基于噬菌体展示抗体的电化学发光免疫传感器检测相思子毒素研究

以多克隆抗体包被磁性微球制备捕获探针,以表面负载大量三联吡啶钌标记物的噬菌体展示抗体为发光探针有效放大信号,成功建立了相思子毒素电化学发光免疫传感检测方法。利用本方法检测相思子毒素,浓度在0.005～100μg/L范围内与电化学发光强度呈良好的对数线性关系,拟合方程为lgY=0.701lgX+1.767(R=0.9964,N=7,p<0.0001),检测限达0.005μg/L(S/N=3)。与采用单克隆抗体制备标记探针相比,检测灵敏度提高20倍,可用于相思子毒素的痕量检测。     

非标记型p53抑癌基因电化学DNA生物传感器的研究

基于发夹型核酸探针的高特异性识别能力以及电活性物质与DNA磷酸骨架间的静电作用,以发夹型核酸作为分子识别探针,电活性物质六氨合钌(RuHex)作为杂交指示剂,构建了一种非标记型检测p53抑癌基因的电化学DNA生物传感器.实验结果表明,在10 μmol/L RuHex溶液中,该传感器对目标DNA具有灵敏的电化学响应,电化...     

基于适配体识别的凝血酶均相电化学发光检测方法(英文)

本文以钌联吡啶络合物标记的凝血酶适配体为电化学发光探针,建立了均相电化学发光测定凝血酶的新方法。实验发现待测物凝血酶的存在,使金电极上电化学发光探针的电化学发光强度急剧降低,这是由于电化学发光探针与凝血酶形成了大质量生物复合物,使其扩散系数增大和电化学发光效率降低所致。实验结果表明,电化学发光强度的降低与凝血酶浓度在0.5~7.5nmol/L范围内呈良好的线性关系。该方法的检测限为0.25nmol/L,对凝血酶测定的相对标准偏差为2.7%(c=5.0nmol/L,n=7)。该方法具有简单灵敏、选择性好和无需探针固定化和冲洗步骤等优点。     

导电高分子纳米粒子负载探针的凝血酶电化学发光适配体传感器

以特异性识别凝血酶的适配体为分子识别物质,以氨基钌联吡啶衍生物（Ru1）为电化学发光信号物质,基于吡咯/N-（2-羧乙基）吡咯纳米粒子（Ppy-pa NPs）负载适配体和Ru1研制了一种高灵敏检测凝血酶的电化学发光适配体传感器.以N-（2-羧乙基）吡咯和吡咯为单体,采用微乳液聚合方法制备了Ppy-pa NPs.通过EDC/NHS将Ru1与Ppy-pa NPs表面的羧基共价连接制备了Ru1功能化Ppy-pa NPs（Ru1-Ppy-pa NPs）.利用核磁共振图谱、傅里叶变换红外光谱和投射电子显微镜图对Ppy-pa NPs和Ru1-Ppy-pa NPs进行了表征.将Ppy-pa NPs Nafion混合物滴涂在石墨电极表面制备成电化学发光化学传感器,可高灵敏检测三丙胺（检出限为3.0×10-8M）.通过电化学氧化将对氨基苯磺酸共价键合在石墨电极表面,将5′修饰氨基凝血酶适配体I（TBA-I）共价连接在对氨基苯磺酸修饰的石墨电极表面制备成电化学发光适配体传感器.将5′修饰氨基凝血酶适配体Ⅱ（TBA-Ⅱ）标记在Ru1-Ppy-pa NPs表面制得电化学发光适配体信号探针（Ppy-pa NPs-Ru1-TBA-II）.当凝血酶存在时,凝血酶与电极表面的TBA-I特异性结合,再与信号探针结合形成夹心结构,产生很强的电化学发光信号.该传感器具有极低的检出限（3.0×10-16M）和良好的选择性.本工作表明以Ppy-pa NPs为电化学光探针的载体可构建高灵敏度和选择性的电化学发光生物传感器.     

电化学发光-聚合酶链式反应方法检测胰腺癌中K-ras基因点突变

发展了一种可用于快速检测胰腺癌中K-ras癌基因点突变的电化学发光-聚合酶链式反应(ECL-PCR)分析方法。该法采用三联吡啶钌标记的上游引物和生物素标记的下游引物对目的片段进行PCR扩增;再采用限制性内切酶MvaI对扩增产物进行酶切。由于野生型样品和突变型样品间存在酶切位点的变化,其中只有野生型样品能被切断;通过生物素与链霉亲和素包被的磁珠连接,将生物素标记的DNA片段收集到检测池中,进行电化学发光检测。采用该法对13例胰腺癌组织中的K-ras癌基因第12位密码子进行点突变分析,只需要10μL样品、20min孵育时间和30s采集时间,就可得出其中有12例存在点突变,点突变率为92.3%。本方法操作简便、安全、快速、灵敏,可用于检测任何一种导致限制性内切酶位点改变的基因点突变。     

