苏丹红Ⅱ与肌红蛋白相互作用的分子模拟与实验

用荧光光谱法研究了苏丹红Ⅱ与肌红蛋白(Mb)之间的相互作用, 实验结果表明,二者结合位点数近似为1, 结合常数K=3.84×107L/mol, 有很强的相互作用. 用分子柔性对接技术模拟确定了它们之间的作用位点、作用力类型及相互作用能. 理论计算的结果表明,苏丹红Ⅱ和Mb相互作用的势能为-9419.9 kJ/mol, 静电能为-7468.8 kJ/mol, 范德华能为-1951.0 kJ/mol. 苏丹红Ⅱ与Mb中His64残基形成氢键, 苏丹红Ⅱ也能与疏水氨基酸残基, 如能产生内源荧光的Phe33、Phe43、Phe106 和 Phe138等发生作用, 这与苏丹红Ⅱ能使Mb荧光猝灭的实验结果是一致的.     

在非平衡稳定态的Belousov-Zhabotinsky体系中检测苏丹红Ⅰ

研究了以丙二酸和铈离子的初始浓度为控制参数的Belousov-Zhabotinsky (B-Z)化学振荡体系的动力学性质,在连续改变控制参数的过程中均出现了分岔现象, 在逼近临界点前的非平衡稳定态对苏丹红Ⅰ进行了分析测定.考察了苏丹红Ⅰ对B-Z体系的两个非平衡稳定态的扰动,结果表明,苏丹红Ⅰ可使体系的电位发生明显的改变.当苏丹红Ⅰ的浓度分别在6.17×10-10～3.16×10-6 mol/L和7.58×10-7～1.55×10-5 mol/L范围内时,苏丹红Ⅰ浓度的负对数(-lgC)与电位的变化值(ΔE)之间呈现良好的线性关系,相关系数分别为0.9975和0.9984;检出限(LOD)可达1.99×10-10 mol/L.以丙二酸初始浓度为控制参数的非平衡稳定态体系成功地测定了伪劣商品辣椒粉中的苏丹红Ⅰ,回收率在98.8%～102.8%之间.     

碳纳米管修饰的玻碳电极测定蕃茄制品中苏丹红Ⅰ

利用吸附法将苏丹红Ⅰ固定在碳纳米管修饰的玻碳电极(CNT)表面,制成稳定的固载苏丹红Ⅰ碳纳米管修饰电极,再利用循环伏安法(CV)、线性扫描伏安法(LSV)研究了苏丹红Ⅰ在CNT上的电化学行为。在pH=2.0的乙醇-B-R缓冲溶液中,苏丹红Ⅰ在-0.16V附近产生一灵敏的还原峰。在优化的最佳实验条件下,溶液中苏丹红Ⅰ峰电流iP与其浓度在8.0×10-7至1.6×10-5mol/L范围内有良好的线性关系,回归方程为iP=2.939+9.963c(×10-6mol/L),R=0.9963。检出限为9.0×10-8mol/L。CNT电极无毒、无污染,灵敏度高,为检测苏丹红Ⅰ提供了一种安全有效的新方法。     

苏丹红Ⅰ在壳聚糖-氧化石墨烯自组装膜修饰玻碳电极上的电化学行为及其测定

制备了壳聚糖-氧化石墨烯自组装膜修饰玻碳电极(CS-GO/GC),并用电化学阻抗法进行表征,研究了苏丹红Ⅰ在该修饰电极上的电化学行为。实验结果表明,苏丹红Ⅰ在该修饰电极上出现了1个氧化峰,为不可逆电化学反应。在50～250 mV.s-1扫速范围内,氧化峰电流与扫速呈线性关系,该电极过程受吸附控制,苏丹红Ⅰ在修饰电极上的电子转移数和质子数均为1,扩散系数为1.70×10-6cm2.s-1。采用差分脉冲伏安法对苏丹红Ⅰ进行测定,结果表明,苏丹红Ⅰ浓度与其氧化峰电流在6.0×10-8～5.0×10-6mol/L范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.995,检出限为4.45×10-8mol/L。该修饰电极具有良好的重现性和稳定性,可简便、快捷、灵敏地检测咸鸭蛋黄中苏丹红Ⅰ的含量。     

超声-气相联合扩散法快速合成ZIF-8用于硝基芳香化合物炸药的传感

三维微孔沸石咪唑基骨架(ZIF-8)纳米晶通过超声-气相联合扩散法快速合成.对该纳米晶进行荧光研究表明,纳米晶对硝基芳香化合物炸药具有良好的荧光淬灭能力.通过建立的Stern-Volmer方程,在1×10-4～8×10-4 mol/L范围内,每种炸药的浓度与纳米晶的荧光淬灭程度呈线性关系.对于2,4,6-三硝基苯酚(T...     

