刚果红与蛋白质相互作用的分光光度研究及其分析应用

在pH4.1的Britton-Robinson缓冲介质中,刚果红与蛋白质在室温下能迅速结合生成红色复合物,其最大吸收波长为488nm,比刚果红本身紫移了32nm。用光度法研究了该结合反应的最佳条件,并在此基础上建立了测定蛋白质的方法。测定蛋白质(BSA)的表观摩尔吸光系数4ε88为2.876×105L.mol-1.cm-1,该法简便、快速、选择性好、灵敏度高,用于人血清样品和含乳饮料中蛋白质的测定,结果与考马斯亮蓝法一致。     

铌-铬天青S与牛血清白蛋白结合反应及其应用

探讨了铌-铬天青S配合物与牛血清白蛋白(BSA)结合反应体系.在pH 4.6的邻苯二甲酸氢钾-NaOH(Clark-Lubs)缓冲溶液中,在OP存在下,铌-铬天青S配合物与牛血清白蛋白进一步形成复合物,其最大吸收峰位于595 nm,且随着BSA量的增加,体系在595 nm波长处吸收峰也随着增大.据此建立以铌-铬天青S配合物为光谱探针,分光光度法测定蛋白质含量的新方法.牛血清白蛋白含量在0～0.32 mg/mL的范围内符合比尔定律,摩尔吸光系数ε595为 4.4×105 L·mol-1·cm-1,相关系数为γ=0.9996,生物体内的常见物质基本上不干扰测定,方法可用于人血清蛋白中蛋白质的测定.     

偶氮胂-DBS用于光度法测定牛血清白蛋白

在室温下,于pH 2.5的Britton-Robinson缓冲溶液中及非离子表面活性剂OP存在下,牛血清白蛋白(BSA)与偶氮胂-DBS的复合物的最大吸收在514 nm波长处,但显色复合物与试剂空白吸光度之差在370 nm处最大,选择在370 nm处测定,反应迅速完成。非离子表面活性剂OP可提高反应灵敏度及复合物稳定性。乙醇可提高体系灵敏度。BSA的质量范围在0~60.0 mg.L-1范围内符合比耳定律,方法表观摩尔吸光率3ε70 nm=8.58×105L.mol-1.cm-1。方法用于测定血清样品中蛋白质的总量,5次测定值的RSD为0.60%,回收率为98.0%。     

对乙酰基偶氮氯膦-钡(Ⅱ)-乳化剂OP分光光度法测定蛋白质

提出了借对乙酰基偶氮氯膦(CPApA)-钡(Ⅱ)-乳化剂OP与蛋白质显色反应分光光度法测定蛋白质的高灵敏方法。在pH2.5Britton-Robinson缓冲介质中,蛋白质可与CPApA-钡(Ⅱ)-乳化剂OP形成蓝色复合物,蛋白质的加入可使Ba(Ⅱ)-CPApA配合物溶液增色且增色程度与蛋白质的质量浓度成正比。体系的最大吸收波长位于362nm,测定白蛋白(BSA)表观摩尔吸光系数3ε62nm=6.11×105L.moL-1.cm-1,BSA在0~20mg/L浓度范围内遵守比耳定律。加入乙醇可提高体系的稳定性和灵敏度。表面活性剂OP的加入,显著地提高体系的稳定性。血清中常见组分不干扰蛋白质的测定。所提出的方法可用于人血清样品中蛋白质总量的测定。     

牛血清蛋白与6,6＇-(3H-2.1-苯并(噁)硫醇-3-叉)二百里酚作用研究

应用UV-Vis光谱法,研究了在pH=1.61的酸性缓冲溶液中,牛血清蛋白(BSA)与6,6＇-(3H-2.1-苯并噁硫醇-3-叉)二百里酚(TB)的相互作用.测得生成复合物的最大吸收峰为440nm,与试剂相比蓝移105nm.微环境的影响使BSA-TB复合物的最大吸收波长之间红移约30nm.应用平衡透析法、摩尔比法和双波长法进行测定,结果表明,表观摩尔吸光系数∈B=1.40×104L·mol-1·cm-1,平均结合数n=7,表观结合平衡常数K=2.59×106.研究发现,该反应基本符合Scatchard模型,认为是BSA与TB之间以静电引力和疏水力综合作用的结果.     

