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反相液相色谱中温度对蛋白分子构象变化的新表征 总被引:7,自引:0,他引:7
液相色谱中溶质计量置换保留模型的Z值可用来对反相高效液相色谱中热变蛋白的分子构象进行表片。发现在异丙醇-甲酸44%(V/V)-水体系为流动相对完全变性蛋白的Z值随温度升高而降低。且Z值与绝对温度例数(1/T)成正比,因此蛋白分子构象变化可用Z对1/T作图所得两条直线的斜率差值来表征,差值愈大,蛋白分子构象变化愈甚。该两直线的交点即为蛋白分子构象的突变温度。与通常采用的1gK'对1/T的作图相比,用 相似文献
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液相色谱中的一个新的表征参数Z 总被引:6,自引:2,他引:6
研究了在反相高效液相色谱中的烷基醇-甲酸-水、烷基醇-三氟醋酸-水和烷基醇-磷酸盐-水三种流动相,9种生物大分子的分离体系中Z的表征,发现当蛋白质完全变性时,Z值与其分子量呈正比,而与置换剂分子大小呈反比。Z值会因流动相中离子对试剂的存在而减小,且浓度愈大,减小程序愈甚。对于在异丙醇-水溶液中的不同种类离子对试剂而言,对蛋白构象变性影响的减小顺序为44%甲酸>0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH> 相似文献
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参数Z对疏水色谱中胍变蛋白质分子构象变化的表征 总被引:1,自引:0,他引:1
用计量置换参数Z对疏水色谱流动相中存在盐酸胍时蛋白质分子构象变化进行了表征。除溶菌酶外,其余4种蛋白质的Z值随盐酸胍浓度的增大先增大,而后减小。将盐酸胍和脲对蛋白质Z值的影响进行了比较后发现,在疏水色谱中Z值作为蛋白质分子构象变化表征的一个重要的结论是随变性剂浓度的增大,埋藏在蛋白质分子内部的疏水性氨基酸残基暴露到分子表面的程度逐渐增大,造成了Z值随蛋白质分子构象变化程度的增大而减小。蛋白质的Z值随盐酸胍及脲浓度变化的不同特点,反映了两者对蛋白质变性机理的不同。 相似文献
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参数Z对疏水色谱中胍变蛋白质分子构象亦化的表征 总被引:1,自引:0,他引:1
用计量置换参数Z对疏水色谱流动相中存在盐酸胍时蛋白质分子构象变化进行了表征。除溶菌酶外,其余4种蛋白质的Z值随盐酸胍浓度的增大先增大,而后减小。蛋白质的Z值随盐酸及脲浓度的增大,埋藏在蛋白质分子内 相似文献
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用参数Z表征疏水色谱中脲浓度与蛋白质分子的构象变化 总被引:7,自引:1,他引:7
研究了5种标准蛋白在流动相中含有不同脲浓度条件下的疏水色谱保留行为。当脲浓度不变时,蛋白质的保留仍然服从计量置换保留模型,并可测定在该特定脲浓度条件下蛋白质的Z值。计量置换参数Z可作为疏水色谱中生物大分子的构象变化的表征。 相似文献
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液相色谱Z值对溶菌酶分子构象变化的定量表征 总被引:1,自引:0,他引:1
目前, 研究蛋白分子的构象变化用得最多的是光谱法, 如荧光光谱、圆二色谱和核磁共振谱等[1]. 由于蛋白质分子构象变化与其在色谱中的保留行为直接相关[2], 所以色谱法也成为研究蛋白质分子构象变化的一种新方法[3]. 此外, 计量置换理论中的Z值也已被成功地用于表征生物大分子的构象变化[4]. 用Z值研究蛋白质分子构象变化的优点是可以使用不纯的样品, 这是因为在测定Z值的过程中会与其它组分相分离. 使用Z值还会对蛋白分子构象变化进行定量表征[5,6]. 本文以溶菌酶(Lys)为目标蛋白, 用色谱法[反相液相色谱(RPLC)和弱阳离子交换色谱(WCX)]系统地研究了Lys在不同变性(胍变非还原、脲变非还原、胍变还原和脲变还原)环境中因疏水性及电荷分布的不同对Lys分子构象变化的影响, 并用Z值进行了定量表征. 相似文献
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液相色谱中的一个新的表征参数Z Ⅲ.反相高效液相色谱中的生物大分子分离体系 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了在反相高效液相色谱中的烷基醇-甲酸-水、烷基醇-三氟醋酸-水和烷基醇-磷酸盐-水三种流动相,9种生物大分子的分离体系中Z的表征。发现当蛋白质完全变性时,Z值与其分子量呈正比,而与置换剂分子大小呈反比。Z值会因流动相中离子对试剂的存在而减小,且浓度愈大,减小程度愈甚。对于在异丙醇-水溶液中的不同种类离子对试剂而言,对蛋白构象变性影响的减小顺序为44%(V/V)甲酸>0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH<2.5)>0.1%(V/V)三氟醋酸。 相似文献
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液相色谱中一个新的表征参数Z:Ⅱ.反相液相色谱中小分子极性溶质体系 总被引:3,自引:2,他引:3
反相高效液相色谱(RPLC)中小分子极性溶质的极性是可以用液相色谱中溶质计量置换保留模型中的Z值(1mol溶质被固定相吸附时,在固定相与溶质子间释放出置换剂的mol数)来表征的,其大小可用带有该极性端基的同系物的Z值对碳原子数线性作图的截距求得。这些检性基的Z测量定值与疏水性片段指数1gf间有极好的线性关系。依此关系还可测出一些用其他实验方法无法测得的某些基团的1gf值。 相似文献
