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建立了HSP70-2基因多态性的毛细管电泳-激光诱导荧光(CE-LIF)检测方法。采用试剂盒法提取人血清标本中全基因组DNA作为模板,选择特异引物进行PCR扩增反应,产物用Pst I限制性内切酶酶切;酶切产物用高灵敏度的SYBR Gold荧光染料标记后,用毛细管电泳-激光诱导荧光法检测。在优化的毛细管电泳-激光诱导荧光条件下,酶切产物在25 min内即可完成检测。GeneRular 100bp DNA ladder在同一天内连续测定6次,迁移时间和峰面积的RSD分别为1.8%~2.9%和2.8%~7.9%;连续6日测定迁移时间与峰面积的RSD分别为2.1%~4.3%和3.5%~9.3%。本研究共检测200份样品,其中G/G分型3份,A/G分型25份,A/A分型172份,检测结果与凝胶电泳结果一致。CE-LIF检测方法具有电泳时间短、试样消耗少、绿色环保等优点,能用于HSP70-2基因多态性的检测。 相似文献
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芯片毛细管电泳中组分的迁移行为及其特征 总被引:4,自引:0,他引:4
在自组装的芯片毛细管电泳-激光诱导荧光检测装置上,以单个染料和一组荧光素异硫氰酸酯(FITC)标记的氨基酸为对象,研究了芯片毛细管电泳与传统毛细管电泳之间的差别,考察了玻璃芯片上微通道内的伏安特性以及抑制电压、进样方式和检测点的位置等对芯片毛细管电泳分离分析的影响,特别注意到了其有别于传统毛细管电泳的各种行为特征. 相似文献
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免疫毛细管电泳-激光诱导荧光分析DNA加合物的方法学研究 总被引:2,自引:1,他引:1
DNA加合物是一类重要的生物标志物,可应用于人体致癌物暴露监测、癌症风险评价和人群易感性研究。DNA加合物作为生物标志物的应用需要安全、灵敏、快速的先进分析技术。我们利用免疫毛细管电泳-激光诱导荧光分析,发展了高灵敏的DNA加合物分析方法和技术。本文主要介绍了相关的仪器研制及方法学研究。方法学研究涉及DNA加合物荧光探针的合成和表征、抗体与DNA加合物的相互作用及其结合计量学、抗原-抗体复合物的稳定化和DNA驱动电泳聚焦技术。 相似文献
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转基因玉米的多重PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光检测方法研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用三重PCR反应, 同时扩增CaMV 35S启动子、 hsp70 intron1和CryIA(b)基因之间序列以及Invertase基因, 扩增产物用无胶筛分毛细管电泳-激光诱导荧光检测, 从而建立了多重PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光快速检测转基因玉米的新方法. 对影响多重PCR扩增和毛细管电泳的因素进行了优化. 在优化的条件下, 本方法可以同时检测转基因玉米样品中3种外源基因. 经序列测试证实, 三重PCR 扩增产物的序列与原基因完全一致, 表明扩增结果可靠. 该方法能检出0.05% MON810转基因玉米成分, 远低于欧盟对转基因食品规定标识的质量分数阈值(1%). 该方法对玉米及其制品的检测结果与实时荧光PCR方法的检测结果一致, 与传统的琼脂糖凝胶电泳法相比, 具有特异性高\, 快速及灵敏等优点, 适用于玉米中转基因成分以及转基因玉米MON810品系的快速筛选、 鉴定和检测, 能满足我国实施转基因食品标签法规的要求. 相似文献
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建立了粪便中诺如病毒逆转录PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光快速检测方法。根据诺如病毒核酸保守序列选择引物,扩增出特异的PCR产物;采用响应曲面法进行毛细管电泳条件优化,以含有DNA荧光染料SYBR Gold的0.5%甲基纤维素为筛分介质,通过激光诱导荧光法检测诺如病毒的PCR产物。在优化的毛细管电泳条件下,9 min内可完成诺如病毒PCR产物的检测。扩增产物测序后,与基因库中诺如病毒的序列进行同源性比对,一致性达99%。迁移时间的日内和日间相对标准偏差分别为1.1%~1.3%和1.8%~2.6%,已用于粪便中诺如病毒的快速检测。 相似文献
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异硫氰酸酯衍生氨基酸的毛细管电泳-激光诱导荧光分离及其关键条件的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
利用自组装的毛细管电泳-激光诱导荧光(CD-LIF)装置对20种常见氨基酸的FITC衍生物进行了分离研究,发现缓冲液组成、pH及某些胺类添加剂对分离有重要影响,而其他条件影响较小.在优化条件下,20种FITC-氨基酸衍生物可分为17个峰,而现有方法仅能分出14个峰. 相似文献
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阐释了反斯托克斯光的发光原理.根据荧光的定义,得出反斯托克斯光不属于荧光的结论.指出了仪器分析课程中存在的概念性错误,简要分析了错误原因. 相似文献
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A chip-size spectrometer is realized by combining a linear variable band-pass filter with a CMOS camera. The filter converts the spectral information of the incident light into a spatially dependent signal that is analyzed by the camera. A fluidic platform is integrated onto the spectrometer for analyzing the fluorescence from moving objects. The target is continuously excited within an anti-resonant waveguide, and its fluorescence spectrum is recorded as the object traverses the detection area. 相似文献