纳米纤维在辣椒粉中苏丹红Ⅱ测定中的应用

建立了以静电纺丝聚苯乙烯纳米纤维作固相微萃取载体富集辣椒粉中苏丹红Ⅱ,线性扫描极谱测定的新方法。苏丹红Ⅱ在硼砂-NaOH缓冲溶液(pH11.5)体系中,用线性扫描极谱法测定,在Ep=-0.93V处产生了一个灵敏的还原峰。峰电流(ip)与苏丹红Ⅱ浓度在2×10-2～2×10-1mg/L范围内呈线性关系,相关系数r=0.9947,检出限为3×10-3mg/L。此法用于辣椒粉中苏丹红Ⅱ的检测,回收率在78.0%～85.7%。     

铋膜修饰电极测定蕃茄制品中苏丹红Ⅰ

采用预镀法将Bi 3+还原成金属铋固定在玻碳电极表面,制成稳定的铋膜修饰玻碳电极(BFE),利用循环伏安法(CV)、方波伏安法(SWV)研究了苏丹红Ⅰ在该电极上的电化学行为。实验结果表明,在pH=2.0的B-R缓冲溶液、乙醇溶液中,苏丹红Ⅰ在-380mV附近产生一灵敏的还原峰,在优化的实验条件下,苏丹红Ⅰ的峰电流iP与其浓度在1.0×10-7～1.6×10-5 mol/L范围内有良好的线性关系,R=0.9987,检出限为3.3×10-8 mol/L。铋膜电极无毒、无污染,灵敏度高,为检测苏丹红Ⅰ提供了一种安全有效的新方法。     

盐酸四环素-Zn(Ⅱ)配合物与DNA的相互作用研究

利用荧光和紫外光谱法研究了盐酸四环素(TC)-Zn(Ⅱ)配合物与calf thymus DNA(ctDNA)的相互作用. 实验证实ctDNA能显著增强TC-Zn(Ⅱ)配合物的荧光强度, 因此可以利用TC-Zn(Ⅱ)配合物进行ctDNA的定量测定. 在最佳实验条件下, 其线性范围为1.0×10-6～5.0×10-5 mol/L, 检出限为5.0×10-7 mol/L. 并讨论了其结合机理.     

钙(Ⅱ)对抗凝血因子Ⅱ与活化凝血因子Ⅹ结合反应的影响

皖南尖吻蝮蛇毒抗凝血因子Ⅱ(ACF Ⅱ)不具有酶的活性,通过与活化凝血因子Ⅹ(FXa)结合成1∶1的复合物来延长凝血时间.用高效液相色谱方法,发现ACF Ⅱ与FXa的结合反应依赖于Ca(Ⅱ)浓度,ACF Ⅱ与FXa的最大结合反应所需要的Ca(Ⅱ)浓度约为1×10-3 mol/L.平衡透析的结果表明,ACF Ⅱ分子中有两个不同亲和性的Ca(Ⅱ)结合位点,表观结合常数分别为(1.1±0.3)×105 L/mol和(1.7±0.4)×104 L/mol,ACF Ⅱ与2个Ca(Ⅱ) 结合所需要的Ca(Ⅱ)浓度也约为1×10-3 mol/L.Ca(Ⅱ)对ACF Ⅱ的荧光有增强效应,其最大荧光增强所需要的Ca(Ⅱ)浓度也约为1×10-3 mol/L.由此推测ACF Ⅱ结合上2个Ca(Ⅱ)可能是其与FXa结合的前提条件.     

吡啰红B为指示剂细胞色素C催化荧光测定青蒿素

在细胞色素C催化下,吡啰红B与青蒿素反应导致荧光降低,细胞色素C与青蒿素的反应为酶-底物模型。动力学研究表明,稳态催化速率依赖于酶和底物浓度,催化常数Km、Vm ax及Kcat分别为3.3×10-5mol/L,5.4×10-6mol.L-1.s-1和13.5 s-1,催化活性受去活化剂和乙醇抑制。在pH 5.3、25℃及7.6×10-7mol/L的细胞色素C催化条件下,荧光降低值ΔF(F0-F)与青蒿素浓度在7.1×10-8~1.1×10-6mol/L范围内呈线性关系;检出限为7.2×10-9mol/L;加标回收率为96.3%~106.8%。方法已用于测定血浆和尿液介质中的微量青蒿素。     

