在脂肪酸-水流动相中小分子在反相高效液相色谱中的保留表征

在反相液相色谱(RPLC)中用Snyder经验议程和计量置换保留模型(SDM-R)中的参数对深质为脂肪醇同系物,流动相为脂肪酸同系物时深质的保留行为进行了研究,结果表明用SDM-R参数具有明显的优越性,另外,由于用Snyder经验公式中二参数之间的作园无法准确求得斜率,且其不具有明确的物理意义,而由SDM-R二参数作图,不但能准确求得斜率j(与1mol溶剂和固相结合能有关的常数),而且j具有明确的物理意义并符合碳数规律,所以,参数j有可能用于RPLC中表征深剂强度,由此得出,在RPLC中,对同一置换剂面言,随同系物溶质的Z(1mol深剂化深质被深剂化固定相吸附时,从二接解面释放出的置换剂分子数)和logI(与1mol深质和固定相亲和势有关的常数)值增大,它们的保留时间也增大,对同一深质而言,随着在同系物置换剂中碳链的增长,Z和logI值的减小,它的保留时间也缩短,同时还可得出,随着同系物置换剂j值的减小,它们的洗脱能力也增强.     

反相液相色谱中溶质保留参数间的定量关系研究

 比较了Snyder经验公式中的K0w 与S和溶质计量置换保留模型 (SDM R)中溶质保留参数Z(1mol溶剂化溶质被溶剂化固定相吸附时 ,在其接触表面处释放出溶剂或置换剂的总摩尔数 )与lgI(与 1mol溶质对固定相的亲和势有关的常数 )之间的定量关系。SDM R中的两个参数间不仅对同系物溶质可以有很好的线性关系 ,而且对非同系物溶质也有很好的线性关系。其线性关系的好坏主要取决于这两个参数数值范围的大小 ,与文献中报告的线性关系取决于是否单因素影响溶质的保留和完全由统计学规律决定的结论不同。     

醋酸水流动相体系中硅胶键合相上生物大分子保留行为的研究

 提出了以醋酸 水作为流动相的体系中 ,在ODS柱上分离生物大分子的反相高效液相色谱 (RPLC)方法。实验结果表明 ,醋酸 水的洗脱能力强于甲醇 水 三氟醋酸体系 ,在一定程度上克服了色谱分离中一些蛋白质的不可逆吸附且具有便于冷冻干燥的优点。用参数Z(1mol溶剂化溶质被溶剂化固定相吸附时从两者接触表面释放出置换剂的摩尔总数 ) ,logI(与 1mol溶质对固定相亲和势有关的常数 )和 j(与 1mol溶剂对固定相亲和势有关的常数 )对 9种蛋白质在此流动相体系中的保留进行了表征。     

反相液相色谱中柱相比的影响因素

从理论上阐明了热力学观点所定义的柱相比（即溶质的保留自由能变为零时的κ′值）与溶质种类、柱温、固定相以及溶剂种类的依赖关系。通过研究3种配基链长不同的固定相对7种非极性苯的取代物溶质保留行为的影响，发现柱相比与固定相对溶质吸附力有关；通过对9种正链烷溶质在4种温度下的保留行为的研究，发现了柱相比随温度升高而增大，也发现了柱相比与同系物溶质的碳数无关；通过对3种正链醇同系物，3种正链酸同系物，以及丙酮、乙腈和异丙醇共9种置换剂对9种烷基醇同系物溶质色谱保留行为影响的研究，发现柱相比随溶剂极性增大而减小。     

计量置换参数Z值分量的测定(英文)

 以计量置换吸附理论(SDT A)为基础,从理论上推导出计量吸附模型中表征溶质对固定相亲合势大小的参数βa值与流动相中强置换剂浓度的对数呈线性关系。计量置换模型中的参数n和q(n和q分别代表1摩尔溶剂化溶质被吸附时,从吸附剂表面和从溶质分子表面所释放出的溶剂的物质的量)是计量置换参数Z值的分量,是两个非常有用的参数,可以从这个定量关系中直接获得。推导出的方程用苯的衍生物进行了实验验证,获得了较满意的结果。将这种方法计算得到的分量值与SDT A与计量置换保留模型(SDT R)相结合的方法得到的分量值进行了比较。     

反相液相中lgI对极性小分子溶质行为的表征

 以极性溶质正链醇同系物及芳香醇同系物的实验数据对反相液相中计量置换表征参数lgI进行了多方面验证 ,并将lgI值与溶质的其他物理化学参数做了比较 ,证明了lgI在限定条件下分别可作为溶质的种类和大小、流动相中置换剂、所选用固定相特性及有关溶质分离选择性大小的表征参数 ,也证明了极性溶质体系的lgI亦具有热力学平衡常数的性质。     

