猪胰脂肪酶的固定化及其在有机相中催化丁酸甲酯和正丁醇的酯交换反应研究

考察了大孔苯乙烯－二乙烯苯交联共聚物的交联度、致孔剂量及胺化试剂对载体固定化猪胰脂肪酶的影响。选择出一种最佳载体对猪胰脂肪酶进行固定化，对比了自由酶和固定化酶在有机相中催化丁酸甲酯和正丁醇的酯交换反应。结果表明，酶经固定化后催化反应活力比自由酶提高近１倍。     

聚丙烯酸甲酯类大孔树脂对猪胰脂肪酶的固定化研究

本文合成了一系列大孔丙烯酸甲酯－二乙烯苯交联共聚物及它们的功能基化产物。考察了交联度，致孔剂量及不同胺化试剂对载体固定化猪胰脂肪酶的影响，选择出一最佳载体并比较了自由和固定化猪胰脂肪酶的酶学性质。     

聚丙烯酸甲酯载体对柱状假丝酵母脂肪酶固定化的研究（Ⅰ）

合成了一系列不同结构的聚丙烯酸甲酯，考察了它们的固定化酵母脂肪酶催化酯水解反应的效果，得到了载体孔结构对固定化效果影响的一些规律．研究了最佳吸附条件，比较ｐＨ和离子强度对酵母脂肪酶自由酶和固定化酶催化酯水解反应活力的影响．     

碳酸钙固定化猪胰脂肪酶的稳定性及催化PDO开环聚合研究

本文研究了不同温度、pH值和储存时间下,游离猪胰脂肪酶与自制碳酸钙固定化猪胰脂肪酶的稳定性,并将固定化猪胰脂肪酶用于催化对二氧环己酮开环聚合。研究结果显示,固定化酶的热稳定性、pH稳定性以及储存稳定性均优于游离酶。当固定化酶用量为单体质量30%,反应温度为80℃,反应时间为72 h时可获得数均分子量为2024 g·mol-1的聚合物。     

固定化脂肪酶活性的X射线微区分析

利用X射线微区分析的方法，对吸附交联法得到的固定化脂肪酶的微观活性进行了分析。结果表明：以合成出的大孔吸附树脂为固定化酶栽体，酶活较高，活性脂肪酶分布较均匀。并得到了固定化脂肪酶的活性定位的最佳条件。     

聚甲基丙烯酸羟乙酯载体固定化酵母脂肪酶在有机溶剂中催化…

用悬浮聚合法合成了一系列聚甲基丙烯酸羟乙酯载体，考察了它们固定化酵母脂肪酶活力与载体的交联度和致孔剂用量之间的关系。研究了这些固定化酵母脂肪酶在有机溶剂中催化酯合成反应的活性，脂肪酶的固定化使之活力表达更为充分，对亲水性较强的有机溶剂有更强的耐受性，并能为其在有机溶剂中催化酯合成反应提供必需水。考察了ＰＨ值，底物种类对固定化酵母脂肪酶催化酯合成反应的影响。     

聚甲基丙烯酸羟乙酯载体固定化酵母脂肪酸在有机溶剂中催化酯合成反应的研究

用悬浮聚合法合成了一系列聚甲基丙烯酸羟乙酯载体，考察了它们固定化酵母脂肪酶活力与载体的交联度和致孔剂用量之间的关系。研究了这些固定化酵母脂肪酶在有机溶剂中催化酯合成反应的活性。脂肪酶的固定化使之活力表达更为充分，对亲水性较强的有机溶剂有更强的耐受性，并能为其在有机溶剂中催化酯合成反应提供必需水。考察了ｐＨ值，底物种类对固定化酵母脂肪酶催化酯合成反应的影响。     

新型树枝状分子复合载体的合成及其对脂肪酶的固定化

新型树枝状分子复合载体的合成及其对脂肪酶的固定化;猪胰;树枝状分子二氧化硅复合载体     

交联烯丙基葡聚精凝胶固定化脂肪酸的研究

本文研究了烯丙基葡聚糖和N、N＇－亚甲基双丙烯酰胺经反相悬浮聚合包埋固定化脂肪酶的方法。考察了悬浮介质、交联度对固定化酶的影响，得出了包埋固定化脂肪酶的最佳条件；并测定了固定化脂肪酶的催化性能，确定了该固定化酶催化橄榄油水解的最适条件。     