基于固相基质的流动注射液滴荧光法对奎宁与盐酸普鲁卡因的快速检测

以葡聚糖凝胶为固相基质,结合流动注射技术建立了一种新型的液滴荧光法用于奎宁和盐酸普鲁卡因的快速检测.填充葡聚糖CMC-25微珠的离子交换柱用于奎宁和盐酸普鲁卡因的快速分离,基于二者均发射较强的内源荧光,采用液滴荧光法,结合固体基质流动注射分析法,对奎宁和盐酸普鲁卡因进行快速检测.在优化的实验条件下,奎宁和盐酸普鲁卡因的质量浓度分别在1.2×10-6 ～2.4×10-4 g/L和1.2×10-5 ～2.4×10-3 g/L范围内与体系的荧光强度呈线性关系,回归方程分别为IF=-2.92+2.50×106ρ和IF=6.26+1.03×105ρ,相关系数分别为0.999 5和0.989 3,检出限分别为1.0×10-6 g/L和1.1×10-5 g/L.该方法具有较高的灵敏度与选择性以及较好的精密度和重复性.将所建立的方法用于奎宁和盐酸普鲁卡因注射液的测定,回收率为97% ～102%,相对标准偏差小于2.5%.     

基于氧化石墨烯荧光适体传感器的胰岛素检测

采用荧光基团(FAM)标记的核酸适体作为识别元件,氧化石墨烯为淬灭剂,建立了一种高选择性、高灵敏度的核酸适体传感器.核酸适体与氧化石墨烯结合后,荧光淬灭,此时溶液无荧光;加入胰岛素后,溶液中荧光得到恢复.利用荧光分析法检测加入胰岛素前后,溶液中荧光强度的变化,获取了荧光适体传感器的线性度和灵敏度,实现对胰岛素浓度的测定.结果表明,在5×10-8 ～ 1×10-5 mol/L范围内,胰岛素的浓度与溶液中荧光强度有良好的线性关系,检出限为10 nmol/L.采用此方法检测胰岛素,操作简便,检测速度快,准确性高,选择性好,检出限低.     

同步扫描荧光法测定美洛昔康片的含量

基于美洛昔康与浓硫酸反应后的水解产物的荧光性质,建立了一种利用同步扫描技术测量美洛昔康片剂含量的荧光光度分析方法,考察了硫酸的用量及反应时间,表面活性剂等条件对产物荧光性质的影响.方法检出限为1.9×10-9mol/L,同步荧光峰强度与美洛昔康浓度在6.0×10-8-1.0×10-5mol/L范围内呈良好的线性关系.利用本法测定片剂中美洛昔康的含量,平均回收率为97.1%(RSD=1.5%,n=9).     

微分脉冲溶出伏安法测定食品中的苏丹红Ⅰ

采用微分脉冲溶出伏安法测定食品中苏丹红的含量。在pH 5的B-R缓冲溶液底液中,当富集电位为-0.47 V,富集时间为180 s,扫描速度为50 mV.s-1时,苏丹红Ⅰ吸附在玻碳电极表面,于-0.43 V(vs.Ag/AgCl)电位处产生一灵敏还原峰。峰电流与苏丹红Ⅰ浓度在1.2×10-7～8.1×10-5mol.L-1范围内呈线性关系,检出限(3S/N)为4.0×10-8mol.L-1。方法用于辣椒粉样品分析,测得平均回收率为99.3%。     

栀子甙对碲化镉量子点的荧光淬灭作用

以3-巯基丙酸作为稳定剂,在水溶液中合成了CdTe量子点;采用荧光光谱法初步研究了栀子甙对巯基丙酸稳定的CdTe量子点的荧光淬灭作用,考察了量子点浓度、pH、反应时间等多种因素对量子点-栀子甙体系荧光强度的影响,确定了测定栀子甙的最佳实验条件;并初步探讨了栀子甙与该量子点相互作用的可能反应机理.结果表明,在最佳实验条件下,巯基丙酸稳定的CdTe量子点对栀子甙检测的线性范围为2×10-7~4×10-6 mol/L,检出限为1.4×10-7 mol/L,相对标准偏差为0.355%;且常见的金属阳离子、糖类和氨基酸对栀子甙的测定无显著影响.总体而言,该方法可用于人体体液中栀子甙的检测,且两者的作用过程可初步推断为动态淬灭过程.     