用芳香醇同系物研究疏水色谱的保留机理

首次研究了芳香醇同系物在疏水色谱（HIC）中的保留行为。同系物的保留符合同系物规律。随绝对温度倒数的增加，保留值先增大而后减小，符合Van‘t Hoff曲线方程。用计量置换保留模型中的参数表征了同系物分子的性质，揭示了HIC中小分子的保留在本质上与反相色谱相同，均由非选择性疏水作用力所控制。证明了用中性小分子作为溶质研究HIC保留机理是一个新方法，为研究生物大分子在疏水色谱中的保留机理奠定了基础。     

反相高效液相色谱中溶质保留过程的热力学研究 Ⅱ. 焓变及其分量, 吸附及解吸附焓变

依据液相色谱中溶质计量置换保留模型, 从理论上分别推导出了在反相高效液相色谱(RP-HPLC)中lgI(与1mol溶质对固定相的亲合势有关的常数)和Z(对应于1mol溶质被固定相吸附时释放出置换剂的摩尔数)对绝对温度导数的线性关系式。发现非极性与极性小分子溶质的lgI和Z均具有热力学衡常数的特征。如在前报[1]报告的吉布斯自由能变一样, 也推导出了可将溶质保留过程中的总吸附焓变△H(Pa)分成两个独立的分量, 吸附焓变△(1,a)和解吸附焓变△H(Z,D)的表达式。可同时对在流动相中不同置换剂浓度条件下的△H(Pa)和△(Z,D)进行估算,并与实验值进行了比较, 偏差小于±10%。并用△H(1,a)和△H(Z,D)值对溶质在RP-HPLC的保留过程中热变化进行了解释。     

反相液相色谱中同系物保留过程中的等焓点

依据液相色谱中溶质计量置换保留模型,从理论上分别推导了出在反相高效订色谱（ＲＰＬＣ）中同系物端基和重复结构单元对Ｚ（１ｍｏｌ溶剂化溶质被固定相吸附时,在其接触表面释放出溶剂的摩尔总数）与绝对温度倒数间的线性关系式。也从分子结构参数推荐导出了同系物端基对总变的贡献△Ｈ,和同系物非端基（或键长）对总焓变的贡献△ＨｓＮｃ的表达式。从而建立了等焓点的坐标方程,阐明了等点的纵坐标相是溶质在等点处的变为零,等     

反相液相色谱中同系物收敛的热力学表征

以液相色谱中的溶质计量置换保留模型(SDM-R)为理论基础,从热力学角度进一步对反相液相色谱中同系物的收敛性进行了研究。建立了溶质平均收敛点坐标的计算方程,并从自由能变的角度表征了收敛点坐标的物理意义,阐明了收敛点的纵坐标相等的原因是溶质在收敛点处的自由能变为零。浓度收敛点的横坐标是1mol纯溶剂的解吸附自由能;而碳数收敛点的横坐标为当流动相中有机溶剂的浓度为纯有机溶剂浓度的十分之一时的同系物端基的保留自由能的负值。并以实验数据对该方程进行了验证,两者符合程度甚佳。     

液相色谱中的一个新的表征参数Z——V.反相液相色谱中Z和S间的非平行关系

对反相液相色谱中溶质计量置换保留模型(SDM-R)中的计量参数Z与常用经验公式中的线性参数S间的相同及不同性进行了比较性研究.从理论上指出了S和Z间的非平行关系.根据Z的物理意义可以在某些限定条件下用S对溶质分子结构性质、溶剂强度等进行表征.但是,用文献中实验数据验证结果表明,它不如用Z值表征的准确度高.这进一步证实了SDME-R和在反相液相色谱中用Z值为一个新的表征参数的可靠性.     

Characterization of retentivity of reversed phase liquid chromatography columns

There are dozens of commercially available reversed phase columns, most marketed as C-8 or C-18 materials, but with no useful way of classifying their retentivity. A useful way of ranking these columns in terms of column "strength" or retentivity is presented. The method utilizes a value for ln k'(w), the estimated retention of a solute from a mobile phase of 100% water, and the slope of the plot of ln k' vsE(T)(30), the solvent polarity. The method is validated with 26 solutes varying in ln k'(w) from about 2 to over 20, on 14 different reversed phase columns. In agreement with previous work, it is found that the phase volume ratio of the column is the most important parameter in determining retentivity. It is strongly suggested that manufacturers adopt a uniform method of calculating this value and that it be made available in advertising, rather than the uninterpretable "% carbon".     

