MicroRNA-143对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭和迁移的影响

目的探讨microRNA-143（miR-143）对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭、迁移和增殖的影响。方法在脂质体介导下将miR-143抑制剂（miR-143 inhibitors）转染入MCF-7细胞，以inhibitor negative control（inhibitor NC）作为阴性对照。通过MTS试剂盒检测细胞增殖能力，以Transwel 侵袭实验和迁移实验分别检测细胞侵袭能力和迁移能力。结果（1）miR-143 inhibitors组与inhibitor NC组间细胞增殖活性无明显差异（P＞0.05）；（2）Transwel 侵袭及迁移实验显示转染miR-143 inhibitors后，MCF-7细胞的侵袭及迁移能力均明显增强（P＜0.05）。结论 miR-143对人乳腺癌MCF-7细胞的侵袭及迁移能力存在负性调控作用，可能成为乳腺癌治疗的潜在靶点。     

黄芪甲苷对3，4苯并芘介导内皮祖细胞损伤的保护作用及机制

目的观察黄芪甲苷对3,4苯并芘（BaP）介导内皮祖细胞（EPCs）损伤的保护作用并探讨其机制。方法采用密度梯度离心法收集人脐血单个核细胞,贴壁培养法培养EPCs,消化收集第4代细胞,随机分为5组,正常对照组：不作任何处理;Bap组：予BaP,浓度为20μmol/L;3种浓度黄芪甲苷各组（先加入浓度分别为2、10、50μg/ml的黄芪甲苷,2h后再加入浓度为20μmol/L的Bap）。分别采用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞增殖能力,黏附能力测定实验检测细胞黏附能力,transwell小室检测细胞迁移能力。取各组细胞培养上清液检测其超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）含量,免疫荧光染色检测各组细胞活性氧（ROS）的表达。结果与正常对照组相比,BaP组细胞的增殖、黏附以及迁移能力均明显降低（均P＜0.01）,黄芪甲苷预保护可呈浓度依赖性地提高EPCs增殖、黏附及迁移能力（均P＜0.05）;BaP组培养上清液中MDA含量与正常对照组相比明显升高（P＜0.01）,SOD含量明显下降（P＜0.01）,ROS表达明显上升（P＜0.01）,不同浓度的黄芪甲苷可降低培养上清液中MDA含量（P＜0.05）,提高SOD含量（P＜0.05）,并且呈浓度依赖性地降低细胞ROS表达（P＜0.01）。结论黄芪甲苷对BaP介导的EPCs损伤具有保护作用,其机制可能与抑制氧化应激有关。     

miRNAs在甲状腺乳头状癌中的表达及临床病理意义

目的：探讨甲状腺乳头状癌（PTC）中特征性的miRNA表达谱以及临床病理意义。方法对52例PTC及7例良性甲状腺肿瘤手术切除标本采用基因芯片技术及RNA印迹杂交法检测miRNA的表达,对过表达的miRNA表达水平与PTC临床病理特征之间的关系进行分析。结果（1）用基因芯片技术筛检发现 PTC 组织中5例过表达的 miRNAs（miR-375、miR-34a、miR-146b、miR-222、miR-31）。（2）RNA印迹杂交法验证芯片结果及检测其他miRNAs结果显示：miR-34a、miR-146b、miR-31、miR-21和miR-221在PTC组织中的表达水平较癌旁正常甲状腺组织显著升高（P＜0.05）。MiR-146b和miR-221在PTC组织中的过表达率较良性甲状腺肿瘤组织显著升高（P＜0.01）。PTC患者中包膜侵犯组、淋巴结转移组、TNM分期III- IV期组及AGES系统评分≥5分组miR-221的表达水平均明显高于相应对照组（P＜0.05或0.01）;而男性PTC患者的miR-146b表达水平明显高于女性PTC患者（P＜0.05）。结论 miR-146b、miR-221、miR-21和miR-31的过表达与PTC的发生、发展有关;过表达的miR-221和miR-146b与PTC的预后不良有关。     