基于RNA杂交的马铃薯纺锤块茎类病毒检测芯片

报道了一种检测植物类病毒RNA的新方法——RNA杂交芯片技术, 即将cDNA芯片技术与RNA斑点杂交技术相结合, 将马铃薯样品的总RNA直接固定在玻片上, 用荧光标记制备检测马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)的特异探针, 探针与芯片杂交后分析杂交信号以确定相应的样品有无PSTVd侵染. 参照膜杂交的方法, 确定了RNA芯片的制备条件, 并用以检测了马铃薯样品的PSTVd侵染情况, 检测结果与RT-PCR结果相符, 阳性产物经克隆测序证实为PSTVd.     

一种基于金磁微粒的电化学发光免疫检测方法

基于金磁微粒(GoldMag particles)的磁性分离富集性能与良好的生物相容性,直接在金磁微粒表面吸附固定相思子毒素多抗制备捕获探针,以三联吡啶钌标记相思子毒素单抗作为电化学发光探针,两者与相思子毒素发生特异性免疫反应形成夹心复合物,成功建立了一种简单、快速、灵敏的相思子毒素电化学发光免疫检测方法。利用此方法检测相思子毒素,其浓度在0.2～1 500μg/L范围内与电化学发光强度成良好的对数线性关系,检出限为0.2μg/L。与生物素-亲和素固定法相比,该法的检出限相当,其线性范围更宽、操作更简化,具有通用性,可以此为基础发展生物毒素及其它蛋白的检测方法,用于临床诊断、环境监测及生物防护等领域。     

聚丙烯酸钠-Nafion包覆三联吡啶钌掺杂SiO_2纳米粒乙肝表面抗原的检测

利用Nafion与聚丙烯酸钠的混合膜包覆三联吡啶钌(Ru(bpy)_3~(2+))掺杂SiO_2纳米粒制备了用于生物标记的电化学发光纳米粒,并构建了信号放大的免疫检测探针。结合免疫磁珠构建的捕获探针,建立了乙肝表面抗原的双抗体夹心电化学发光免疫检测方法。该方法的线性范围为5.0~1000pg·m L~(-1),相关系数R~2为0.9959,最低检测限为1.73 pg·m L~(-1)(S/N=3),表现出了高达200倍浓度差的宽线性检测范围和高灵敏度。     

基于杂交链式反应信号放大和磁分离技术荧光检测端粒酶活性

端粒酶是由RNA和蛋白质组成的一种核糖核蛋白酶, 它一般在癌细胞中被激活. 它与端粒DNA的不断复制以及癌细胞的不断增殖密切相关. 所以检测端粒酶的活性对癌症的早期诊断以及以端粒酶为靶标分子的抗癌药物的开发具有重要意义. 利用杂交链式反应(HCR)无酶放大检测信号, 建立了一种简单、快速的端粒酶活性检测方法. 端粒酶延伸产物是一条末端具有(ggttag)_n重复序列的DNA. 在实验过程中, 通过链霉亲合素与生物素的特异性作用将端粒酶延伸产物连接在磁性微球上. 设计一条端粒酶延伸产物特异性的DNA探针I作为杂交链式反应的引发探针. DNA探针I的3'-端与端粒酶延伸产物的重复序列匹配, 通过杂交, DNA探针I被固定在磁球上; DNA探针I的5'-端引发DNA探针II和探针III发生杂交链式反应. DNA探针II和探针III上都标记有荧光基团, 可以利用荧光直接进行信号检测. 在反应过程中, 通过磁分离去除多余未反应的三种DNA探针. 在优化条件下, 可以检测到1.0×10⁵个Hela细胞中的端粒酶活性. 该方法简单、快速、检测成本低, 分析全程无酶参与, 在肿瘤或癌症的临床诊断以及以端粒酶为靶标分子的抗癌药物的筛选上具有广阔的应用前景.     

