中药刺五加叶中有效成分的几种微波辅助提取方法研究

利用高压微波提取法、常压回流微波提取法、流动微波提取法和索氏提取法提取中药刺五加中黄酮和皂苷类化合物,考察各种提取方法提取效率随时间的变化。结果表明,高压微波提取法在压力为300kPa,完全提取的时间为10min;常压回流微波提取法完全提取的时间为14min;流动微波提取法完全提取的时间为10min;索氏提取法需8h尚能完成。各种提取方法总黄酮的提取率分别为43．7、48．2、42．7和34．7mg／g;总皂苷的提取效率分别为60．2、61．5、59．8和46．5mg/g。与索氏提取法比较,微波提取法提取黄酮和皂苷,提取时间大大缩短,且提取效率显著提高。     

非靶向代谢组学用于藜芦妨害人参治疗脾气虚的机制研究

采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱( UPLC/Q-TOF-MS)联用技术,通过非靶向代谢组学方法分析大鼠尿液内源性代谢物的变化,研究藜芦妨害人参发挥药效作用的机制。建立脾气虚大鼠模型,连续给药15天,测定力竭游泳时间及血液中白细胞、红细胞、血红蛋白的含量。结果表明,人参可显著提高脾气虚模型大鼠的力竭游泳时间(p﹤0.01),升高白细胞、红细胞及血红蛋白含量(p﹤0.05,p﹤0.01),藜芦对脾气虚模型大鼠各项指标无明显影响(p>0.05),人参与藜芦配伍后对脾气虚模型大鼠各项指标均无显著影响(p>0.05),表明藜芦妨害了人参发挥药效作用。采用UPLC/Q-TOF-MS技术及非靶向代谢组学的方法分析了空白组、模型组、人参组、藜芦组、参藜组对脾气虚模型大鼠的尿液代谢组差异,其中主成分分析( PCA)得分图显示各组代谢轮廓有显著差别,并通过正交偏最小二乘法-判别分析( OPLS-DA)及数据库检索,鉴定出15种人参干预调节脾气虚模型大鼠的潜在生物标志物,从中找出了7种人参藜芦配伍后减弱人参上述干预作用的潜在生物标志物,并对其涉及的代谢通路进行了系统分析。上述研究结果表明,人参藜芦配伍后妨害了人参对脾气虚模型大鼠的治疗作用,其机理可能是影响人参对体内能量代谢、免疫平衡及氧化还原反应等相关代谢的调节。     

微波辅助流动萃取槐花中的黄酮类成分

槐花为豆科落叶乔木槐树(Sophora japonica L.)的花蕾,槐花能降低血管的通透性,所含芸香甙(芦丁)对心脏传导系统有抑制作用,能增强收缩力及输出量,降低血压;所含槲皮素可以扩张冠状动脉,降低心肌耗氧量,并能降低血脂。     

微波辅助提取刺五加中黄酮类化合物过程中的化学变化研究

利用HPLC-UV和HPLC-ESI-MSn技术系统地研究了传统中药刺五加中黄酮类化合物在微波辅助常压和高压提取过程中的化学变化, 并考察了提取压力和提取时间对其化学变化规律的影响, 结果表明, 在提取压力超过300 kPa时芦丁开始失去一个芸香糖转化为槲皮素; 随着微波照射时间的延长, 金丝桃苷、芦丁、槲皮苷和槲皮素提取产率先增加, 而后下降. 提取压力越大, 提取速率越快, 分解的速度也越快,达到最高提取产率的时间越短.     

应用磁金纳米粒子研究牛血清白蛋白与牛蒡子苷之间的相互作用

建立了用于确定血清白蛋白与中药有效成分相互作用结合常数和结合位点数的新方法.利用磁金纳米粒子的超顺磁性和生物相容性,将其作为白蛋白的载体.将牛血清白蛋白固定在磁金纳米粒子上,白蛋白与药物结合后,通过外加磁场将磁金纳米粒子-白蛋白-药物复合物与游离药物分离,通过荧光光谱法得到的游离药物浓度,根据Scatchard方程直接计算出白蛋白与药物的结合常数和结合位点数.本方法用于研究牛血清白蛋白和牛蒡子苷之间的相互作用,结合常数为2.09×105 L/mol,结合位点数为16.63.通过外加磁场作用,使白蛋白从样品溶液中分离出来,样品溶液中只有药物,消除了测定药物时白蛋白的影响,因此所求得的结合位点的数目更准确.实验结果表明,本方法可用于测定分子间非共价结合的结合常数和结合位点数,同时为研究中药有效成分与血清白蛋白相互作用提供了参考.     