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壳聚糖支载有机荧光染料可在生理条件下改变其荧光特性,本文采用壳聚糖(CTS)支载有机荧光染料Cy3,利用红外光谱和热分析对产物进行了表征,研究了壳聚糖支载的荧光染料紫外吸收光谱和荧光光谱特性,结果表明,壳聚糖支载的荧光染料Cy3的紫外吸收特征峰的波长无明显变化,荧光强度明显增强,支载后的荧光染料光稳定性良好,初步细胞标记实验显示,壳聚糖支载后的Cy3染料对脑胶质瘤细胞具有良好的亲和性,并能穿透细胞膜且发出明显荧光。 相似文献
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空间分辨荧光分析技术 总被引:1,自引:0,他引:1
空间分辨荧光分析技术突破了传统荧光分析的局限,为获得空间定位信息提供了技术保障。系统地综述了构成该技术的共焦荧光法、全内反射荧光法、多光子荧光法以及近场荧光法等4种方法的原理、特点、发展及其应用,并且强调了其在单分子测定中的作用。引用文献64篇。 相似文献
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双光子吸收是指在强光激发下,介质分子同时吸收两个光子,从基态跃迁到两倍光子能量的激发态的过程。荧光显微成像是研究活体生物的重要工具,而最通常的细胞成像方法则是使用单光子激发荧光团的单光子显微成像。近红外光源激发的双光子荧光探针克服了单光子荧光探针的光漂白与光致毒而更适于生物检测与成像,为生命科学研究提供了更为锐利的工具。双光子荧光探针的作用机理包括分子内电荷迁移(ICT)、荧光共振能量迁移(FRET)、光诱导电子迁移(PET)与基团转换(GC) 4种方式。该文综述了双光子阳离子探针(Mg2+, Ca2+, Pb2+, Hg2+, Ag+, Fe3+, Zn2+, Na+, Cr3+)、双光子阴离子探针(F-)、pH探针、双光子葡萄糖示踪器、双光子脂筏探针、双光子巯基探针、双光子半胱氨酸探针和双光子生物标记探针,以及双光子荧光探针在生物成像方面的应用,展望了双光子荧光探针的发展趋势与应用前景。 相似文献
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In this paper, we integrate the apparatus of electrophoresis with polarized fluorescence detection to suppress the background fluorescence arising from illuminating the coating layer of channel containers with a laser excitation source. It has demonstrated moderate background suppression efficiency, close to the ideal 3‐fold reduction on the surface doped with randomly distributed static fluorophores. In addition, when the fluorescence coverage is coated along the same orientation more uniformly, the background reduction is 10‐fold in our experiments. This detection scheme is applicable to acquire the electrophoregrams of separating small organic molecules and biopolymers, such as nucleic acids, when the loading of staining dyes is not heavy. This apparatus is simple. Only adding a pair of polarizer optics is needed. This detection scheme should work equally well with an incoherent light source. 相似文献
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Dr. Yang Zhang Dr. Yeting Zheng Yasniel Meana Prof. Françisco M. Raymo 《Chemistry (Weinheim an der Bergstrasse, Germany)》2021,27(44):11257-11267
The borondipyrromethene (BODIPY) chromophore is a versatile platform for the construction of photoresponsive dyes with unique properties. Specifically, its covalent connection to a photocleavable group can be exploited to engineer compounds with photoswitchable fluorescence. The resulting photoactivatable fluorophores can increase their emission intensity or shift their emission wavelengths in response to switching. Such changes permit the spatiotemporal control of fluorescence with optical stimulations and the implementation of imaging strategies that would be impossible to replicate with conventional fluorophores. Indeed, BODIPYs with photoactivatable fluorescence enable the selective highlighting of intracellular targets, the nanoscaled visualization of sub-cellular components, the real-time monitoring of dynamic events and the photochemical writing of optical barcodes. 相似文献