亮绿SF(淡黄)与蛋白质相互作用的光度法研究及其分析应用

在pH 2.0的B-R缓冲介质中,蛋白质与亮绿SF(淡黄)(LGSF)在室温下结合生成复合物,其最大吸收波长为665 nm。本文采用光度法研究了结合反应的最佳条件、结合常数及最大结合位点数,并在此基础上建立了一个测定蛋白质的新方法。该方法测定牛血清蛋白(BSA)、人血清蛋白(HSA)及γ-球蛋白G(IgG)的线性范围至少可达80μg/mL,其表观摩尔吸光系数ε分别为:7.25×105、7.22×105与1.84×106L.mol-1.cm-1。除阴阳离子表面活性剂外,其余大部分物质不干扰蛋白质测定。可见方法具有选择性好、灵敏度高等优点。用于人血清样品中总蛋白的测定,所得结果与考马斯亮蓝G-250法基本一致。     

借对乙酰基偶氮羧p-铕(Ⅲ)络合物作光度探针测定生物样品中蛋白质

在pH 3.0的Britton-Robinson缓冲介质中,蛋白质能与铕(Ⅲ)-对乙酰基偶氮羧p形成复合物,最大吸收峰波长为695 nm,比络合物探针本身红移145 nm。可用于生物样品中蛋白质的测定,牛血清白蛋白(BSA)的线性范围为0.010~0.030 g.L-1,相关系数为0.995 4;人血清白蛋白(HAS)的线性范围为0.005~0.025 g.L-1,相关系数为0.994 7,应用于测定生物试样中的总蛋白质,RSD小于6.5%,回收率在98.4%~103.7%。     

乳化剂OP存在下蛋白质与虎红的超分子显色反应研究及分析应用

在pH 2.36～3.29 的Britton-Robinson缓冲介质中,在乳化剂OP存在条件下,虎红与蛋白质发生超分子显色反应形成红色的超分子复合物,该超分子复合物的最大吸收波长为565 nm,而试剂的最大吸收波长为568 nm,紫移了3 nm.在565 nm处考察了多种蛋白质的响应情况,结果表明测定牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)及γ-球蛋白(IgG)时具有高灵敏度,它们的表观摩尔吸光系数ε565和桑德尔灵敏度s分别为1.836×106、 2.213×106、 2.932×106 L·mol-1·cm-1,和0.036、 0.031、 0.061 μg/cm,其线性范围分别为2～36、 2～36 和2～40 mg/L.除阴、阳离子表面活性剂外,其余大部分物质不干扰蛋白质的测定.所拟方法应用于新鲜人尿液和人血清中总蛋白的测定,结果与考马斯亮蓝G-250法基本一致.     

偶氮胭脂红B与血清蛋白质相互作用的光度法研究及其分析应用

在酸性介质中，偶氮胭脂红B（ABX）与蛋白质在室温下能迅速结合生成复合物，其最大吸收波长为570nm，比ABX红移了50nm。本文用光度法研究了该结合反应的最佳条件，并在此基础上建立了一个测定蛋白质的新方法。在570nm处各蛋白质的浓度至少在2.5～120mg/L范围内与吸光度成正比，对测定牛血清蛋白质（BSA）、人血清蛋白（HSA）及γ-球蛋白（IgG）的桑德尔灵敏度分别为0.173、0.173和0.199μg/cm^2。除阴阳离子表面活性剂外，基余大部分物质不干扰蛋白质的测定。可见方法具有选择性好、灵敏度高且快速、稳定的优点，用于尿液及人血清样品中总蛋白的测定，所得结果与考马斯亮蓝方法测得结果基本一致。     

偶氮氯膦Ⅲ-铌(Ⅴ)配合物光谱探针测定血清蛋白质

研究了偶氮氯膦Ⅲ-铌（Ⅴ）配合物与牛血清白蛋白（BSA）的反应体系。实验表明,在pH 4.4的HAc-NaAc缓冲溶液中,随着BSA量的增加,偶氮氯膦Ⅲ-铌（Ⅴ）配合物在572 nm波长处吸收峰也随着减小。据此建立了以偶氮氯膦Ⅲ-铌（Ⅴ）配合物为光谱探针,分光光度测定蛋白质的新方法。牛血清白蛋白在0-38 mg/L范围内与体系的褪色程度呈良好的线性关系,其相关系数为r=0.9992,摩尔吸光系数为5ε72=3.40×10^5L.mol^-1.cm^-1。方法已用于人血清蛋白中蛋白质的测定。