碳酸钙固定化猪胰脂肪酶的制备及活性研究

本文利用市售普通碳酸钙(general calcium carbonate,GCC)作为猪胰脂肪酶(PPL)固定化的载体材料,研究了不同固定化条件对所制备的固定化酶活性的影响.结果显示PPL固定化于GCC上的最佳制备工艺为:将20 mL酶液与1.50 g GCC放入置于摇床内的三角瓶中,摇床温度设为40℃,摇床转速设为...     

大孔载体对米曲霉氨基酰化酶的固定化研究

用合成的大孔丙烯酸甲酯-—二乙烯苯交联共聚物(聚丙烯酸甲酯)、丙烯酰胺-N,N′-亚甲基双丙烯酰胺交联共聚物(聚丙烯酰胺)及它们的功能基化产物作为固定化氨基酰化酶的载体。考察了载体性质对固定化氨基酰化酶效果的影响。比较了底物浓度、pH、磷酸缓冲液浓度、温度对氨基酰化酶溶液酶及固定化酶的影响。利用其中一种载体制成固定化酶柱,对DL-蛋氨酸进行了连续拆分,考察固定化酶的操作稳定性。     

高分子载体对米曲霉氨基酰化酶的固定化研究

合成了一系列不同结构的丙烯酸甲酯—二乙烯基苯交联共聚物,并用多乙烯多胺胺解制得了功能基化交联共聚物。研究了交联度、致孔剂用量和不同的功能基化试剂对这些载体固定化氨基酰化酶效果的影响。比较了固定化氨基酰化酶与溶液酶的酶学性质。用这种载体制成固定化酶柱,对N—乙酰—DL—蛋氨酸和N—乙酰—DL—苯丙氨酸进行连续拆分,得到了很好的效果。     

单分散磁性纳米粒子固定化猪胰脂肪酶的研究

借助溶热法制备了一种亲水及生物相容良好的Fe3O4磁性纳米粒子,用γ-氨丙基三乙氧基硅烷直接对所得磁性粒子表面改性,然后用戊二醛偶联法制得了固定化猪胰脂肪酶.表征研究显示,所得磁性粒子粒径约200 nm,具有良好的单分散性和磁响应性.考察了戊二醛浓度、给酶量和反应时间对脂肪酶固定化过程的影响,并通过游离酶与固定化酶的比...     

氨化大孔球状聚氯乙烯固定化木瓜蛋白酶的研究

以氨化大孔球状聚氯乙烯为载体,采用戊二醛载体交联的方法,将木瓜蛋白酶进行了固定化。以酪蛋白为底物,测定了固定化酶的活力回收。研究了固定化条件对固定化酶活力回收的影响。同时,对所得固定化酶的性质,如温度-活力关系、pH-活力关系、热稳定性以及重复使用性进行了考察。结果表明,所得固定化木瓜蛋白酶具有较好的稳定性和重复使用性。     

PDA/SiO2大孔复合材料固定化荧光假单胞菌脂肪酶

以具有三维骨架结构的大孔聚合物为模板制备SiO_2大孔材料,通过多巴胺在SiO_2大孔材料孔道表面的原位聚合制得聚多巴胺表面功能化修饰的二氧化硅大孔材料(PDA/SiO_2)。应用SEM、EDX、MIP、BET、TG-DTA和FTIR等技术对修饰前后的材料进行表征。以PDA/SiO_2为载体固定荧光假单胞菌脂肪酶(PFL),优化固定化条件并对比游离脂肪酶和固定化脂肪酶的性质。结果表明SiO_2大孔材料具有三维连续贯通的孔道结构,孔径分布在300~500 nm,聚多巴胺修饰后形成聚多巴胺/二氧化硅复合纳米薄膜构筑的大孔材料。在固定化时间为14 h、p H值为8、初始脂肪酶浓度为0.4 mg·m L-1时,固定化效果最佳,酶活回收率达246%。与游离脂肪酶相比,固定化脂肪酶有更宽的温度和p H适用范围、热稳定性显著提高,并展现出良好的储存稳定性和操作稳定性,固定化脂肪酶的Km低于游离脂肪酶的,酶与底物的亲和性较好。     

