合浦珠母贝(Pinctada martensii,Dunker)珍珠囊体外预培育的初步研究

０．３％胰蛋白酶液（２５℃）消化外套膜组织的第５～１５ｍｉｎ时间段所收获的细胞产物中，表皮细胞具有最高的纯度和贴壁活性；细胞悬液的体外短期培养过程中小牛血清和珠母贝组织提取物对于细胞在体外的生长和在珠核表面的贴附具有促进作用．     

银鲳脾脏和肾脏组织细胞体外培养研究

为探究银鲳脾脏和肾脏组织细胞体外培养条件, 本研究采用组织块培养法对银鲳脾脏和肾脏组织进行原代培养. 实验选用DMEM/F-12、M199和DMEM等作为基础培养基, 在其中分别添加体积分数为10％、15％、20％的胎牛血清, 并添加青链霉素及庆大霉素以防细菌污染. 结果表明: 银鲳脾脏和肾脏组织在胎牛血清体积分数为20％的DMEM/F-12培养基中贴壁最好, 迁出细胞的种类最多, 细胞生长速度最快. 其中脾脏组织共迁出6种不同的细胞, 分别为: 免疫细胞、基质细胞、上皮样细胞、成纤维样细胞、造血灶和未知细胞; 肾脏组织共迁出3种细胞, 分别为: 上皮样细胞、巨噬细胞和成纤维样细胞.     

荚膜红假单胞菌的自然选育及培养特性

从高产对虾塘底泥中分离到一株细胞产量较高的荚膜红假单胞菌（Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｃａｐｓｕｌａｔａ）茵株Ｊ３２５,光照厌氧培养生长,实验表明：Ｊ３２５菌株生长的最适温度为２７．５—３０℃,最适ｐＨ值为６．５—７．５,最适浓度为２．５％～５．０％．光照强度为２０００—５０００ｌｘ,培养基中添加０．２５％－０．３５％酵母提取物能明显地促进细胞生长．     

光敏感核不育水稻愈伤组织的超低温保存和冻后再生植株的形成

研究了光敏感核不育水稻的悬浮细胞及愈伤组织的低温贮藏方法．实验采用１０％ＤＭＳＯ＋０．５ｍｏｌ·Ｌ－１山梨醇作冰冻保护剂，降温速率采用１．０℃·ｍｉｎ－１或０．５℃·ｍｉｎ－１，ＴＴＣ法测试的细胞存活率最高可达８５．９％，冻后材料经１５ｄ左右即可在暗培养条件下观察恢复生长的情况．３０ｄ后把长势良好的愈伤组织块转移至分化培养基中，来源于悬浮细胞团的绿苗分化率为１０．０％，愈伤组织的则为６６．６％．     

毛脚鵟气管源细胞分离及体外培养

研究了毛脚鵟气管源细胞的体外培养,分析了培养液、血清、胰岛素、肌苷等一系列因素对细胞生长增殖的影响。采用组织块贴壁法成功培养了毛脚鵟气管源细胞,用四种不同的基础培养液(DMEM(高糖)、DMEM/F12、M199、MEM alpha)对细胞进行培养,结果显示DMEM/F12对毛脚鵟气管源细胞的培养效果最好。毛脚鵟气管源细胞不具血清依赖性,10%血清的培养基中培养为宜。添加一定浓度的胰岛素、肌苷均能促进细胞的生长。     

环境因子对二型态银耳节孢子形态转换的影响

研究了氮源、碳源、碳氮比、pH值、温度、培养时间和香灰菌胞外液7种环境因子对银耳节孢子酵母型细胞向菌丝型细胞形态转换的影响．结果表明：7种环境因子对银耳节孢子形态转换均有一定的影响，其中经过滤除菌的香灰菌胞外液在液体培养基中的影响最大，菌丝型细胞占节孢子总数的9．89％；碳氮比总体水平上对形态转换影响较小，不同碳氮比条件下的菌丝型比率均小于2．40％；固体培养时pH3条件对形态转换的影响最小，菌丝型比率为0．04％．此外，各环境因子对节孢子形态转换的影响因固体和液体培养环境的不同而呈现一定差别．     

羧甲基茯苓多糖上调HBV转基因小鼠树突状细胞功能

采用1％羧甲基茯苓多糖（CMP）腹腔注射，摘取乙型肝炎病毒（HBV）转基因小鼠脾脏，制备淋巴细胞，MTT（噻唑蓝粉剂）法观察CMP对淋巴细胞的毒性作用；经粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和白细胞介素-4（IL-4）培养转基因小鼠脾脏来源树突状细胞（DC），ELISA法检测DC分泌IL-12以及刺激混合淋巴细胞反应T淋巴细胞分泌IL-10、IFN-γ的含量．CMP在0～500mg／L浓度对HBV转基因小鼠无毒性作用，并能显著促进HBV转基因小鼠DC分泌IL-12，在混合淋巴细胞反应中，能显著促进T淋巴细胞分泌IFN—γ并抑制IL-10的分泌，从而上调DC功能．     

葡萄球菌肠毒素B基因原核表达系统的构建及其表达产物促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用的研究