水介质中二甲基姜黄素脂质体对金属离子的荧光识别

通过薄膜分散法制备二甲基姜黄素(ASC-J9)脂质体,其粒径分布均匀且在水中的分散效果好,平均粒径为145. 7 nm,分散系数为0. 361。将ASC-J9脂质体作为水溶性的荧光探针,通过荧光猝灭法可选择性识别Fe~(3+)、Fe~(2+)及Cu~(2+)。经过条件筛选得到最佳荧光测试条件为:ASC-J9脂质体浓度为5. 0×10~(-5)mol/L,平衡时间5 min,测试温度25℃。由Job's曲线和荧光滴定结果判断该探针与Fe~(3+)和Cu~(2+)的络合比均为1∶1,与Fe~~(2+)的络合比为2∶1; Stern-Volmer方程判断该荧光猝灭类型为静态猝灭,结合常数分别为KFe(Ⅲ)=9. 63×10~4L/mol,KFe(Ⅱ)=3. 65×10~5L/mol,KCu(Ⅱ)=2. 32×10~5L/mol;该识别体系检测快速、灵敏度高,对Fe~(3+)、Fe~(2+)、Cu~(2+)的线性范围分别为:5. 0×10~(-7)~3. 0×10~(-5)、5. 0×10~(-7)~1. 75×10~(-5)、5. 0×10~(-7)~2. 5×10~(-5)mol/L,检出限分别为6. 41×10~(-7)、3. 28×10~(-7)、5. 08×10~(-7)mol/L。     

盐酸吡格列酮与曙红Y相互作用的荧光和共振光散射光谱研究

在HCl-NaOAc酸性缓冲介质中,曙红Y(EY)与盐酸吡格列酮(PGH)反应形成1∶1的离子缔合物,不仅引起曙红Y的荧光猝灭(FLU),更能导致共振散射(RRS)的显著增强。荧光猝灭的激发和发射波长分别为λex=524nm和λem=544nm;最大共振散射波长为308nm,并在540nm处产生一共振峰。方法的线性范围分别为9.04×10-7～2.05×10-5mol/L(FLU)和1.6×10-7～5.1×10-6mol/L(RRS),检出限分别为1.88×10-7mol/L(FLU)和4.82×10-8mol/L(RRS)。研究了荧光和共振散射的光谱特征、适宜的反应条件及影响因素,据此建立了灵敏、简便、快速测定抗糖尿病药物盐酸吡格列酮的新方法。     

荧光光度法测定环境水样中的苯酚和对苯二酚

建立了荧光光度法直接测定环境水样中的苯酚和对苯二酚的新方法.通过β-环糊精增敏,三维荧光扫描选择测量波长,在波长对为λex/λem=273/307 nm时测定苯酚,苯酚的线性范围为0～1×10-4 mol/L,检出限为6.6×10-8 mol/L;在波长对为λex/λem=295/331 nm时测定对苯二酚, 对苯二酚的线性范围为0～1.5×10-5 mol/L,检出限为5.2×10-9 mol/L,回收率达到93.5%～103.5%.     

离子液体-氧化石墨烯修饰玻碳电极对苏丹红Ⅰ的测定

制备了离子液体-氧化石墨烯修饰玻碳电极,用电化学阻抗谱对修饰电极进行了表征,研究了苏丹红Ⅰ在该修饰电极上的电化学响应特性.结果表明:在pH7.0的B-R缓冲液中,苏丹红Ⅰ在0.66V出现了一个氧化峰,是受表面控制的不可逆电化学过程.在4.5×10-8～8.0×10-7 mol·L-1浓度范围内,苏丹红Ⅰ的差分脉冲伏安响应电流与其浓度呈现良好的线性关系,相关系数R=0.992,检出限为2.5×10-8 mol·L-1.应用该修饰电极对番茄酱中的苏丹红Ⅰ进行检测,效果良好,样品回收率为96.4％～100.8％.     

基于十二烷基苯磺酸钠增敏效应电化学方法检测苏丹红Ⅰ

采用线性扫描法、连续循环伏安法和计时库仑法研究了苏丹红Ⅰ在碳糊电极（CPE）上的电化学氧化过程,在痕量阴离子表面活性剂十二烷基苯磺酸钠（SDBS）存在下苏丹红Ⅰ的氧化峰电流得到最大增敏。苏丹红Ⅰ的浓度在2.0×10-7~ 1.5×10-5mol/L范围内,其氧化峰电流与浓度呈现出良好的线性关系。在开路条件下富集180 s后,苏丹红Ⅰ的检出限为6.0×10-8mol/L。该方法适用于辣椒制品及番茄酱等食品中苏丹红Ⅰ的测定