顺铂对卵巢癌COC1细胞总蛋白表达的影响研究

对卵巢癌COC1细胞进行体外培养, 当培养至10⁹/mL浓度时裂解细胞, 获得细胞总蛋白, 利用二维电泳对顺铂诱导前后的细胞内总蛋白质进行分离, 利用PDQuest 7.1.1专业分析软件对二维凝胶图谱进行差异比较, 利用基质辅助激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行质量分析, 最后进行生物信息学检索, 以寻找卵巢癌细胞发生、发展和凋亡的分子标记物. 经二维电泳图谱和质谱分析, 鉴定了11种蛋白, 4种蛋白表达量有差异, 7种蛋白在诱导前后表现为有和无的关系. 有5种是“分子伴侣”蛋白, 有4种蛋白与人体能量代谢有关. 蛋白功能分析提示卵巢癌细胞的蛋白质组表达存在差异, 这些差异蛋白对于寻找卵巢癌生物标志物, 开发新药提供很好的理论依据.     

电离辐射诱导T淋巴细胞的差异蛋白质组学研究

应用电离辐射诱导人类T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株, 再经二维凝胶电泳分离不同照射剂量的细胞总蛋白, 研究电离辐射诱导的人类T淋巴细胞白血病细胞蛋白的差异表达. 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行处理, 得到肽质量指纹(PMF)图谱, 确认6个差异表达蛋白点.     

一种新型微波辅助萃取法用于中药刺五加中总黄酮萃取的研究

微波萃取法是目前世界上公认的绿色样品预处理技术之一 .它在环境、生化、食品、工业以及天然产物和中药等领域均有广泛的应用 [1～ 4 ] .目前 ,最常用的微波萃取系统有两种 [5] ,一种是使用多模式微波炉 ,在密闭容器中加热样品及有机溶剂 ,将目的组分从样品基体中萃取出来 .由于在密闭容器中 ,被萃取样品和溶剂处于高压下 ,温度很高 ,使待萃取物的溶解度增大 ,可获得更高的萃取率 .同时 ,用于这种微波萃取的系统一般可同时容纳 9～ 1 2个萃取罐 ,使试样的批量处理能力大大提高 .该法最主要的缺点是萃取后的液体一般需经离心分离或微孔玻璃…     

肌钙蛋白Ⅰ提取纯化新方法的研究

兔骨骼肌匀浆液经离心后,依次经DEAE－SephadexA25,SephadexG75及ButylSepharoseF.F柱层析,得到了兔骨骼肌肌钙蛋白C(sTnC)纯品.将其与Sepharose4B凝胶偶联,制成sTnC亲和层析凝胶.人心肌或骨骼肌经匀浆、离心后上sTnC亲和层析柱,一步分离可获得人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)或人骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ(sTnI)纯品.HPLC分析出现单一峰.SDS－PAGE分析得到一条电泳带,其分子量分别为25000及21000.用20gsTnC亲和凝胶处理40g人心肌时,相当于每100g心肌可得到82.6mgcTnI.     

氨基喹啉类化合物结构与抗疟原虫活性的相关分析

氨基喹啉类物质对于灵敏的氯喹疟原虫病毒和有抵抗力的疟原虫病毒都具有十分好的抑制作用 ,基于此 ,我们对 40个氨基喹啉类化合物进行了结构和抗疟原虫活性的相关分析 .在实验中 ,应用扩展的引力指数 GQ 和量子化学参数来表征该类化合物的结构 ,并运用进化算法来选择变量以克服传统的逐步回归方法在变量压缩中容易产生局部最优现象的缺点 ,继而通过人工神经网法来构造数学模型 .1　氨基喹啉类化合物的结构及其抗疟原虫活性氨基喹啉类化合物的结构通式为 X116 N7NH12 R N Et2.其抗疟原虫活性以 lg IC50 表示 [1] ,Haiti 1 35为灵敏的氯…