微芯片毛细管电泳电化学/电化学发光同时检测药物分子

提出了基于毛细管电泳芯片的电化学和电化学发光同时检测技术.在此芯片系统中,三联吡啶钌Ru(bpy)₃²⁺[Tris(2,2'-bypiridyl) ruthenium(Ⅱ)]既作为电化学发光(ECL)检测所需的发光试剂与被分析物反应,生成激发态的Ru(bpy)₃^2+*,从而产生电化学发光信号;又具有催化作用参与电极表面的电化学反应,从而得到增强的电流响应.电化学信号与电化学发光信号同时产生并被分别纪录,从而实现了电化学和电化学发光的同时检测.这种芯片由两部分构成,分别是带有分离和进样通道的聚二甲基硅氧烷(PDMS)层和ITO(Indium tin oxide)工作电极底片.PDMS层与ITO电极底片采用可逆键合的方式组成芯片,该芯片大大简化了操作过程,提髙了发光信号的采集效率.在整个实验过程中,ITO电极表现出良好的稳定性,可长时间多次使用.选用山莨菪碱和氧氟沙星两种药物分子作为被分析物,对芯片系统性能进行了表征.     

负热膨胀材料立方ZrMo2O8合成研究

采用湿化学法合成了前驱物ZrMo2O7(OH)2(H2O)2, 并用SEM观察了不同回流时间所得晶粒形貌, 结果显示经过较短时间的回流(12 h)就能获得一定尺寸的晶粒并趋于稳定.观察了不同回流温度所得前驱物晶粒形貌, 其晶粒呈长方体棒状形态, XRD结果证明结晶度随回流温度的升高而提高; 探讨了不同回流温度下所获得的前驱物ZrMo2O7(OH)2(H2O)2对合成立方ZrMo2O8的影响.结果表明, 100 ℃回流所得前驱物经热处理后可获得纯立方相ZrMo2O8.此外, 对前驱物的热处理温度选择在400 ℃左右有利于纯立方相的获得.     

LiSiF3体系的构型及异构化反应的理论研究

用从头计算方法在G2 (MP2 )水平上考察了LiSiF3 体系的各可能异构体以及这些异构体之间的异构化反应 .势能面上 4个极小值点的相对能量分别为 - 1 2 8.6 ,- 1 94.3,- 1 2 .7和 - 1 2 2 .8kJ/mol(以LiF和SiF2 的能量之和为零点 ) .含有 3个F Si F Li四元环具有C3v对称性的四元环构型能量最低 .其余的 3个构型异构化为四元环构型的过程中的势垒最高为 1 2 .5kJ/mol.     

Mg(NTf2)2催化Friedl(a)nder缩合反应合成喹啉衍生物

以Mg(NTf2)2为催化剂,在室温由2-氨基芳基酮和α-亚甲基酮通过Friedl(a)nder缩合反应合成了喹啉衍生物.该法操作简便,反应条件温和,产率高,反应时间短.     

Synthesis and Characterization of New Schiff Bases 2-(2-(2-(Aryl)Methyleneamino)Phenylthio) Ethylthio)-N-((aryl)Methylene)Benzeneamine

A series of Schiff bases containing four to six coordination sites N₂S₂ X₂(X = O,N) 2-(2-(2-(aryl)methyleneamino)phenylthio)ethylthio)-N-((aryl)methylene)benzeneamine (2c–f) were prepared from the reaction of 1,2-di(2-aminophenylthio)ethane (1) with aromatic aldehydes. All compounds were characterized by means IR, mass, ¹H and ¹³C NMR spectroscopy, and elemental analysis, and in the case of 2b with a single crystal X-ray diffraction. The X-ray crystal structure of 2b showed that the resonance occurs between aromatic rings, through the C=N bonds of the molecule.

Supplemental materials are available for this article. Go to the publisher's online edition of Phosphorus, Sulfur, and Silicon and the Related Elements to view the free supplemental file.     

DNA对Ru(bpy)_2(dppx)~(2+)-SDS体系共振光散射的猝灭作用及其应用

研究了Ru(bpy)2(dppx)2+-SDS-DNA(bpy=2,2′-联吡啶,dppx=7,8-二甲基-吡啶并[3,2-a:2′,3′-c]吩嗪)体系的共振光散射光谱。结果表明,在阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)预胶束聚集体存在下,Ru(bpy)2(dppx)2+-SDS体系具有很强的共振光散射,DNA的加入使其共振散射光猝灭。探讨了反应机理。基于DNA对Ru(bpy)2(dppx)2+-SDS体系共振光散射的猝灭作用,建立了共振光散射法测定DNA的新方法。在最佳实验条件下,体系在393nm处的共振光散射猝灭程度与DNA的浓度呈线性关系,线性范围为0.01～1.2mg/L,检出限为1.5μg/L。     

Saturated Nitrogen-containing Heterocycles. 20. Catalytic Reduction of N-Hydroxyethylpyridinium and Quinolinium Salts

Previously unknown N-(2-hydroxyethyl)perhydroquinolines and N-(2-hydroxyethyl)piperidines were synthesized by catalytic reduction of N-(2-hydroxyethyl)tetrahydroquinolinium and N-(2-hydroxyethyl)tetrahydropyridinium tetrafluoroborates. A scheme for the formation of the hydrogenation products is presented.     