构建葡萄球菌肠毒素B（staphylococcal enterotoxins B,SEB）基因原核表达系统,了解重组表达产物rSEB促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长的作用．采用高保真PCR从金黄色葡萄球菌FRIS6B株DNA中扩增全长SEB基因片段,T—A克隆后测序,构建SEB基因原核表达系统pET32α-SEB—E．coliBL2IDE3．采用SDS-PAGE检测rSEB表达产量,Ni—NTA亲和层析法提纯rSEB．采用TCID50法测定rSEB对Vero细胞的细胞毒性作用并计算TCID50值．采用MTT比色法分别检测不同浓度rSEB体外对小鼠脾细胞、人外周血单个核细胞（PBMC）的促增殖作用以及对HepG2细胞（人肝腺癌细胞）、HeLa细胞（人宫颈癌上皮细胞）的生长抑制作用．与公布的相关序列比较,所克隆的SEB基因核苷酸序列相似性为100％．rSEB表达量约为细菌总蛋白的40％．rSEB对Vero细胞的TCIC50为3．02μg．5．0～20．0μg／ml的rSEB对小鼠脾细胞和人PBMC均有明显的促增殖作用（P〈0．05）．5．0～20．0μg／ml rSEB作用的人PBMC上清均能有效地抑制HepG2细胞和HeLa细胞生长（P〈0．05）．本研究成功地构建了rSEB高效原核表达系统．rSEB仍然具有生物学活性．所建立的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用的检测方法,为以后减毒rSEB突变体的筛选奠定了基础．     

象山港毛蚶的种群生物学及其繁殖保护措施

象山港毛蚶群体组成以２龄贝为主，占６６．１０％。体重与壳长之间关系为Ｗ＝１０－４×１．１．１７５Ｌ．其生长规律可用Ｌｏｇｉｔｉｃ自然生长方程Ｌ１＝３９．２７３９／１（１＋（为月份）描述。壳长生长曲线的拐点为３０月龄，体重生长曲线的拐点为６６月龄，合理采捕时间应在生长转折点以后，主要采捕２８～３４ｍｍ大规格的４龄贝，黄墩港和铁港两支港毛蚶的资源实际结算量为９２９．２５ｔ，理论估算量为９２４．７８ｔ，合理捕捞量估算为２７０～３７０ｔ采捕季节规定为１２月至翌年３月为宜。     

新疆家蚕抗菌肽(Cecropin-XJ)在Pichia pastoris中的表达

研究目的是在Pichia pastoris真核表达系统中分泌表达新疆家蚕抗菌肽(cecropin-XJ)．将pMDl8-T-cecropin-XJ上的抗菌肽基因cecropin-XJ亚克隆至穿梭质粒pGAPZaA上．用AvrII酶切使之线性化后．采用LiCl法转化Pichia pastoris SMDll68,转化子经小瓶发酵,结果表明重组cecropin-XJ可以在α因子的引导下，分泌到培养基中，表达产物的分子量在14．4KDa～20．1KDa与31．0KDa～43．0KDa之间，各有一条特异性的条带，且表达产物有明显的抑菌活性和热稳定性．这一发现为抗菌肽在农业、医疗卫生、畜牧业等方面的应用奠定基础，同时为深入研究抗菌肽作用机制提供了依据．     

三角帆蚌钩介幼虫体外培养及变态稚贝的形态变化

以超纯水为对照,利用普通温控培养箱,在(24.0±1.0)℃条件下对三角帆蚌钩介幼虫进行了15d的体外培养实验.结果显示:钩介幼虫排出体外24h内存活率显著下降为50.7%(p=0.006);A组(MEM高糖)、B组(RPMI1640)、C组(MEM 199)幼虫变态率分别为(7.5±3.9)%、(13.3±12.0)%、(42.1±10.0)%;D组(L-15)的幼虫变态率最高,为(66.1±3.8)%,极显著高于C组(p=0.007).相关分析表明,培养液中葡萄糖含量与钩介幼虫变态率存在显著负相关(r=-0.886).利用光镜和扫描电镜对体外培养变态发育的稚贝形态观察发现:稚贝双壳表面圆形凹陷数量和深度比幼虫显著减少,双壳边缘外套膜增厚,在外套膜、斧足表面分布有大量乳状突起,但形态不同.体外培养稚贝的外部形态和内部器官均发生了显著改变,完成了变态发育过程.     