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Z及logI对离子交换色谱中脲变溶菌酶分子构象变化的表征 总被引:3,自引:0,他引:3
以溶菌酶(Lys)为目标蛋白,用计量置换保留理论(SDT-R)中的参数Z和logI对弱阳离子交换色谱(WCX)中“准天然态”和脲变还原与非还原的两种变性状态的Lys的分子构象变化进行了表征。发现在流动相中含有脲时,蛋白的保留仍服从SDT理论,可以准确测定在特定脲浓度条件下Lys的Z及logI值。结果表明,3种分子构象状态的Lys的Z值均随脲浓度改变呈现不连续变化;“准天然态”Lys在同一脲浓度条件下的Z值比变性状态的大,logI比变性状态的小,而非还原变性态和“准天然态”Lys的Z和logI值比较接近。还 相似文献
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疏水相互作用色谱中Z值的测定 总被引:1,自引:0,他引:1
对在疏水相互作用色谱中报道的3种测定蛋白质Z值的方法进行了讨论和比较,从线性参数,各种Z值的物理意义,Z值的准确性等结果看,计量置换保模型中的计量参数Z是一个在HIC中好的和通用的描述蛋白保留特征的表征参数。 相似文献
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本文在反相高效液相色谱上,用甲酸-异丙醇体系作流动相,研究了甲酸浓度变化对蛋白质分离的影响。结果表明当甲酸浓度增加时,蛋白质的保留时间减小和计量置换模型之值的降低反映了甲酸在这个体系中具有洗脱剂的作用。甲酸使蛋白质在流动相中的溶解度增大,具有离子对试剂的作用。在这个体系中甲酸还具有破坏蛋白质结构的功能。 相似文献
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本文在反相高效液相色谱上,用甲酸-异丙醇体系作流动相,研究了甲酸浓度变化对蛋白质分离的影响。结果表明当甲酸浓度增加时,蛋白质的保留时间减小和计量置换模型之值的降低反映了甲酸在这个体系中具有洗脱剂的作用。甲酸使蛋白质在流动相中的溶解度增大,具有离子对试剂的作用。在这个体系中甲酸还具有破坏蛋白质结构的功能。 相似文献
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ZSM-5沸石中V的还原性能 总被引:1,自引:0,他引:1
用TPR并结合XRD、ESR和XPS等测试手段研究了V(Ⅳ,Ⅴ)-ZSM-5、V2O5-/ZSM-5(分别用浸渍法和机械混合法制备)及V2O5样品的还原性能,获得了还原过程中物相及钒离子价态变化的信息,发现分散在分子筛表面上的V(Ⅴ)还原温度比V2O5低,而位于ZSM-5骨架上的V(Ⅴ)却比V2O5更难还原。高于1200K骨架V才开始还原;高于1370K,V-ZSM-5分子筛开始解体并转变成方英石结构,从骨架中析出的V完全还原成低价态。 相似文献
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在含氟的弱酸性介质中,以四丙基溴化铵为模板剂,以NH4VO3和VO^2+为钒源合成出V-ZSM-5分子筛,运用XRD、SEM、IR、XPS、ESR等手段对其结构进行了表征,结果表明,钒进入了分子筛骨架,并且主要以正四价态存在。 相似文献
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两个新的氢键诱导液晶化合物的合成 总被引:3,自引:0,他引:3
通过4-丁氧基苯甲酸(4BA0与两个手性取代的苯乙烯基吡啶(VSZ及LSZ)间的氢键作用合成了2个新的液晶化合物,用DSC、偏光显微镜研究了其液晶行为,并由红外光谱证实了分子间氢键的存在,形成的复合物4BA-VSZ具有手性近晶C相。 相似文献
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以溶质计量置换保留模型 (SDM R)为依据 ,通过研究 3种正链醇同系物溶剂置换剂对 14种正链醇同系物溶质色谱保留行为的影响 ,发现计量置换参数Z(对应 1mol溶质被吸附时从溶质与固定相接触处释放出的溶剂的总摩尔数 )、lgI(与 1mol溶质对固定相亲和势有关的常数 )和 j(与 1mol溶剂对固定相亲和势有关的常数 )均随着同系物置换剂相对分子质量的增大而减小 ,并呈现出线性变化 ,表明溶剂强度与溶剂分子的大小有关 ,分子愈大 ,溶剂洗脱能力愈强 ,并遵循同系物规律。 相似文献
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5,10,15,20—四(3—溴—4—磺酸苯基)卟啉高效液相色谱法测定河水中微量… 总被引:4,自引:1,他引:4
研究了新合成的显色剂5,10,15,20-四(3-溴-4-磺酸苯基)卟啉与Co(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Cu(Ⅱ)形成配合物离子的反应,在ZORBAX ODS柱上,用含20mmol/L乙酸-乙酸钠(pH6.0)和10mmol/L四乙基碘化铵的乙腈-水(27:73,V/V)流动相洗脱,在420nm波长下检测。Co(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Cu(Ⅱ)螯合物在9min内获得完全分离,检测限分别为0.2ng,0.05 相似文献