中丙戊酸含量

建立了血清中丙戊酸的高效液相色谱快速分析法。用ＺｏｒｂａｘＯＤＳ柱,ｐＨ４．２硫酸水溶液为流动相,检测波长２１０ｎｍ,流速０．８ｍＬ／ｍｉｎ,线性范围０．８２μｍｏｌ／Ｌ～１．８ｍｍｏｌ／Ｌ（ｒ＝０．９９６）,最低检测限０．８２μｍｏｌ／Ｌ,平均回收率为９８．３２％±２．２７％,日内与日间的变异系数分别为３．３１％（ｎ＝５）和４．８２％（ｎ＝７）。     

3,3′-二氨基联苯胺柱前衍生高效液相色谱法测定酒中双乙酰

以3,3′-二氨基联苯胺(DAB)为衍生化试剂,建立了柱前衍生高效液相色谱测定酒中双乙酰含量的分析方法。双乙酰与衍生化试剂DAB在室温条件下反应10 min进行柱前衍生,并采用Shim-pack VP-ODS色谱柱(250mm×4.6 mm,4.6μm)对衍生化产物进行分离分析,以水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速为0.7 mL/min,并采用配有二极管阵列检测器(DAD)的高效液相色谱仪测定,检测波长为254 nm。该法在双乙酰浓度为0.20~180μmol/L的范围内呈现良好的线性关系,相关系数(R2)为0.999,检出限(S/N=3)为0.09μmol/L,定量限(S/N=10)为0.20μmol/L,日内精密度(RSD)为1.28%(n=6)。实际酒样品的加标回收率为92.0%~103.6%,RSD为0.69%~3.45%(n=3)。该法简便快捷,结果准确,稳定性好,可以用于白酒及红酒中双乙酰含量的测定。     

整体柱高效液相色谱法测定草甘膦原药中甲醛含量

建立了衍生化-高效液相色谱法对草甘膦原药中痕量甲醛含量进行测定的方法。样品中残留甲醛经超声波水浴提取，与2，4-二硝基苯肼衍生反应，生成的2，4-二硝基苯腙用反相整体柱色谱进行快速分离，在360nm紫外波长下检测，外标法定量。该分析方法在2．0～200mg/L浓度范围呈良好线性，添加回收率在88％～105％之间，相对标准偏差小于5％。样品中甲醛的最小检测浓度为0．5mg/kg。比较了整体色谱柱和常规C18反相柱分离效果，表明整体色谱柱可在1．5min内实现衍生化产物的快速分离并进行定性定量，同时发现相对于常规柱，采用整体柱提高了检测灵敏度约10倍。     

固相萃取和高效液相色谱相结合快速测定苦瓜甙A的含量(英文)

 建立了一个快速、简单、准确的固相萃取和高效液相色谱相结合的测定苦瓜甙A含量的方法。样品经石墨碳固相萃取管 (3mL/ 2 5 0mg)纯化后以高效液相色谱检测。色谱柱为C18,流动相为V(乙腈 )∶V(甲醇 )∶V(5 0mmol/L磷酸二氢钾缓冲液 ) =2 5∶2 0∶6 0 ,流速为 0 .8mL/min ,检测波长为 2 0 8nm。标准曲线自 10mg/L到 10 0 0mg/L呈线形关系 (r2 =0 .9992 )。该方法具有很好的重现性 ,日内或日间的相对标准偏差和相对平均误差均小于 10 %。样品回收率大于 90 %。     

Improved method to determine succinylacetone in dried blood spots for diagnosis of tyrosinemia type 1 using UPLC-MS/MS

We describe an improved diagnostic method for tyrosinemia type 1 based on quantifying succinylacetone in dried blood spots by ultra-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry. Succinylacetone extracted from a single 3/16 inch disk of specimen collection paper containing a dried blood spot was derivatized with dansylhydrazine, separated on an Acquity UPLC BEH C(18) column (2.1 x 50 mm, 1.7 microm) and detected by electrospray ionization tandem mass spectrometry. Succinylacetone derivative eluted at 0.6 min with a complete run time of 1 min. Using a 13C4 labeled succinylacetone as an internal standard, the calibration plot was linear up to 100 micromol/L with a detection limit (S/N = 3) of 0.2 micromol/L. Intra-day (n = 13) and inter-day (n = 10) variations were better than 10%. The cutoff level of succinylacetone in dried blood spots from healthy infants obtained by the current method was 0.63 micromol/L (n = 151). In dried blood spots from patients with established tyrosinemia type 1 (n = 11), concentration of succinylacetone was 6.4-30.8 micromol/L.     

高效液相色谱法同时测定血清中的犬尿氨酸和色氨酸

建立了一种能同时检测血清中的犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)和色氨酸(tryptophan,Trp)的高效液相色谱-紫外检测法。采用的色谱柱为Symmetry Shield RP-C18柱(150 mm×3.9 mm i.d.,5 μm),流动相为15 mmol/L乙酸钠-乙酸溶液(含2.7%乙腈,pH 3.6),流速为1.0 mL/min,紫外检测波长为225 nm。血清标本经5.0%(体积分数)高氯酸溶液去除蛋白质后取上清液直接进样分析测定。研究结果表明,Kyn保留时间为3.5 min,线性范围为0.098~49 μmol/L,最低检出浓度为0.02 μmol/L,回收率为90.82%~93.45%;Trp保留时间为8.1 min,线性范围为4.9~490 μmol/L,最低检出浓度为0.20 μmol/L,回收率为95.51%~98.67%。Kyn和Trp日内、日间测定的相对标准偏差均小于4%,苯丙氨酸、酪氨酸、5-羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对该法均无干扰。该方法简便、快速、稳定、可行,可应用于临床和科研工作。     

高效液相色谱-程序波长紫外检测法同时测定血浆中的色氨酸及其代谢物

建立了一种高效液相色谱-程序波长紫外检测法同时测定血浆中色氨酸(Trp)及其主要代谢产物犬尿氨酸(Kyn)和5-羟色胺(5-HT)。以茶碱为内标(IS),采用BDS-Hypersil-C8柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm)分离。流动相为10 mmol/L醋酸钠缓冲液(pH 4.5)-乙腈(94:6, v/v),流速为0.6 mL/min;柱温为25 ℃;紫外检测波长设定: Kyn和IS为360 nm, 5-HT为220 nm, Trp为302 nm。3种物质的平均回收率为87%～113%;线性范围分别为3.97～400 μmol/L(Trp), 0.421～20.2 μmol/L(Kyn), 4.36～980 nmol/L(5-HT);检出限分别为0.134 μmol/L(Trp), 0.0160 μmol/L(Kyn), 2.03 nmol/L(5-HT)。利用该方法对15例抑郁症患者和15例健康志愿者的血浆进行测定,结果表明两组间Trp的代谢存在显著的差异。