miR-130a和miR-125b在川崎病外周血细胞中的表达及意义

目的 通过检测miR-130a 和miR-125b 在伴或不伴冠脉扩张（CAD）川崎病（KD）患儿与正常健康儿童外周血单核细胞（PBMC）中的表达差异,探讨两者可否作为KD 和CAD诊断及预后评估的全新血清生物标志物。方法 利用基因芯片技术筛选出KD 患儿与正常健康儿童之前具有差异表达的miRNAs,通过生物信息学分析,确定候选基因。进一步选取KD 患儿30 例（伴或不伴CAD 各15 例）、正常健康儿童15 例,采用茎环RT-PCR 的方法,验证候选基因miR-130a 和miR-125b 在PBMC 中的表达情况。结果 （1）通过基因芯片技术,分析KD 患儿与正常健康儿童PBMC 中存在明显差异表达的miRNA 共63 条,经过生物信息学分析,确定候选基因;（2）通过茎环RT-PCR 验证发现miR-130a 和miR-125b 在患儿IVIG 治疗前表达明显下调,而IVIG治疗后表达明显上调（P＜0.05）;（3）伴CAD 的KD 患儿miR-130a 及miR-125b 表达较不伴CAD 明显升高,且呈正相关性（R2 =0.734,mir-130a;R2 =0.709,miR-125b）;（4）ROC 曲线分析表明miR-130a（特异度87.5%和敏感度77.5%）和miR-125b（特异度83.3%和敏感度76.6%）对KD 及CAD 的判断有较高的特异度和敏感度。结论 PBMC 中的miR-130a 和miR-125b 参与了KD的发生与发展,可作为KD 及CAD诊断及预后评估的一项全新血清生物标志物,并为KD冠脉扩张的防治提供新的思路。     

TFF1在肺癌中的表达及作用研究

目的 研究三叶因子1（TFF1）在肺癌组织及肺癌细胞株中的表达、甲基化状态及其功能。方法 选取98 例非小细胞肺癌患者手术切除的肺癌组织,采用RT-PCR、MSP 检测TFF1 在肺癌组织中的表达与甲基化状态,分析其与患者临床特点的相关性,以及检测肺癌细胞株H23、H1299、L78、H446、H157 及95D 中TFF1 的表达和甲基化状态以及5-aza-2''-deoxycytidine（DAC）处理后细胞株中TFF1 表达的变化。TFF1 转染H23 细胞株,MTT 法及克隆形成实验检测其增殖能力和克隆能力的变化,细胞凋亡实验及Western blot 检测凋亡相关蛋白Caspase3 表达水平。结果 TFF1 在肺癌组织中的甲基化率为56.1%（55/98）。TFF1 甲基化与肺癌患者的TNM 分期和淋巴结转移显著相关（P＜0.001）。TFF1 在H23 和H157 中无表达,在H1299、H446 及95D 中表达较低,在L78 中表达较高。DAC 处理后,细胞株TFF1 表达的变化分别为表达恢复（H23、H157）,表达增强（H1299,H446,95D）和无明显改变（L78）。恢复表达TFF1 后,H23 细胞株的增殖及克隆形成能力明显减弱（P＜0.05）,细胞凋亡率和凋亡相关蛋白Caspase3 活性片段的表达明显增加。结论 TFF1 在肺癌组织中的甲基化状态与肺癌的TNM 分期和转移密切相关。TFF1 在肺癌细胞中的表达受DNA 甲基化的调控。肺癌细胞株H23 中恢复表达TFF1 可以抑制其增殖和克隆能力,促进其凋亡。     