池蝶蚌外套膜的组织学观察

运用组织学方法对池蝶蚌不同部位外套膜进行了研究。结果表明,池蝶蚌外套膜由边缘膜和中央膜组成,边缘膜包括3个突起,分别是生壳突起,感觉突起和缘膜突起。不同部位外套膜的组织结构基本相同,由外表皮、内表皮和结缔组织组成。内表皮细胞间分布有3种类型的分泌细胞,分别是嗜碱     

东海陆架区沉积物中铁、锰、硫化物、有机质和细菌间关系的探讨

本文从生物地球化学观点出发,详细讨论了东海陆架区沉积物和间隙水中铁、锰、硫化物、有机质和细菌间的关系。研究表明:在细菌媒介下,沉积物中铁、锰和水体中硫酸根都参与了沉积物中某些有机物的降解反应;弧菌(Vibrionaceae)和棒状形菌(Coryneforms)可能是水体中硫酸根参与降解有机物反应时的主要媒介物;弧菌和假单孢杆菌(Pseudomonas)可能是Fe~(3+)还原时的主要媒介物;而传代中死亡细菌和G~-杆菌则可能是Mn~(4+)还原时主要媒介物。笔者提出东海陆架区沉积物中硫酸根(SO_4~(2-))是降解有机物的主要电子接收者。     

马氏珠母贝遗传多样性的RAPD分析

采用 OPM组 2 0个碱基随机引物对海南三亚 (SY) ,海南洋浦港 (YP) ,广西涠洲岛 (WZ)的 3个天然群体和广东雷州人工养殖群体 (L Z)的马氏珠母贝进行了 RAPD分析 .其群体内的平均遗传相似度 (similarity,S)分别是 0 .5 86 6 ,0 .6 5 14,0 .6 6 6 6 ,0 .715 8,由低到高依次为 SYYP>WZ>L Z.结果表示 :天然群体的遗传多样性大于养殖群体的遗传多样性 .     

胶态分散凝胶深度调剖技术在大庆油田聚驱开发中的应用

介绍了大庆油田应用胶态分散凝胶深度调剖技术的凝胶成胶机理、影响成胶的因素、凝胶在多孔介质中的渗流特征及现场试验效果，室内岩芯模拟研究及现场典型井试验表明，流动凝胶在多孔介质中可流动，在单井注入15000－20000m^3流动凝胶体系过程中，注入压力逐渐升高，可以实现深度调剖，更好地提高聚合物驱采收率。     

3种不同规格虎斑乌贼苗种的摄食、生长及存活的比较

为探究苗种规格对虎斑乌贼(Sepia pharaonis)养殖效果的影响, 进行了放养3种不同规格乌贼苗种(胴长分别为(4.09±0.15)、(5.25±0.48)和(6.16±0.19)cm)的养殖实验. 结果表明 不同规格乌贼苗种的摄食量均波动上升, 饵料系数随养殖时间逐渐降低, 由8.00±1.01降至3.74±0.35. 乌贼苗种的特定生长率先增加, 在胴长左右时达到峰值, 后减少并稳定至4%左右. 3种规格乌贼苗种养殖30d后的存活率分别为(88.50±0.88)%、(92.00±0.60)%、(93.83±0.34)%. 大规格乌贼苗种的日均增重量、存活率显著(P<0.05)高于小规格乌贼苗种. 综上所述, 在虎斑乌贼养殖中苗种放养规格以胴长左右为宜.     

酿酒酵母产抱最佳条件的研究

本文通过对耐高温酿酒酵母((S. cerevisiae ) HU - TY -1产抱条件的研究.在菌龄, pH值、培养基组成，Zn2+浓度及微量元素几个方面进行了实验。结果表明，HU-TY-1先在含2写葡萄糖,25}g/ml Zn'+的预产抱培养基上培养，于稳定期前期转入含125}g/ml Zn`+ ,1 j0KAc,0.2500酵母抽提物，0. 1写葡萄糖，0. 1写KH}PO‘的产袍培养基上，可获得高的产抱率(45. 92写).另外、在产抱培养基中加入丁二酸等不被细胞代谢的物质作为纷冲剂，加入生物素，肌醇等维生素可大大提高菌株HU-TY--1产3---4抱(3-4抱即一个子囊中有3个或4个抱子)的能力.     

丁酸钠预培养对水稻花药绿苗形成的影响

对水稻花药进行了丁酸钠预培养的试验,结果表明:2mM丁酸钠24小时的预处理,可以促进小孢子的均等分裂,增加多核花粉的比例,并影响愈伤组织诱导率和愈伤组织的分化绿苗潜力,对愈伤组织分化绿苗的促进作用尤其显著。丁酸钠对愈伤组织诱导的作用,与介质的pH的值有关,pH7.0的培养基的诱导率低于pH5.8,但对分化有利。 文章讨论了丁酸钠促进愈防组织分化的可能原因,以及丁酸钠影响愈伤组织诱导和促进分化之间关系。     

麻黄组织培养及诱导枝条生根条件初探

本文包括两方面的工作，一是麻黄组织培养，由愈伤组织诱生不定芽；二是诱导自然生长的麻黄枝条段生根，在第一部分工作中，木贼麻黄(Ephedra equisatina Bge)无菌苗子叶切段在M4(MS 2．4-D1．5mg／L KT0．5mg／L)上脱分化效果好，愈伤组织白色透明，生长快，在第二部分工作中。选用中麻黄(Ephedra，intermedia)自然生长的枝条段为材，经过多种处理发现，以20ppmNAA溶液浸泡枝条6h。扦插入粗沙中对生根有利．埋入沙中的结节处膨大。呈浅黄色，同时，灭菌麻黄枝条段在Ⅱ号培养基(1／2MS KT0．1mg／L NAA3．0mg／L)中生长良好，末端膨大，接触培养基的枝条韧皮部产生较多的愈伤组织。