Zur Kenntnis der Struktur von Sr3(BN2)2

On the Structure of Sr₃(BN₂)₂ The structure of Sr₃(BN₂)₂ was determined on single-crystal X-ray data collected with a four-circle diffractometer. Sr₃(BN₂)₂ crystallizes in the cubic space group Im3 m (no. 229) with a = 764.56(3) pm and Z = 3. The structure contains linear BN^3?₂ ions with a B? N bond length of 135.8(6) pm. The straight forward synthesis employing metal nitrides plus boron nitride yielded crystalline powders of M₃(BN₂)₂ (M = Ca, Sr) at 1100°C (5 days). Cubic indexing of guinier patterns gave a = 765.8(1) pm for M = Sr and a = 734.7(2) pm for M = Ca. The structure refinement on a single crystal of Sr₃(BN₂)₂ revealed that one strontium site (2a; 0, 0, 0) is occupied by only about 50%. It has been tried to fully occupy this site with an alkali metal (A) to obtain ASr₄(BN₂)₃ (Z = 2). Reactions with A = Na yielded crystalline powders. Cubic indexing of the guinier pattern analogous to that of Sr₃(BN₂)₂ gave a = 754.2(1) pm.     

鉴别三类硫代烷基噻吩质谱的聚类法

本文选取和计算了2-(2-烷基硫代乙基)噻吩、2-(3-烷基硫代丙基)噻吩和2-硫代烷基噻吩质谱的四个特征离子系列,并且运用这四个特征参数综合地对它们的质谱进行评价,提出了鉴别这三类同分异构体质谱有效的聚类方法。     

Synthesis and Crystal Structure of the Dicopper(II) Complex [Cu2{Ph2P(=O)(o‐C6H4)CO2}2(THF)2(H2O)2][BF4]2 by Oxidation of [Cu{Ph2P(o‐C6H4)C(=O)H}2(NCMe)][BF4] with Aqueous H2O2

Treatment of [Cu(pcho)₂(NCMe)][BF₄] 1 (pcho = 2‐(diphenylphosphino)benzaldehyde) with aqueous H₂O₂ in THF solvent affords [Cu₂(dpb)₂(THF)₂(H₂O)₂] [BF₄]₂ 2 (dpb = 2‐(diphenylphosphinoxide)‐benzoate) after crystallization from diethyl ether. This reaction involves oxidation of Cu(I) to Cu(II) ion, phosphine to phosphinoxide, and benzaldehyde to benzoate species. The crystal structure of 2 consists of two copper(II) atoms bridged by two carboxylate moieties of the dpb ligands. The coordination about each copper(II) atom is a distorted trigonal bipyramid.     

The mass spectral fragmentation of copper(II) complexes of cyclic β-diketones

Summary Electron impact mass spectra of several bis(2-trifluoroacetylcycloalkanonato) copper(II) and bis(2-acetylcycloalkanonato) copper(II) chelates, in which the cyclic -diketonate moiety comprises five-, six-, seven-, and eight-membered ring systems, have been recorded. Compared with other copper(II) chelates of acyclic -diketonates, the present series of copper(II) cyclic -diketonates exhibited more pronounced intramolecular reduction reactions accompanied by a remarkably facile hydrogen migration resulting in the formation of the [LCu^(I)-H]⁺ ion as the base peak in all complexes investigated. The proposed fragmentation pathways leading to the formation of a number of important copper-containing daughter ions have been confirmed by metastable scanning of the corresponding parent ion spectra using the defocusing technique.

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Massenspektroskopische Fragmentierung von Kupfer(II)-Komplexen cyclischer -Diketone

Zusammenfassung Es wurden die EI-Massenspektren einiger Bis(2-trifluoracetylcycloalkanato)kupfer(II)-und Bis(2-acetylcycloalkanato)kupfer(II)-Chelate mit fünf-, sechs-, sieben- und achtgliedrigen cyclischen -Diketonat-Liganden gemessen. Im Vergleich zu anderen Kupfer(II)-Chelaten mit offenkettigen -Diketonaten zeigen die cyclischen Komplexe eine ausgeprägte Neigung zu intramolekularen Reduktionsreaktionen, die von einer bemerkenswert leicht erfolgenden Wasserstoffwanderung begleitet sind; dies führt zur Bildung von [LCu^(I)-H]⁺ als Basispeak für alle untersuchten Komplexe. Die vorgeschlagenen Fragmentierungswege, die zur Bildung einer Reihe wichtiger kupferhaltiger Tochterionen führen, wurden durch Untersuchung der entsprechenden metastabilen Mutterionen mittels der Defokussierungsmethode überprüft.