系统性红斑狼疮患者树突状细胞对Th1/Th2细胞分化的影响

目的探讨系统性红斑狼狼疮（SLE）患者树突状细胞对Th1/Th2细胞亚群分化的影响。方法淋巴细胞分离液分离获得SLE患者外周血单个核细胞,免疫磁珠阳性分选CD14细胞,联合应用rhGM- CSF、rhIL-4和rhTNF-α诱导分化树突状细胞成熟。在培养的第9天,流式细胞术检测表型,细胞增殖/毒性剂盒分析树突状细胞刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。ELISA法检测培养上清液中IL-12和IL-10的表达。诱导的成熟树突状细胞与健康对照组淋巴细胞共培养5d后,佛波酯+离子霉素+莫能霉素刺激培养4h,进行T淋巴细胞表面抗原及胞质内细胞因子染色,流式细胞仪检测Th1、Th2的比例。结果 SLE患者诱导培养的树突状细胞其CD1a的表达降低（P＜0.05）,HLA- DR、CD80、CD86的表达均明显升高（P＜0.05）。活动组与非活动组的树突状细胞HLA- DR、CD80、CD86的表达有统计学差异（P＜0.05）。SLE患者诱导培养的树突状细胞刺激同种异体淋巴细胞增殖能力增强（P＜0.05）。活动组与非活动组的树突状细胞刺激同种异体淋巴细胞也有所差异（P＜0.05）。SLE患者诱导培养的树突状细胞分泌IL-12的水平均明显降低（P＜0.05）;分泌IL-10的水平明显升高（P＜0.01）,活动组与非活动组的树突状细胞分泌IL-12和IL-10的水平差异无统计学意义（P＞0.05）。活动组的树突状细胞与对照组淋巴细胞共培养后Th1的比例明显降低（P＜0.01）,Th2的比例差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 SLE患者诱导的树突状细胞表型增加,刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力增强,分泌IL-12降低,IL-10升高。SLE患者树突状细胞功能的异常可能导致了Th1细胞分化不足,在SLE发生、发展过程中起重要作用。     

高糖对小鼠足细胞向间充质细胞 转分化的影响

目的 通过观察高糖环境下小鼠足细胞表达NEPH1、desmin、TGF-β1 和Smad7 的变化,探讨高糖损伤足细胞 的机制。方法 将培养成熟的小鼠足细胞用RandA 1.0 软件完全随机分为高糖1、2、3 组（葡萄糖浓度分别为15、25 和30mmol/L）和对照组（葡萄糖浓度5mmol/L）,倒置显微镜下观察高糖干预前后足细胞的形态变化,采用RT-PCR 和Western blot技术分别检测足细胞NEPH1、desmin、TGF-β1 和Smad7 的mRNA 和蛋白表达变化。结果 与对照组相比,高糖环境下培养48h 后,足细胞形态发生不同程度变化。NEPH1 和Smad7 的mRNA 表达较对照组显著减少（P＜0.05 或0.01）,desmin 和TGF-β1的mRNA 表达较对照组增加（P＜0.05 或0.01）。其中高糖2 组的NEPH1 和Smad7 的蛋白表达较对照组显著减少（均P＜0.01）,而desmin 和TGF-β1的蛋白表达较对照组显著增加（P＜0.01）。小鼠足细胞在高糖培养下NEPH1 mRNA 和desmin mRNA 的表达呈显著负相关（r=-0.993,P＜0.01）;NEPH1 mRNA 和TGF-β1 mRNA 的表达呈显著负相关（r=-0.989,P＜0.01）;TGF-β1 mRNA 的表达和Smad7 mRNA 的表达呈显著负相关（r=-0.996,P＜0.01）。结论 高糖可能通过激活TGF-β/Smad信号通路诱导小鼠足细胞发生表型转化。     

大黄素联合5AzA-cdR对胰腺癌抑癌基因p16、RASSF1A去甲基化作用研究

目的研究大黄素是否可增强5AzA-cdR对胰腺癌Panc1细胞抑癌基因p16、RASSF1A的去甲基化作用。方法采用细胞增殖实验检测不同浓度大黄素对Panc1细胞的生长抑制情况，焦磷酸盐测序PCR（BSP）分别检测大黄素、5AzA-cdR及大黄素联合5AzA-cdR对Panc1细胞抑癌基因p16、RASSF1A甲基化状态的影响，并用荧光定量PCR（FQ-PCR）和Westernblot分别检测p16、RASSF1A及甲基转移酶DNMT1、DNMT3a在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果大黄素以时间和浓度梯度依赖性抑制Panc1细胞生长。BSP结果显示大黄素具有微弱的去甲基化作用，5AzA-cdR具有一定程度的去甲基化作用，当两者联用时，去甲基化作用更加显著；FQ-PCR和Westernblot结果显示大黄素与5AzA-cdR联用时，p16、RASSF1A的表达水平均较空白对照明显增高（均P＜0.05），DNMT1、DNMT3a的表达水平均较空白对照明显降低（均P＜0.05）。结论大黄素与5AzA-cdR联用可通过降低DNMT1和DNMT3a的表达水平来增强5AzA-cdR对胰腺癌抑癌基因p16、RASSF1A的去甲基化作用。     