反相液相色谱中计量置换线性参数logI的热力学特征

 依据液相色谱中溶质计量置换保留模型及线性参数logI(与1mol溶质对固定相的亲和势大小有关的常数),通过作图得知非极性和极性小分子溶质及生物大分子的logI与绝对温度的倒数1/T,以及小分子溶质的logI与其在正辛醇-水中分配系数的对数logPo/w呈线性关系,从两方面进一步证明了logI具有热力学平衡常数的性质。基于小分子溶质、生物大分子的logI和分配系数大小的差别,对两者在反相液相色谱中的保留对柱长的依赖关系给予了定量的说明。     

反相液相色谱中生物大分子保留自由能及相比的测定

依据液相色谱中溶质的计量置换保留模型（SDM-R）和反相液相色谱（RPLC） 中小分子溶质柱相比的热力学新定义,建立了准确测定生物大分子柱相比的理论模 型和实验方法,准确测定了生物大分子的柱相比。同时依据计量置换参数logI和Z 具有热力学平衡常数的性质,并以logI和对1/T作图呈线性为途径,解决了生物大 分子色谱热力学研究中存在的三个难题,准确测定了七种标准蛋白质在RPLC保留过 程中的自由能变,并发现在RPLC中柱相比对保留过程中溶质总自由能变的贡献值几 乎可与溶质在RPLC保留过程中的净自由能变相当。     

A chemometric investigation of the selectivity of multisolvent mobile phase systems in RP-HPLC

Summary The selectivity of multisolvent mobile phase systems consisting of water, methanol, acetonitrile and tetrahydrofuran was studied when the solvent strength decreases at a constant ratio of the modifiers. From the retention measurements of six benzene derivatives on an octylsilica column at eleven different mobile phase compositions the relation between the logarithm of the capacity factor of each solute and the mobile phase composition was modeled by a quadratic equation. From the models the capacity factors of the solutes were predicted for 3 binary, 3 ternary and 7 quaternary mobile phase systems when the fraction of water decreases and the ratio of the organic modifiers is kept constant for the tenary and quaternary solvent systems. The selectivity factors, alpha, of five pairs of solutes were calculated from the capacity factors and plotted against the solvent strength of the mobile phase systems. The selectivity remained not constant, but varied with the solvent strength: if the water fraction of a multi-solvent system is changed at a constant ratio of the modifiers, not only the solvent strength, but also the selectivity changes. The consequence of this result for optimization strategies is discussed.     

Effect of the organic modifier concentration on the retention in reversed-phase liquid chromatography II. Tests using various simplified models

Ten simplified expressions for the retention factor, k', that arise from either the adsorption or partition mechanism for retention in reversed-phase chromatographic columns are examined in what concerns the model they express and their performance to fit experimental data. In order to test the simplified expressions, which describe the variation of the retention of a solute with the organic modifier content in the mobile phase, a wide range of solutes in mobile phases modified with three different organic modifiers was used. It is shown that a new three-parameter expression of ln k' works more satisfactorily, since it combines simplicity, high applicability and good numerical behavior. It is also shown that the applicability of a simplified equation does not entail the validity of its model and thus no molecular information can be gained from its use.     

液相色谱中的一个新的表征参数Z——Ⅰ.反相液相色谱中非极性小分子溶质分离体系

文中首次提出了液相色谱中溶质计量置换保留模型中的计量参数Z可作为液相色谱的一个新的表征参数。Z值除了可作为溶质构象表征参数外,在限定条件下,亦可分别作为溶质种类、大小和空间效应、流动相中置换剂和所用固定相特性及有关溶质分离选择性大小的表征参数。本法以非极性小分子苯的取代物为例对此进行了说明。     

Retention prediction in ternary solvent reversed-phase liquid chromatography systems based on the variation of retention with binary mobile phase composition

An extension of the treatment adopted in a recent paper [P. Nikitas, A. Pappa-Louisi, P. Agrafiotou, J. Chromatogr. A 946 (2002) 33] was used to derive expressions describing the variation of solute retention k with composition in ternary reversed phase liquid chromatography, RP-LC, solvent systems. The equation of the partition model obtained in this way for a ternary mobile phase was identical to that previously derived using the solubility parameter concept. This equation as well as two new expressions of In k versus organic modifiers content were tested in a variety of ternary solvent systems in order to examine the possibility of predicting retention behavior of solutes under ternary solvent mixture elution conditions from known retention characteristics in binary mobile phases. It was demonstrated the superiority of both new equations derived in this paper to that previously proposed and applied to date in ternary solvent mixtures.