京尼平交联磁性壳聚糖微球的制备及其脂肪酶的固定化

采用反相悬浮法与溶胶凝胶法结合制备磁性壳聚糖微球,并以此为载体,京尼平为交联剂,脂肪酶为模型酶进行固定化,研究了酶固定化的最优条件和固定化酶的性质。结果表明,在京尼平浓度为0.6 g/L、交联温度为55 ℃、交联时间8 h,固定化酶的比活力最大,为4.31 U/g。固定化酶在25~35 ℃,pH值在8.0有最大活性,其米氏常数Km为0.26 mol/L。同时,固定化酶具有良好的热稳定性及pH稳定性,可重复利用,且能进行磁分离。     

铈基介孔金属有机骨架固定化酶的构建及催化性能

金属有机骨架(MOF)材料由于其孔隙率高、比表面积大以及具有发达的内联通孔道结构等优点,可以作为优良的生物分子固定化载体。通过表面活性自组装策略制备了铈基介孔MOF(Ce-MOF-F),表征结果表明,该材料有大的比表面积和呈辐射状的介孔孔道结构。以其为载体、南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)为模型酶,通过物理吸附法制备了生物催化剂CALB@Ce-MOF-F,对该固定化酶的酶载量和催化性能进行了研究。在优化条件下,CALB的负载量为162.0mg/g载体,水解活性为899.1U/g蛋白。与游离CALB相比,CALB@Ce-MOF-F表现出对高温、酸碱和有机溶剂等有更强的耐受性;将Ce-MOF-F用于多种酶的固定化,研究其作为载体的普适性,结果表明,介孔Ce-MOF-F对洋葱伯克氏菌脂肪酶(BCL)和漆酶有良好的固定效果,可以作为良好载体,并能对酶起到较好的保护作用。     

磁性壳聚糖微球用于酶的固定化研究Ⅱ磁性壳聚糖微球对脲酶的吸附及其酶学性质的研究

本文用磁性壳聚糖作为载体用吸附法对脲酶进行固定化研究。结果表明,磁性壳聚糖对脲酶的固载量与磁性壳聚糖微球的粒径、交联度及酶溶液的离子强度成反比;固定化脲酶和自由酶的最适温度分别为80℃和70℃,固定化脲的最适合pH值变化不大,固定化脲酶和自由酶的米氏常数km分别为0.00546mol/L和0.19mol/L。     

介孔分子筛在生物酶固定化中的应用

综述了MCM-48和SBA-15等新型介孔分子筛用生物酶固定化载体研究的新进展。介孔分子筛由于拥有巨大的比表面积(~1000m2/g)、纳米尺寸孔道(2~50m)和较大的孔容(~1.0 cm3/g),因此以分子筛为载体利用物理吸附制备的固定化酶呈现出高的催化活性,但固定化酶操作稳定性较低,在使用过程中部分酶分子发生了脱落,其原因是分子筛表面自由的硅羟基通过物理吸附或氢键作用固定酶分子。借助介孔分子筛自身的自由硅羟基在表面嫁接-COOH、-NH2、-CH=CH2等有机官能团来构筑酶固定化的微环境,改善酶分子和载体的亲和作用,提高固定化酶的活性。目前,利用有机官能团功能化介孔分子筛固定化酶是研究发展的趋势。     

聚乙烯亚胺改性聚丙烯腈中空膜固定脂肪酶

聚丙烯腈是富腈基的高分子聚合物,易修饰改性,广泛应用于膜分离应用.我们以聚丙烯腈中空膜为载体,采用化学法交联聚乙烯亚胺并固定脂肪酶,固定过程中引入海藻酸钠,用CaCl_2进行后处理,得到固定化脂肪酶PAN-PEI-SA/E-CaCl_2载酶量为31.70(mg enzyme)/(g support),酶活为50.20 U/(g support),15次重复使用可保留58.77%的酶活,与游离酶相比耐酸性和耐温性有所提高,相同条件下与Nov 435相比,酶活更高,这表明最终得到的固定化脂肪酶有良好的工业应用前景.