一道冬令营赛题的加强

第九届数学冬令营（1994年中国数学奥林匹克）第一题为：设ASCD是一个梯形（AB／／CD），E是线段AB上一点，F是线段CD上一点，线段CE与BF相交于点H，线段ED与AF相交于G．求证：S。C4S。。n（1）文「l」指出，不等式（l）中等号不能成立，即结论修正为"S＿＜十S＿"．考虑它的加强，我们得到：在原题条件下，若设AB-a，W一b（a士b），则有牛刀Sin（2）由于a学b，显然有7尸而＜十，所以（2）式加强了（l）式．为证明（2），先引人引理设0＜人、P＜l，对任意的a、bER"，均有F（人，p）＝7华二十7让二月共二公七当且仅当人一月时…     

Tregs细胞CCR4、CCR6表达异常在类风湿关节炎患者发病时的意义

目的探讨Tregs细胞CCR4、CCR6受体在类风湿关节炎（RA）患者发病时的意义。方法选择45例活动期RA患者（RA组）及30例健康体检者（对照组），从外周血分离单个核细胞（PBMC），采用流式细胞分析法检测RA患者外周血中CD4+Foxp3+细胞（Tregs）占比及其该类细胞上CCR4、CCR6的表达水平，并对Tregs上CCR4、CCR6水平与RA临床活动指标进行相关性分析。结果与对照组比较，RA活动期患者外周血Tregs细胞数量明显减少，差异有统计学意义（P＜0.05）；RA活动期患者外周血Tregs细胞表面趋化因子受体CCR4、CCR6表达水平与对照组的差异有统计学意义（P＜0.05）；RA活动期患者外周血Tregs细胞CCR4、CCR6表达水平与DAS28评分呈正相关（P＜0.05）。结论 RA患者外周血中Tregs细胞上趋化因子受体CCR4、CCR6表达增加，可能是Tregs细胞获得定向迁徙至病变关节能力的表现，也是机体炎症反应时反馈性调节的一种现象。     

Characterization of types of asymptotic discernibility of families of hypotheses

We give a characterization of the types of asymptotic discernibility of families of hypotheses in the case of hypothetical measures that are not, in general, mutually absolutely continuous. The case when the logarithm of the likelihood ratio admits an asymptotic expansion of the type of an expansion with local asymptotic normality is examined in detail. Examples are studied.Translated fromTeoriya Sluchainykh Protsessov, Vol. 15, pp. 64–71, 1987.     

Study of the blow-up of solutions of systems of equations of hydrodynamic type

Mathematical Notes - We study the initial boundary-value problem for three-dimensional systems of equations of pseudoparabolic type. The system is similar to the Oskolkov system, but differs from...     

Distribution of types of symmetry of tensors of high degree

The asymptotic distribution of tensors of degree N in symmetry types is studied in this paper.Translated from Zapiski Nauchnykh Seminarov Leningradskogo Otdeleniya Matematicheskogo Instituta im. V. A. Steklova AN SSSR, Vol. 155, pp. 181–186, 1986.     

Singularities of Solutions of One Class of Equations of Continuum Mechanics

We analyze one class of families of integral equations and describe the dependence of the singularities of solutions of integral equations on the dimensions of the families of kernels of equations. On the basis of these results, we propose procedures for the construction of approximate solutions for a small parameter.     

Determination of asymptotic solutions of problems of nonlinear theories of thermoviscoelasticity

It is shown that the asymptotic solution of a problem of the nonlinear theory of thermoviscoelasticity, if it exists, can be found directly from the solution of the asymptotic boundary-value problem without completely solving the starting problem.M. V. Lomonosov Moscow State University. Translated from Mekhanika Polimerov, No. 3, pp. 395–400, May–June, 1976.     

Emptiness of set of points of lower semicontinuity of Lyapunov exponents

We consider parametric families of differential systems with coefficients that are bounded and continuous on the half-line and uniformly in time continuously depend on a real parameter. For each Lyapunov exponent, we construct a family such that the Lyapunov exponent of its systems treated as a function of the parameter is not a lower semicontinuous function for any value of the parameter.